A Synopsis of Hepatitis C Virus Treatments and Future Perspectives.

Hepatitis C virus (HCV) infection is a worldwide public health problem. Chronic infection with HCV can lead to liver cirrhosis or cancer. Although some immune-competent individuals can clear the virus, others develop chronic HCV disease due to viral mutations or an impaired immune response. IFNs type I and III and the signal transduction induced by them are essential for a proper antiviral effect. Research on the viral cycle and immune escape mechanisms has formed the basis of therapeutic strategies to achieve a sustained virological response (SVR). The first therapies were based on IFNα; then, IFNα plus ribavirin (IFN-RBV); and then, pegylated-IFNα-RBV (PEGIFNα-RIV) to improve cytokine pharmacokinetics. However, the maximum SVR was 60%, and several significant side effects were observed, decreasing patients' treatment adherence. The development of direct-acting antivirals (DAAs) significantly enhanced the SVR (>90%), and the compounds were able to inhibit HCV replication without significant side effects, even in paediatric populations. The management of coinfected HBV-HCV and HCV-HIV patients has also improved based on DAA and PEG-IFNα-RBV (HBV-HCV). CD4 cells are crucial for an effective antiviral response. The IFNλ3, IL28B, TNF-α, IL-10, TLR-3, and TLR-9 gene polymorphisms are involved in viral clearance, therapeutic responses, and hepatic pathologies. Future research should focus on searching for strategies to circumvent resistance-associated substitution (RAS) to DAAs, develop new therapeutic schemes for different medical conditions, including organ transplant, and develop vaccines for long-lasting cellular and humoral responses with cross-protection against different HCV genotypes. The goal is to minimise the probability of HCV infection, HCV chronicity and hepatic carcinoma.

SARS-CoV-2 Infection in Venezuelan Pediatric Patients-A Single Center Prospective Observational Study.

Several studies suggest that children infected with SARS-CoV-2 have fewer clinical manifestations than adults; when they develop symptoms, they rarely progress to severe disease. Different immunological theories have been proposed to explain this phenomenon. In September 2020, 16% of the active COVID-19 cases in Venezuela were children under 19 years. We conducted a cross-sectional study of pediatric patients' immune response and clinical conditions with SARS-CoV-2 infection. The patients were admitted to the COVID-19 area of the emergency department of Dr José Manuel de los Ríos Children's Hospital (2021-2022). The lymphocyte subpopulations were analyzed by flow cytometry, and IFNγ, IL-6, and IL-10 serum concentrations were quantified using commercial ELISA assays. The analysis was conducted on 72 patients aged one month to 18 years. The majority, 52.8%, had mild disease, and 30.6% of the patients were diagnosed with MIS-C. The main symptoms reported were fever, cough, and diarrhea. A correlation was found between IL-10 and IL-6 concentrations and age group, lymphocyte subpopulations and nutritional status and steroid use, and IL-6 concentrations and clinical severity. The results suggest a different immune response depending on age and nutritional status that should be considered for treating pediatric COVID-19 patients.

Association of viral load and physical status of HPV-16 with survival of patients with head and neck cancer.

INTRODUCTION: Head and neck cancers (NHCs) are of multifaceted origins, and tobacco and alcohol are the primary risk factors. Currently, other factors associated with the genesis of these tumours are being considered, among these viral infections, especially human papillomavirus (HPV) infection. OBJECTIVE: The objective was to evaluate HPV infection, HPV-16 E6 load and its physical status in patients with squamous cell carcinoma in the head and neck and evaluate its effects in the survival of these patients. METHODOLOGY: A total of 80 fresh biopsies of HNC were evaluated. The genetic material was extracted using the commercial kit QIAGEN. The detection and classification of HPV were carried out using INNO-LiPA, whereas the quantification and analysis of integration of the viral genome into the host cell were carried out using real-time PCR. RESULTS: The average age of the patients included was 60.34 ± 14.48 years, with a predominance of the male gender. The most frequent HPV infection was genotype 16 (52.8%), with an average of 10 copies of the HPV-16 E6/ß-globin gene. Furthermore, an integration of the viral genome in the host cell was observed in 86% of cases with a statistically significant relationship between the location of the tumour and the viral load (p < 0.05). CONCLUSIONS: HPV-16 is the most common infection, and its physical status in the host cell is the determining factor in establishing response to treatment. However, more studies are needed to demonstrate the role of HPV infection in carcinogenesis.

Performance of molecular methods for identification of unusual subtypes of hepatitis C virus genotype 2

Introduction: Hepatitis C virus (HCV) displays high genetic variability, with seven genotypes and numerous subtypes. The determination of the viral type has been essential for the selection and timing of antiviral treatment. In Venezuela, HCV genotype 2 is relatively diverse, being particularly prevalent subtype 2j. Objective: To evaluate the performance of methodologies for genotyping HCV, particularly for identification of subtype 2j. Materials and methods: HCV genotype and subtype were determined by reverse hybridization technique (LiPA) and sequencing of the HCV 5'UTR and NS5B regions. Results: A total of 65 samples from HCV-infected patients were analyzed. PCR amplifications of the 5'UTR region exhibited the highest sensitivity (100% vs 91% for LiPA and 77% for NS5B). Genotype determination, taking as reference test NS5B, showed 100% concordance with the other methods, and 67% and 59% for subtypes with 5´NC and LiPA, respectively. NS5B sequencing allowed the identification of subtypes 2j and 2s, which were not detected by the other methods. A specific LiPA pattern was not observed for HCV subtype 2j. Conclusion: Although being the methodology with lowest sensitivity for amplification of HCV RNA, sequencing NS5B region remains a powerful tool for correct discrimination of the different HCV subtypes, which is of epidemiological relevance.

Desempeño de métodos moleculares para la identificación de subtipos poco comunes del virus de la hepatitis C, genotipo 2 / Performance of molecular methods for identification of unusual subtypes of hepatitis C virus genotype 2

Resumen Introducción. El virus de la hepatitis C (HCV) presenta una gran variabilidad genética, con siete genotipos y numerosos subtipos. La determinación del tipo viral ha sido fundamental para la escogencia y la duración del tratamiento antiviral adecuado. En Venezuela, el genotipo 2 del HCV es relativamente diverso, siendo particularmente prevalente el subtipo 2j. Objetivo. Evaluar el desempeño de las metodologías para la determinación del genotipo del HCV, particularmente para la identificación del subtipo 2j. Materiales y métodos. Se determinaron el genotipo y el subtipo del HCV mediante la técnica de hibridación inversa LiPA (Line Probe Assay) y secuenciación de las regiones genómicas 5'NC y NS5B del virus. Resultados. En 65 muestras analizadas, la metodología basada en la amplificación de la región 5'NC mostró mayor sensibilidad (100 %), en comparación con la técnica LiPA (91 %) y la secuenciación de la región NS5B (77 %). La determinación de genotipo, tomando como método de referencia la secuenciación de NS5B, mostró un alto grado de concordancia para la secuenciación de la región 5´NC y la hibridación inversa LiPA, con 100 % en la asignación de genotipos, comparado con 70 % y 66 % para los subtipos, respectivamente. La secuenciación de la región NS5B permitió identificar los subtipos 2j y 2s, los cuales no fueron detectados por las otras metodologías. No se observó un patrón característico para las muestras subtipo 2j en la hibridación inversa LiPA. Conclusión. Aunque es la metodología con menor sensibilidad, la secuenciación de la región NS5B es una herramienta poderosa para la correcta discriminación de los distintos subtipos circulantes del HCV, lo cual reviste importancia epidemiológica.

Abstract Introduction: Hepatitis C virus (HCV) displays high genetic variability, with seven genotypes and numerous subtypes. The determination of the viral type has been essential for the selection and timing of antiviral treatment. In Venezuela, HCV genotype 2 is relatively diverse, being particularly prevalent subtype 2j. Objective: To evaluate the performance of methodologies for genotyping HCV, particularly for identification of subtype 2j. Materials and methods: HCV genotype and subtype were determined by reverse hybridization technique (LiPA) and sequencing of the HCV 5'UTR and NS5B regions. Results: A total of 65 samples from HCV-infected patients were analyzed. PCR amplifications of the 5'UTR region exhibited the highest sensitivity (100% vs 91% for LiPA and 77% for NS5B). Genotype determination, taking as reference test NS5B, showed 100% concordance with the other methods, and 67% and 59% for subtypes with 5´NC and LiPA, respectively. NS5B sequencing allowed the identification of subtypes 2j and 2s, which were not detected by the other methods. A specific LiPA pattern was not observed for HCV subtype 2j. Conclusion: Although being the methodology with lowest sensitivity for amplification of HCV RNA, sequencing NS5B region remains a powerful tool for correct discrimination of the different HCV subtypes, which is of epidemiological relevance.

An overview of hepatitis C vaccines.

The hepatitis C virus (HCV) is a prevalent human pathogen that causes persistent liver infections in most infected individuals; thus, efforts to develop a safe vaccine, preventive and therapeutic, are urgently needed. Current approaches for the vaccine include the use of recombinant E1 and E2 proteins, synthetic peptides, viral particles, viral vectors, DNA vaccines, dendritic cells, and prime-boost strategies. However, several problems have been encountered: restricted humoral and cell mediated responses, the low delivery of potentially protective viral epitopes, and the low effectiveness of the adjuvants used in the different protocols. Strong neutralizing antibodies and powerful cellular immune responses are required for an effective vaccine against HCV. New patents are being developed to enhance both immune responses. The high prevalence of global HCV infection obliges the development of new efforts in primary prevention; therefore, a safe and efficient vaccine to confer protection against HCV is urgently needed.

Increased number of non-invariant NKT cells and low number of circulating CD1-expressing leukocytes in patients infected with hepatitis C virus.

Natural killer T (NKT) cells represent an heterogeneous T cell population involved in host immunity against several microorganisms. They also have important immunoregulatory functions. Studies on circulating levels of NKT cells during HCV infection have been focused on the invariant NKT (iNKT) subset which recognizes the non-classical Ag-presenting molecule CD1d, with little information about the non-invariant NKT (non-iNKT) cell subset. In the present study, we assessed the number of both NKT cells subsets and the surface expression of CD1a, b, c and d isoforms in peripheral blood of 31 HCV-infected patients and 31 ages matched healthy individuals. A significant increase of circulating non-iNKT cells was observed in HCV-infected patients as compared to controls (74 ± 57 cells/µL vs 42 ± 16 cells/µL respectively, p<0.0042) with no differences in the iNKT subset. In addition, the percentage of CD1a, CD1c and CD1d-expressing leukocytes was significantly low in patients as compared to controls. These findings suggest that both components, non-iNKT cells and CD1 molecules expression are involved in the control of natural immunity against HCV.

Efecto de la proteína E2 del virus de hepatitis C sobre la activación de células NK / Effect of E2 protein of hepatitis C virus on the activation of NK cells

En estudios previos, se ha descrito un disminución de la activación y actividad citotóxica de las células NK en los pacientes infectados con hepatitis C; sin embargo, se desconoce el mecanismo por el cual éste fenómeno ocurre. En el presente reporte se estudió el efecto de la proteína E2 de la envoltura del virus o de la estimulación de su receptor con el anticuerpo anti-CD81 sobre la fosforilación de tirosinas, serinas, las enzimas: proteína quinasa C y fosfoinositol 3 quinasa, el factor de transcrición Nfkb y el intercambiador de nueclotidos VAV de células NK de controles normales estimulados con anti-CD16. Ambos, la proteína E2 y anti-CD81, combinado o por separado inducen una disminución de la fosforilación de tirosinas y serinas, así como una marcada disminución de la fosforilación de PKC, NFkB, PI3K y en menor grado VAV. Se concluye que la proteína E2 sola y en conjunto con anti-CD81 inducen señales inhibitorias responsables de la disminución en la activación de las células NK de pacientes infectados por el VHC y que éste fenómeno puede ser responsable de la cronicidad que se reporta en dicha enfermedad

The decrease in NK cell activation and cytotoxic activity in patients infected with hepatitis C virus has been described; however, the mechanism by whcih this phenomenon occurs is not known. In the present report, the effect of the E2 protein of the virus envelope or the stimulation of its receptor CD81 with the antibody anti-CD81 on the phosphorylation of tyrosines, serine, the enzymes protein kinase C, phosphoinositol kinase 3 (PI3K), the transcription factor NfkB and the nucleotide exchange protein VAV was assessed in NK cells from normal controls stimulated with anti-CD16. Both the protein E2 and anti-CD81 by themselves or combined, generated a decrease in tyrosine, serine, and a marked decrease in the phosphorylation of PKC, NfkB, PI3k and in less extent in VAV. It is concluded that the E2 protein alone and combined with anti-CD81 induce inhibitory signals responseible for the decrease in the activation of NK cells of infected HCV patients and it could be responsible for the chronicity observed in this disease

CD16 cross-linking induces increased expression of CD56 and production of IL-12 in peripheral NK cells.

Human NK cells are classified into two populations according to the intensity of CD56 surface expression, as well as possession of CD16, FcRIII. CD56(dim)CD16(bright) make up 90% circulating NK cells, whereas CD56(bright)CD16(-/dim) comprises the remaining 10%. Here we report that peripheral NK cells upon CD16 cross-linking up-regulates the expression of activating markers and receptors such as CD25, CD69, NKp44, NKp30, CD40L and the intensity of CD56 expression. Additionally, co-culturing immature DCs with CD16 activated NK cells was found to significantly increase the expression of maturation markers on DCs. These results suggest that CD16 cross-linking on resting peripheral blood NK cells triggers the activation of these cells and induces the appearance of CD56(bright) NK cells. The latter were found capable of producing pro-inflammatory cytokines, IFN-gamma and TNF-alpha and notably IL-12.

Decreased transcription, expression and function of low-density lipoprotein receptor in leukocytes from patients with systemic lupus erythematosus.

The low-density lipoprotein receptor (LDLR) is directly involved in the metabolism of low-density lipoprotein (LDL) and its impairment causes accumulation of plasmatic LDL leading to atherosclerosis, a prevalent disease in patients with systemic lupus erythematosus (SLE). We studied LDLR transcription, expression and function in leukocytes patients with SLE and normal healthy donors (NHD). The ratio LDLR/glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GADPH) mRNAs the expression of LDLR and the uptake of LDL-DiI were significantly lower (p < 0.001) in the patients with SLE. On the contrary, patients with SLE had significantly higher (p < 0.0001) levels of total cholesterol, LDL cholesterol and anti-oxLDL autoantibodies (AAb) as compared to NHD. No correlation between LDLR transcription, expression and function with the SLE disease activity index or with treatment was found. The decreased function of LDLR was independent of treatment. It seems dependent on the sterol regulatory binding protein and may be responsible for the increase of plasma LDL cholesterol and oxLDL AAb further increasing the risk of vascular diseases.

Polimorfismos de receptores semejantes a Toll 2 y 4 en pacientes con asma bronquial y enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) / Polymorphisms of Toll-like receptors 2 and 4 in patients with bronchial asthma and chronic obstructive pulmonary disease (COPD)

Los receptores semejantes a Toll forman parte del sistema inmune. Algunas mutaciones en estos receptores se han relacionado con el desarrollo de enfermedades como el asma bronquial y la enfermedad pulmonar obstructiva crónica. Se realizó un estudio de casos-controles, en el que se incluyeron 100 pacientes con asma bronquial, 100 pacientes con enfermedad pulmonar obstructiva crónica y 100 controles. A través de la técnica de reacción en cadena de la polimerasa, se investigó la presencia de polimorfismos en TLR2 (Arg677Trp y Arg753Gln) y TLR4 (Asp299Gly y Thr399Ile) y su asociación con asma y enfermedad pulmonar obstructiva crónica. Se demostró la presencia de polimorfismos en TLR4 con una frecuencia del 9 por ciento en cada grupo de estudio. No se observó relación alguna entre la presencia de polimorfismos en TLR4 y los índices de gravedad para asma bronquial o enfermedad pulmonar obstructiva crónica. La gravedad de los pacientes con asma y enfermedad pulmonar obstructiva crónica no está relacionada con los polimorfismos en TLR 4

Toll like receptors are important in the inflammatory immune response. Several mutations of these receptors have been related to the development and chronicity of different inflammatory diseases as bronchial asthma and obstructive pulmonary disease. A case control study was performed, 100 patients with bronchial asthma, 100 obstructive pulmonary disease and 100 controls. Restriction based polymorphism PCR analysis was performed for TLR2 (Arg677Trp and Arg753Gln) and TLR4 (Asp299Gly and Thr399Ile) genes and its association with asthma and obstructive pulmonary disease was assessed. The frequency of TLR4 polymorphism was 9 percent in each group studied (asthma, obstructive pulmonary disease and controls). No association was found among TLR4 polymorphism and stage of disease for asthma or obstructive pulmonary disease. TLR4 polymorphism are not associated with the presence or severity of asthma or obstructive pulmonary disease in the Venezuelan population

Reacción en cadena de la Polimerasa cuantitativa en tiempo real: Un ensayo esencial para la definición y el manejo de la Hepatitis Crónica B

Introducción: la gran demanda de un método confiable, reproducible, específico y altamente sensible para la cuantificación de ácidos nucleicos (ADN/ ARN), marcó el desarrollo de los ensayos de Reacción en Cadena de la Polimerasa cuantitativa (RCPc) en tiempo real. Objetivo: descripción y análisis de la RCPc en tiempo real para la definición y el manejo actual de los pacientes con hepatitis crónica B (HCB). Material y Método: fueron investigadas cuarenta muestras de suero provenientes de portadores conocidos del VHB empleando RCPc tiempo real mediante el sistema Rotor-Gene 3000 (Corbett Research, Sydney, Australia). Resultados: el sistema utilizado para RCPc tiempo real detecta secuencias de ADN VHB en un amplio rango que puede ser expresado tanto en copias/ml como en UI/ml. Su aplicación permite la clasificación final de los diferentes portadores del VHB, ilustrándose su utilidad en el seguimiento secuencial de aquellos pacientes con HCB en tratamiento. Conclusión: la detección y la medición de secuencias de ADN VHB, en muestras clínicas de suero mediante RCPc en tiempo real, aporta mayor sensibilidad y precisión para definir la historia natural y el estado de replicación viral de los portadores crónicos del VHB antes, durante y posterior al tratamiento.

Introduction: The great need of a reliable, reproducible, specific and highly sensitive method to detect nucleic acids (DNA/RNA), induced the development of real-time quantitative assays based on polymerase chain reaction (real time PCRq). Objective: Description and analysis of a real time PCRq assay for the definition and management of patients with chronic hepatitis B (CHB). Material and Method: Forty serum samples from known HBV carriers were investigated employing real-time PCRq by means of a Rotor-Gene 3000 system (Corbett Research,Sydney,Australia). Results: the system for realtime PCRq detects a wide range of HBV DNA sequences which could be expressed either in copies/mL or in IU/mL .Its application allows the final classification of different HBV carrier status. An illustration of its usefulness in the sequential follow-up of patients on treatment for CHB is made. Conclusion: the detection and measure of HBV DNA sequences in clinical serum samples through real-time PCRq is more sensitive and exact to define the natural history and the status of viral replication in HBV chronic carriers before, during and after treatment.

Identificación de histoplasma capsulatum en muestras clínicas mediante la técnica de PCR en dos rondas / Detection of histoplasma capsulatum by nested-PCR in clinical specimens

La histoplasmosis es una micosis profunda de distribución mundial cuyo diagnóstico se fundamenta en estudios clínicos, micológicos e inmunológicos. La identificación del agente etiológico en muestras biológicas es difícil de realizar. Se evaluó la técnica de PCR en dos rondas para identificar ADN de Histoplasma capsulatum en muestras clínicas (sangre y médula ósea) y cultivos del hongo. Se ensayaron 3 métodos de aislamiento de ADN basados en los reactivos Tiocianato de Guanidina, Cloruro de Bencilo y Triton-X-100. La técnica de aislamiento con Tiocianato de guanidina resultó de fácil aplicación en muestras clínicas. Sin embargo, se obtuvo un mayor rendimiento de ADN con el reactivo Triton-X-100. La aplicación de la prueba de PCR generó un amplificado de 210 pares de bases el cual fue identificado tanto en las cepas de referencia de H. capsulatum como en 5 muestras de sangre y 2 muestras de médula ósea. Para confirmar la especificidad de la prueba se analizaron cepas de otros hongos no relacionados, Paracoccidioides brasiliensis, Candida glabrata, Cryptococcus neoformans y Coccidioides immitis (C posadasii) las cuales resultaron negativas. La técnica de PCR mostró una sensibilidad de hasta 10pg de ADN de H. capsulatum confirmándose así su utilidad como herramienta de diagnóstico molecular.

[Expression of Fc receptors for IgG in peripheral blood leucocytes from hepatitis C virus infected individuals]. / Expresión de los receptores para el Fc de la IgG en leucocitos de sangre periférica de pacientes con hepatitis C crónica.

The immune response represents a fundamental element in the control of Hepatitis C virus (HCV) infection. Viral and cellular host factors may modulate this response. In the present study, we characterized immune complexes (cryoprecipitates) isolated form HCV-infected patients and evaluated the expression of Fc receptors for IgG (FcgammaR) in peripheral blood leucocytes of these patients. Twelve HCV (+) patients and 12 healthy control individuals were selected for this study. For each group, sera samples were collected for cryoglobulins isolation and characterization and EDTA-anticoagulated venous blood samples were collected for flow cytometry analysis of FcgammaR, CD64 (FcgammaRI), CD32 (FcgammaRII) and CD16 (FcgammaRIII) expression. Presence of HCV RNA in serum and cryoprecipitates was analysed by RT-PCR. Results show that 50% of HCV-infected patients present high levels of cryoglobulins mainly constituted by IgG. Three out of 5 cryoglobulins analyzed by RT-PCR were positive for HCV-RNA. Expression of CD64 was observed mainly in monocytes (80%), CD32 in monocytes, B lymphocytes and neutrophils (> 90%) and CD16 in NK cells and neutrophils (85% and 95% respectively). No differences were observed in the percentage of FcgammaR expression when comparing HCV-infected patients with healthy controls. On the contrary, density of expression of CD32 in monocytes and neutrophils cell populations of HCV patients was significantly lower than that observed in healthy controls (p < 0.05). We concluded that low density expression of FcgammaRII in HCV-infected patients may have implications in the physiopatholgy of HCV infection.

Expresión de los receptores para el Fc de la IgG en leucocitos de sangre periférica de pacientes con hepatitis C crónica / Expression of Fc receptors for IgG in peripheral blood leucocytes from hepatitis C virus infected individuals

La respuesta inmunitaria representa un elemento fundamental en el control de la infección por el Virus del Hepatitis C (VHC). Factores de origen viral y del hospedero modulan dicha respuesta. El presente trabajo tuvo como objetivo caracterizar complejos inmunitarios, bajo la forma de crioglobulinas, de pacientes infectados con el VHC y evaluar la expresión de superficie de los receptores para el Fc de la IgG (FcyR)COLOCARSIGNO en subpoblaciones leucocitarias de sangre periférica de estos pacientes. Se seleccionaron 12 individuos VHC (+) y 12 sujetos sanos. De ambos grupos se tomaron muestras de suero para aislar crioglobulinas y sangre venosa con EDTA para evaluar la expresión e los FcyR CD64 (FcyRI), CD32 (FcyRII) y CD16 (FcyRIII) mediante citometr¡a de flujo. La presencia de ARN del VHC en suero y crioglobulinas fue analizada mediante RT-PCR. Los resultados muestran que el 50 por ciento de los pacientes VHC (+) presentaron niveles elevados de crioglobulinas constituidas fundamentalmente por IgG. En 3 de 5 pacientes con crioglobulinas elevadas se identificó ARN del VHC. La expresión de CD64 se observó principalmente en monocitos (80 por ciento), CD32 en monocitos, linfocitos B y neutrófilos (>90 por ciento) y CD16 en células NK y neutrófilos (85 por ciento y 95 por ciento respectivamente) no encontrándose diferencias significativas entre pacientes y controles. La densidad de expresión de CD32 resultó significativamente menor en poblaciones de monocitos y neutrófilos de pacientes en comparación con controles (p<0,05). Se concluye que esta disminución en la densidad del receptor FcyRII podría tener implicaciones en la fisiopatología de la infección por el VHC.

Estudio de 40 casos de Histoplasmosis en niños y revisión de la literatura / Study of 40 cases of histoplasmosis in children and literature review

En niños, la histoplasmosis es la micosis profunda más frecuente en nuestro país. No es de denuncia obligatoria, por lo que existe un gran subregistro. El objetivo de este trabajo es reportar los casos de histoplasmosis diagnosticados en niños en la Sección de Micología Médica del Instituto de Medicina Tropical (IMT). Universidad Central de Venezuela (UCV), entre julio 2004 y julio 2005, con la finalidad de dar a conocer los principales aspectos de esta entidad a la población médica, en especial a los pediatras. Se evaluaron los pacientes en edad pediátrica (0-18 años) que fueron traídos a la consulta de la Sección y las muestras biológicas que se recibieron en el lapso antes mencionado. Se realizó examen mitológico y se siguió la evolución con el tratamiento. Se encontraron 40 casos de histoplasmosis con edades comprendidas entre 14 días y 16 años, 15 del genero femenino y 25 del genero masculino. Seis eran menores de 1 año, la mayoría (25 casos) provenientes del Distrito capital. Dieciocho presentaron la forma de histoplasmosis diseminada de los cuales 4 fallecieron. Quince presentaron la forma pulmonar aguda y 5 meningitis crónica. Seis pacientes estaban desnutridos, 4 presentaron VIH y 4 tenían tuberculosis. En 18 pacientes se desconoce comorbilidad. Nueve pacientes tenían aumento de la VSG, 7 anemia, 5 leucopenia y 2 pancitopenia. Los datos epidemiológicos fueron sugestivos de histoplasmosis en todos los casos. Se reportaron 40 casos de histoplasmosis en niños, diagnósticados en la Sección de Micología Médica del IMT-UCV. La forma clínica más frecuente fue la histoplasmosis diseminada. Ante la presencia de niños con las características descritas, debe pensarse en histoplasmosis como diagnóstico diferencial, relacionando la epidemiología, clínica, radiología y exámenes de laboratorio. Es necesario practicar mitológico para confirmar la presencia de esta enfermedad.

Interaction of immune complexes isolated from hepatitis C virus-infected individuals with human cell lines.

We investigated the interaction of immune complexes (IC) isolated from hepatitis C virus (HCV)-infected individuals with several cell lines that differentially express Fc receptors, and analyzed viral infection by the presence of HCV RNA sequences. Monocytic (U937 and Monomac-6) and lymphocytic (MOLT-4 and Jurkat) cell lines were incubated with interferon- plus phorbol myristate acetate to stimulate the expression of Fc receptors before addition of IC. Cell interaction with IC was monitored by flow cytometry. Positive cell fluorescence was detected in U937 and Monomac-6 cells [mean fluorescence intensity (MFI) 10.56+/-0.8 and 11.60+/-0.8, respectively]. Incubation of cells with monoclonal antibodies against Fc receptors for IgG before addition of IC decreased MFI in both cell lines (U937 2.1+/-0.5, Monomac-6 4.4+/-0.8, P<0.001), indicating that cell-IC interaction through these receptors was inhibited. In particular, the blockage of FcgammaRII was responsible for this effect. No binding of IC with either MOLT-4 or Jurkat cell lines was detected, which correlated with a very low Fc receptor expression. HCV RNA sequences were identified in the cells up to 120 h of post incubation with IC. These results suggest that IC can mediate entry of HCV to both U-937 and Monomac-6 cell lines mainly through the FcgammaRII.

Biología molecular del virus de hepatitis C / Molecular biology of the hepatitis C virus

El virus de la hepatitis C (VCH) representa un nuevo miembro de la familia flaviviridae cuya caracterización molecular ha sido llevada a cabo en los últimos cinco años. La partícula viral consiste de una envoltura de naturaleza lipoprotéica, derivada de la membrana de la célula hospedera, que contiene los dos principales polipéptidos estructurales designados como el E1 y E2. La envoltura rodea la nucleocápside, estructura constituida principalmente por una proteína básica que está en estrecha interacción con el genoma viral representado por una molécula de ARN de cadera sencilla polaridad positiva con una longitud apróximada de 9.600 nucleótidos. La organización genómica del VCH es similer a la de Pestivirus y Flavivirus, Ubicándose las secuencias que codifican para las proteínas estructurales hacia el extremo 5 y las que codifican las proteínas estructurales hacia el extremo 3 del genoma. Ambos tipos de polipéptidos son generados a partir de una poliproteína de 3.000 aa que es procesada proteolíticamente por enzimas de origen celular y viral. Dos regiones no codogénicas se identifican hacia los extremos 5 y 3 del genoma y se caracterizan por presentar secuencias altamente conservadas que parecen fundamentales en el proceso replicativo del virus

Respuesta inmunológica en hepatitis viral / Immune response in viral hepatitis

Los virus de la hepatitis A, B, y C constituyen tres de los principales agentes hepatotrópicos mejor caracterizados desde el punto de vista estructural y molecular. El estudio de la biología de estos virus ha permitido comprender ciertos aspectos relacionados con la fisiopatología y la respuesta inmune en estas infecciones virales. En los tres modelos de infección se describe una respuesta humoral específica dirigida hacia distintos componentes antigénicos de las partículas virales y que pudiera resultar efectiva en el control de la infección. En algunos casos, comola infección por el VHB, el patrón de la respuesta humoral puede correlacionarse con la condición clínico-patológica del paciente infectado. El componente celular de la respuesta inmune resulta también fundamental en el control de la infección viral. Este tipo de respuesta es mediada principalmente por linfocitos T, los cuales reconocen antígenos viarles específicos. Así mismo, dicha respuesta puede ser responsable del año histopatológico que se evidencia en las infecciones por el VHB y el VHC

Embarazo ectópico tubárico- manejo actual-

Objetivo: Se quiere presentar la experiencia en el manejo del embarazo ectópico tubárico en una institución de salud privada, utilizando todos los recursos diagnósticos y terapéuticos disponibles en la actualidad tales como endosonografía vaginal, videohisterolaparoscopia y videosalpingoscopia para el manejo de esta patología. Diseño: Se evaluaron 26 pacientes con diagnóstico de embarazo ectópico que llegaron al programa de medicina reproductiva de la Clínica de la Mujer durante un período de 14 meses. Material y Métodos: De 26 pacientes con diagnóstico de embarazo ectópico tubárico dada por la determinación de una ausencia de saco gestacional intrauterino con endosonografía vaginal (SHIMADZU SL 310 MHZ) y medición sérica de hCG.(Elisa, Sunrise Labs CA.USA) con valores superiores a 500 m/UI hCG. Dieciséis pacientes(61.5 por ciento) presentaron embarazo ectópico tubárico MUERTO(valores de hCG en meseta o en descenso y ausencia de embriocardia por endosonografía), 8 pacientes (30.7 por ciento) embarazo ectópico tubárico VIVO(valores de hCG en ascenso y/o visualización de embriocardia por endosonografía), 2 pacientes (7.7 por ciento) embarazo ectópico VIVO y ruptura tubárica como hallazgo videolaparoscópico. Conclusión: El diagnóstico precoz y manejo adecuado del embarazo ectópico permite disminuir morbilidad, hospitalización y costos así como mejorar el pronóstico de fertilidad de estas pacientes, con una infraestructura mínima y de relativo bajo costo(truncado 2500 caracteres)