Use of calcium phosphate cement scaffolds for bone tissue engineering: in vitro study / A utilização do cimento de fosfato de cálcio como arcabouço para engenharia de tecido ósseo: estudo in vitro

Purpose: To evaluate the ability of macroporous tricalcium phosphate cement (CPC) scaffolds to enable the adhesion, proliferation, and differentiation of mesenchymal stem cells derived from human bone marrow. Methods: Cells from the iliac crest of an adult human donor were processed and cultured on macroporous CPC discs. Paraffin spheres sized between 100 and 250µm were used as porogens. Cells were cultured for 5, 10, and 15 days. Next, we assessed cells' behavior and morphology on the biomaterial by scanning electron microscopy. The expression levels of the BGLA and SSP1 genes and the alkaline phosphatase (ALP) activity were quantified by the quantitative real-time polymerase chain reaction technique (QT-PCR) using the fluorophore SYBR GREEN®. Results: QT-PCR detected the expression of the BGLA and SSP1 genes and the ALP activity in the periods of 10 and 15 days of culture. Thus, we found out that there was cell proliferation and differentiation in osteogenic cells. Conclusion: Macroporous CPC, with pore sized between 100 and 250µm and developed using paraffin spheres, enables adhesion, proliferation, and differentiation of mesenchymal stem cells in osteogenic cells and can be used as a scaffold for bone tissue engineering.

Objetivo: Avaliar a capacidade de suportes tridimensionais macroporosos de cimento de fosfato de cálcio (CFC), de permitir a adesão, proliferação e diferenciação de células-tronco mesenquimais derivadas da medula óssea humana. Métodos: células obtidas da crista ilíaca de um doador humano adulto foram processadas e cultivadas sobre suportes de CFC, macroporosos, que tiveram como corpo gerador de poros, microesferas de parafina, com tamanho entre 100 e 250µm. Os períodos de cultura estabelecidos foram de cinco, 10 e 15 dias. Após estes períodos, o comportamento e a morfologia das células junto ao biomaterial foram avaliados por meio de Microscopia Eletrônica de Varredura. Os níveis de expressão dos genes BGLA e SSP1 bem como a atividade da Fosfatase Alcalina (ALP) foram quantificados pela técnica de PCR em Tempo Real (QT-PCR) utilizando o fluoróforo SYBR Green®. Resultados: O QT-PCR detectou a expressão dos genes BGLA e SSP1 e a atividade da fosfatase alcalina nos períodos de 10 e 15 dias de cultura. No período de cinco dias, não foi observada a expressão de nenhum dos genes investigados. Conclusão: O CFC, macroporoso, com tamanho de poros entre 100 e 250µm, criados por meio da utilização de microesferas de parafina, permite a adesão, proliferação e diferenciação de células-tronco mesenquimais em células osteogênicas, podendo ser utilizado como arcabouço para engenharia de tecido ósseo.

Use of calcium phosphate cement scaffolds for bone tissue engineering: in vitro study.

PURPOSE: To evaluate the ability of macroporous tricalcium phosphate cement (CPC) scaffolds to enable the adhesion, proliferation, and differentiation of mesenchymal stem cells derived from human bone marrow. METHODS: Cells from the iliac crest of an adult human donor were processed and cultured on macroporous CPC discs. Paraffin spheres sized between 100 and 250µm were used as porogens. Cells were cultured for 5, 10, and 15 days. Next, we assessed cells' behavior and morphology on the biomaterial by scanning electron microscopy. The expression levels of the BGLA and SSP1 genes and the alkaline phosphatase (ALP) activity were quantified by the quantitative real-time polymerase chain reaction technique (QT-PCR) using the fluorophore SYBR GREEN(®). RESULTS: QT-PCR detected the expression of the BGLA and SSP1 genes and the ALP activity in the periods of 10 and 15 days of culture. Thus, we found out that there was cell proliferation and differentiation in osteogenic cells. CONCLUSION: Macroporous CPC, with pore sized between 100 and 250µm and developed using paraffin spheres, enables adhesion, proliferation, and differentiation of mesenchymal stem cells in osteogenic cells and can be used as a scaffold for bone tissue engineering.

Effect of titanium surface roughness on human bone marrow cell proliferation and differentiation: an experimental study.

PURPOSE: To assess the proliferation and differentiation of human bone marrow-derived cells cultured on titanium surfaces with different roughness characteristics. METHODS: Cells obtained from the iliac crest of an adult human donor were routinely processed and cultured on titanium surfaces of varying roughness, according to their preparation method: polishing only (smooth surface) and polishing followed by etching with HF/HNO3 for 15 and 30 minutes (rough surfaces). Surfaces were assessed using scanning electronic microscopy and profilometry. RESULTS: Titanium disks etched with acid for 15 minutes allowed greater cell proliferation in all culture periods. The level of osteopontin and osteocalcin expression was increased in both acid-etched groups, which indicates an advanced stage of differentiation of cells into osteoblasts. CONCLUSIONS: Increased surface roughness accelerates the differentiation of undifferentiated mesenchymal cells into osteogenic lineage cells, but does not necessarily favor cell proliferation. An intermediate surface roughness of 0.5microm (acid etching for 15 minutes) favors both initial and final cell responses.

Effect of titanium surface roughness on human bone marrow cell proliferation and differentiation: an experimental study / Efeito da rugosidade de superfície de discos de titânio sobre a proliferação e diferenciação de células de medula óssea humana: estudo experimental

PURPOSE: To assess the proliferation and differentiation of human bone marrow-derived cells cultured on titanium surfaces with different roughness characteristics. METHODS: Cells obtained from the iliac crest of an adult human donor were routinely processed and cultured on titanium surfaces of varying roughness, according to their preparation method: polishing only (smooth surface) and polishing followed by etching with HF/HNO3 for 15 and 30 minutes (rough surfaces). Surfaces were assessed using scanning electronic microscopy and profilometry. RESULTS: Titanium disks etched with acid for 15 minutes allowed greater cell proliferation in all culture periods. The level of osteopontin and osteocalcin expression was increased in both acid-etched groups, which indicates an advanced stage of differentiation of cells into osteoblasts. CONCLUSIONS: Increased surface roughness accelerates the differentiation of undifferentiated mesenchymal cells into osteogenic lineage cells, but does not necessarily favor cell proliferation. An intermediate surface roughness of 0.5µm (acid etching for 15 minutes) favors both initial and final cell responses.

OBJETIVO: Avaliar a proliferação e diferenciação de células derivadas da medula óssea humana sobre superfícies de titânio com diferentes rugosidades de superfície. MÉTODOS: Células obtidas da crista ilíaca de um doador humano adulto foram rotineiramente processadas e cultivadas sobre superfícies de titânio preparadas através de polimento apenas, ou polimento seguido de condicionamento com HF/HNO3 por 15 e 30 minutos, para produzir superfícies com rugosidades variadas, conforme determinado por Microscopia Eletrônica de Varredura e perfilometria. RESULTADOS: Discos de titânio condicionados com ácido por 15 minutos permitiram maior proliferação celular em todos os períodos de cultura. O nível de expressão das proteínas osteopontina e osteocalcina estava aumentado em ambos os grupos condicionados com ácido, indicando que as células estavam comprometidas com o fenótipo osteogênico. CONCLUSÕES: O aumento na rugosidade de superfície acelera a diferenciação de células mesenquimais indiferenciadas em células de linhagem osteogênica, mas não necessariamente favorece a proliferação celular. Uma superfície com rugosidade intermediária de 0,5µm (condicionada com ácido por 15 minutos) favorece tanto as respostas celulares iniciais quanto as finais.

Técnica cirúrgica para remoção dos terceiros molares inferiores e a classificação de Pell-Gregory: um estudo relacionado / Relationship between the surgical technique for extracting lower third

O objetivo deste trabalho foi classificar, através de radiografias panorâmicas, as posições de terceiros molares inferiores, de acordo com a classificação de PELL & GREGORY, relacionando-as com a técnica cirúrgica utilizada para remoção destes. Diante dos resultados obtidos, pôde-se concluir que existe relação entre a posição do terceiro molar inferior e a escolha da técnica cirúrgica a ser empregada; a posição mais freqüentemente observada foi a 1A da Classificação de Pell e Gregory e, quanto maior o grau de inclusão dentária, maior a necessidade do emprego de técnica cirúrgica mais invasiva.

Dentes supranumerários dismórficos – relato de caso clínico / Dysmorphic supernumerary teeth – case report

A existência de dente supranumerário, ou hiperdontia, traduz um excesso no número de dentes, que pode ocorrer em ambas às dentições. Sua presença pode ocasionar a formação de cistos dentígeros, reabsorção de dentes adjacentes, ou ainda ser erroneamente diagnosticada como odontoma do tipo composto. O objetivo deste trabalho é descrever um caso clínico em que dentes supranumerários dismórficos estão presentes na região de pré-molares, maxilar direito, assim como o seu diagnóstico e conduta frente ao caso.

Avaliação do efeito do laser não cirúrgico (LLLT) no crescimento e aderência celular de fibroblastos cultivados sobre implantes de titânio: um estudo in vitro / Evaluation of non-surgical laser (LLLT) on the growth and cell adherence of fibroblasts cultivated on titanium implants: in vitro study

Recentemente, a laserterapia tem sido utilizada em odontologia visando aos seus efeitos terapêuticos e biomodulatórios sobre o aumento da velocidade e qualidade da integração entre os implantes dentais e os tecidos ósseos e periodontal. Entretanto, permanece incerto se é possível haver bioestimulação do crescimento celular pelo laser na presença de implantes de titânio. O objetivo do presente estudo foi examinar o crescimento, a proliferação e aderência sobre a superficie de titânio de uma linhagem de fibroblastos (NIH-3T3) submetida à irradiação com laser diodo (λ=685nm). Dois grupos com quatro culturas cada foram cultivadas sobre discos de titânio previamente polidos e colocados numa placa de 24 poços. As células foram cultivadas em meio DMEM suplementado com 10 por cento de soro fetal bovino (SFB). Após o cultivo, um grupo foi irradiado localmente por três sessões (24, 48 e 72 horas) (laser diodo λ=685nm, 07mW, Ø~0,60nm), com uma dose de 0,8 j.cm² por sessão, e o outro foi mantido sem qualquer tratamento. Um grupo de controle de células cultivadas sobre a placa também foi conduzido. A aderência celular foi avaliada pela técnica de coloração com um agente intercalante de DNA (iodeto de propício) e o crescimento celular, pela contagem em hemocitômetro. De acordo com a contagem do número de células observadas em cada grupo, foi possível determinar nos grupos experimentais um aumento estatisticamente significativo no número médio de células nos períodos de 72 (p=0,010) e 96 horas (p=0,007) após o cultivo quando comparados com seus respectivos controles. Este estudo sugere que o laser, nas condições descritas, pode afetar positivamente a proliferação celular in vitro e, assim, pode desempenhar uma importante função na integração entre os implantes dentais e o tecido periodontal

Angina de Ludwig associada à presença de corpo estranho em região sublingual / Ludwig´angina associated to the presence of foreing body in the floor of the mouth

A angina de Ludwig, apesar de incomum, ainda é considerada uma condição de emergência em razão do risco de obstrução das vias aéreas superiores. O tratamento é baseado no diagnóstico precoce, administração parenteral de antibióticos apropriados, proteção às vias aéreas e denagem cirúrgica. É apresentado um caso clínico de angina de Ludwig causada pela remoção cirúrgica de um terceiro molar inferior e associada à presença de corpo estranho na região sublingual