New data on family Araneidae from district Swat with updated checklist of the family from Pakistan / Novos dados sobre a família Araneidae do distrito Swat com lista de verificação atualizada da família no Paquistão

The aims of the present research was to find out the diversity of family Araneidae in district Swat Pakistan and to provide updated checklist of the family Araneidae from Pakistan. Also their occurrence throughout the year was given from District Swat Khyber Pakhtunkhwa, Pakistan. Data was collected from January 2018 to December-2018 from seven different Tehsils of District Swat by using different methods like pitfall trap, ground hand collection, air hand collection and were then preserved in plastic vials and appendorf tubes by using 70% ethanol. Camera mounted on microscope was used for photography. By using literature from World Spider Catalog, 2022, spiders were identified to species level. In a ttal of 1243 specimens of family Araneidae 4 genera and 7 species were identified. Dominant species with great number of specimen collected was Cyrtophora citricolla with 229 (18.4%) samples, followed by Bojaranius mitificus (15.7%), Neoscona Scylla (15.4%), Argiope lobata (14.8), Neoscona theisi (14.6%) and Neoscona polyspinippes (13.8%) respectively. While lowest collection was done of Argiope versicolor with 90 (7.3%) samples. High occurrence of spiders was studied during July 187 samples. Fluctuation in temperature can affect the diversity of spiders observed and recorded in present study with lowest collection done in low temperature. Moreover, the humidity also play a great role in spiders' population and occurrence.

Os objetivos da presente pesquisa foram descobrir a diversidade da família Araneidae no distrito Swat, Paquistão, e fornecer uma lista atualizada da família Araneidae nesse país. Sua ocorrência ao longo do ano também foi dada no Distrito Swat, Khyber Pakhtunkhwa, Paquistão. Os dados foram coletados de janeiro de 2018 a dezembro de 2018 de sete diferentes Tehsils, do Distrito Swat, usando métodos diferentes, como armadilha de queda, coleta no solo com a mão e coleta no ar com a mão, e foram então preservados em frascos de plástico e tubos eppendorf usando etanol 70%. Foi usada câmera montada em microscópio para fotografia. Utilizando a literatura do World Spider Catalog (2022), as aranhas foram identificadas em nível de espécie. Em um total de 1.243 exemplares da família Araneidae, foram identificados 4 gêneros e 7 espécies. A espécie dominante com grande número de espécimes coletados foi Cyrtophora citricola com 229 (18,4%) amostras, seguida por Bojaranius mitificus (15,7%), Neoscona scylla (15,4%), Argiope lobata (14,8%), Neoscona theisi (14,6%) e Neoscona polyspinippes (13,8%), respectivamente. Já a menor coleta foi feita de Argiope versicolor com 90 (7,3%) amostras. A alta ocorrência de aranhas foi estudada em julho, com 187 amostras. A oscilação na temperatura pode afetar a diversidade de aranhas observadas e registradas no presente estudo com menor coleta feita em baixa temperatura. Além disso, a umidade também desempenha um grande papel na população e ocorrência de aranhas.

Mitochondrial DNA diversity and maternal origins of Pakistani donkey / Diversidade de DNA mitocondrial e origens maternas do burro do Paquistão

Domestic donkey plays a key role as a draft animal in rural economy of Pakistan where its population is increasing every year. The complete mtDNA control region of forty randomly sampled donkeys was PCR- amplified and sequenced bi-directionally using specific primers. Distinct mtDNA haplotypes obtained in the current study (KY446001−KY446011) were subjected to haplotype (h) and nucleotide diversity (π) measures using DnaS as well as to phylogenetic, Network, and AMOVA analyses. There were a total 27 polymorphic sites present within 11 unique mtDNA haplotypes from the studied 40 animals from different regions. Neighbor-joining network and median-joining network both illustrated the splitting of all these haplotypes into two well-defined Nubian and Somali lineages, confirming African maternal origin of Pakistani domestic donkey. Diversity parameters h (0.967± 0.037) and π (0.02917± 0.00307) were found to reveal high levels of genetic diversity in Pakistani donkeys. AMOVA demonstrated only 1% of genetic differences between two mtDNA maternal lineages, pointing to lack of population substructure in Pakistani donkeys as is the case with worldwide domestic donkey population. Pakistani donkeys have African maternal origin and high levels of mtDNA diversity. High genetic diversity may be due to non-selective breeding and heteroplasmy. We herein provide the first report on mtDNA diversity of control region in Pakistani domestic donkey.

O burro doméstico possui um papel fundamental como animal de tração na economia rural do Paquistão, onde a população desse animal está aumentando a cada ano. A região de controle de mtDNA completa de 40 burros amostrados aleatoriamente foi ampliada por PCR e sequenciada bidirecionalmente por intermédio de primers específicos. Haplótipos distintos de mtDNA obtidos no estudo atual (KY446001 − KY446011) foram submetidos a medidas de haplótipo (h) e diversidade de nucleotídeos (π) por meio de DnaS, bem como análises filogenéticas, de rede e AMOVA. Havia um total de 27 sítios polimórficos presentes em 11 haplótipos de mtDNA exclusivos dos 40 animais estudados de diferentes regiões. A rede de união de vizinhos e a rede de união mediana ilustram a divisão de todos esses haplótipos em duas linhagens núbias e somalis bem definidas, confirmando a origem materna africana do burro doméstico do Paquistão. Os parâmetros de diversidade h (0,967 ± 0,037) e π (0,02917 ± 0,00307) revelaram altos níveis de diversidade genética em burros paquistaneses. AMOVA demonstrou apenas 1% de diferenças genéticas entre as duas linhagens maternas de mtDNA, apontando a falta de subestrutura populacional em burros paquistaneses, como é o caso da população mundial de burros domésticos. Os burros paquistaneses têm origem materna africana e altos níveis de diversidade de mtDNA. A alta diversidade genética pode ser por causa da reprodução não seletiva e de heteroplasmia. Aqui, fornecemos o primeiro relatório sobre a diversidade do mtDNA da região de controle em burros domésticos do Paquistão

Mitochondrial DNA diversity and maternal origins of Pakistani donkey

Abstract Domestic donkey plays a key role as a draft animal in rural economy of Pakistan where its population is increasing every year. The complete mtDNA control region of forty randomly sampled donkeys was PCR- amplified and sequenced bi-directionally using specific primers. Distinct mtDNA haplotypes obtained in the current study (KY446001KY446011) were subjected to haplotype (h) and nucleotide diversity () measures using DnaS as well as to phylogenetic, Network, and AMOVA analyses. There were a total 27 polymorphic sites present within 11 unique mtDNA haplotypes from the studied 40 animals from different regions. Neighbor-joining network and median-joining network both illustrated the splitting of all these haplotypes into two well-defined Nubian and Somali lineages, confirming African maternal origin of Pakistani domestic donkey. Diversity parameters h (0.967± 0.037) and (0.02917± 0.00307) were found to reveal high levels of genetic diversity in Pakistani donkeys. AMOVA demonstrated only 1% of genetic differences between two mtDNA maternal lineages, pointing to lack of population substructure in Pakistani donkeys as is the case with worldwide domestic donkey population. Pakistani donkeys have African maternal origin and high levels of mtDNA diversity. High genetic diversity may be due to non-selective breeding and heteroplasmy. We herein provide the first report on mtDNA diversity of control region in Pakistani domestic donkey.

Resumo O burro doméstico possui um papel fundamental como animal de tração na economia rural do Paquistão, onde a população desse animal está aumentando a cada ano. A região de controle de mtDNA completa de 40 burros amostrados aleatoriamente foi ampliada por PCR e sequenciada bidirecionalmente por intermédio de primers específicos. Haplótipos distintos de mtDNA obtidos no estudo atual (KY446001 KY446011) foram submetidos a medidas de haplótipo (h) e diversidade de nucleotídeos () por meio de DnaS, bem como análises filogenéticas, de rede e AMOVA. Havia um total de 27 sítios polimórficos presentes em 11 haplótipos de mtDNA exclusivos dos 40 animais estudados de diferentes regiões. A rede de união de vizinhos e a rede de união mediana ilustram a divisão de todos esses haplótipos em duas linhagens núbias e somalis bem definidas, confirmando a origem materna africana do burro doméstico do Paquistão. Os parâmetros de diversidade h (0,967 ± 0,037) e (0,02917 ± 0,00307) revelaram altos níveis de diversidade genética em burros paquistaneses. AMOVA demonstrou apenas 1% de diferenças genéticas entre as duas linhagens maternas de mtDNA, apontando a falta de subestrutura populacional em burros paquistaneses, como é o caso da população mundial de burros domésticos. Os burros paquistaneses têm origem materna africana e altos níveis de diversidade de mtDNA. A alta diversidade genética pode ser por causa da reprodução não seletiva e de heteroplasmia. Aqui, fornecemos o primeiro relatório sobre a diversidade do mtDNA da região de controle em burros domésticos do Paquistão.

Preparation and evaluation of cytotoxic potential of paclitaxel containing poly-3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalarate (PTX/PHBV) nanoparticles.

Paclitaxel (PTX) is a potent anticancer drug. In the present study, PTX was loaded in poly-3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalarate (PHBV) to fabricate the PTX/PHBV (drug-loaded) nanoparticles via the nanoprecipitation method. Blank PHBV nanoparticles were also prepared. The drug-encapsulation efficiency of PTX/PHBV nanoparticles was 45±0.4%. The PTX/PHBV nanoparticles exhibited a pH-sensitive release profile and followed a quasi-Fickian diffusion mechanism. Cytotoxic properties of PHBV and PTX/PHBV nanoparticles were checked against the MCF-7 and Caco-2 cell lines. The PHBV nanoparticle did not inhibit the proliferation of MCF-7 and Caco-2 cell lines, thus depicting their non-toxic and biocompatible nature. On the other hand, the PTX/PHBV nanoparticles demonstrated 1.03-fold higher cytotoxicity and 1.61-fold enhanced apoptosis after treatment with the PTX/PHBV nanoparticles versus free PTX. In summary, the PHBV nanoparticles could be a potential candidate for the delivery of PTX for cancer treatment.

Diversity of the Anisoptera & Zygoptera (Odonata: Insecta) of Swat, Pakistan / Diversidade de Anisoptera e Zygoptera (Odonata: Insecta) de Swat, Paquistão

Odonates are important biological control agents for the control of insect pests and insect disease vectors of medical and veterinary importance. The present study was conducted to evaluate the odonate fauna of Swat, Pakistan from March to October 2019. A total of 200 specimens of odonates were collected from diverse habitats. The collected specimens of the order Odonata belonged to 5 families, three families of suborder Anisoptera namely Libellulidae, Gomphidae and Aeshnidae while two families of suborder Zygoptera (Chlorocyphidae and Coenagrionidae). The specimens were categorized into 12 genera and 22 species. Libellulidae was the dominant family (n = 138) accounting for 69% of the odonate fauna. Orthetrum was the dominant genus (n = 73) of suborder Anisoptera accounting for 36.5% of the odonate fauna. The least dominant genera were Anax, Paragomphus and Rhyothemis (n = 5 each) accounting each for 2.5% of the odonate fauna. In Zygoptera, the dominant genus was Ceriagrion (12.5%) and the least dominant genus was Ischnura (6%). Pantala flavescens (Fabricius, 1798) was the most abundant odonate species in the study area recorded from all surveyed habitats. Shannon Diversity Index (H) was 2.988 and Simpson Diversity Index (D) was 0.95 for the collected odonate fauna. The highest abundance of Odonata was recorded in August, September and May while no odonate species were recorded in January, February, November and December. Lotic water bodies were the most suitable habitats with abundant odonate fauna. Anax immaculifrons (Rambur, 1842) was the largest sized odonate species having a wingspan of 53.2±1.63 mm and body length of 56.3 ± 0.4 mm. The present study shows the status of odonate fauna of Swat, Pakistan in diverse habitats and seasonsonal variation throughout the year. Further work is recommended to bridge the gaps in the existing literature.(AU)

Odonatos são importantes agentes de controle biológico para o controle de insetos-praga e vetores de doenças de insetos de importância médica e veterinária. O presente estudo foi conduzido para avaliar a fauna de odonatos de Swat, Paquistão, de março a outubro de 2019. Um total de 200 espécimes de odonatos foi coletado em diversos habitats. Os espécimes coletados da ordem Odonata pertenciam a cinco famílias, três famílias da subordem Anisoptera, a saber, Libellulidae, Gomphidae e Aeshnidae, enquanto duas famílias eram da subordem Zygoptera (Chlorocyphidae e Coenagrionidae). Os espécimes foram classificados em 12 gêneros e 22 espécies. Libellulidae foi a família dominante (n = 138), respondendo por 69% da fauna de odonatos. Orthetrum foi o gênero dominante (n = 73) da subordem Anisoptera, responsável por 36,5% da fauna de odonatos. Os gêneros menos dominantes foram Anax, Paragomphus e Rhyothemis (n = 5 cada), representando cada um 2,5% da fauna de odonatos. Em Zygoptera, o gênero dominante foi Ceriagrion (12,5%), e o gênero menos dominante foi Ischnura (6%). Pantala flavescens (Fabricius, 1798) foi a espécie de odonato mais abundante na área de estudo, registrada em todos os habitats pesquisados. O Índice de Diversidade de Shannon (H) foi de 2,988, e o Índice de Diversidade de Simpson (D) foi de 0,95 para a fauna de odonatos coletados. A maior abundância de Odonata foi registrada em agosto, setembro e maio, enquanto nenhuma espécie de Odonata foi registrada em janeiro, fevereiro, novembro e dezembro. Corpos dágua lóticos foram os habitats mais adequados, com abundante fauna de odonatos. Anax imaculifrons (Rambur, 1842) foi a espécie de odonato de maior tamanho, com envergadura de 53,2 ± 1,63 mm e comprimento do corpo de 56,3 ± 0,4 mm. O presente estudo mostrou o status da fauna de odonatos de Swat, Paquistão, em diversos habitats e variação sazonal ao longo do ano. Recomenda-se trabalho adicional para preencher as lacunas na literatura existente.(AU)

Honey as a bioindicator of environmental organochlorine insecticides contamination / Mel como bioindicador de contaminação ambiental de inseticidas organoclorados

Honey is a suitable matrix for the evaluation of environmental contaminants including organochlorine insecticides. The present study was conducted to evaluate residues of fifteen organochlorine insecticides in honey samples of unifloral and multifloral origins from Dir, Pakistan. Honey samples (5 g each) were extracted with GC grade organic solvents and then subjected to Rotary Evaporator till dryness. The extracts were then mixed with n-Hexane (5 ml) and purified through Column Chromatography. Purified extracts (1μl each) were processed through Gas Chromatograph coupled with Electron Capture Detector (GC-ECD) for identification and quantification of the insecticides. Of the 15 insecticides tested, 46.7% were detected while 53.3% were not detected in the honey samples. Heptachlor was the most prevalent insecticide with a mean level of 0.0018 mg/kg detected in 80% of the samples followed by β-HCH with a mean level of 0.0016 mg/kg detected in 71.4% of the honey samples. Honey samples from Acacia modesta Wall. were 100% positive for Heptachlor with a mean level of 0.0048 mg/kg followed by β-HCH with a mean level of 0.003 mg/kg and frequency of 83.3%. Minimum levels of the tested insecticides were detected in the unifloral honey from Ziziphus jujuba Mill. Methoxychlor, Endosulfan, Endrin and metabolites of DDT were not detected in the studied honey samples. Some of the tested insecticides are banned in Pakistan but are still detected in honey samples indicating their use in the study area. The detected levels of all insecticides were below the Maximum Residue Levels (MRLs) and safe for consumers. However, the levels detected can cause mortality in insect fauna. The use of banned insecticides is one of the main factors responsible for the declining populations of important insect pollinators including honeybees.(AU)

O mel é uma matriz adequada para a avaliação de contaminantes ambientais, incluindo inseticidas organoclorados. O presente estudo foi conduzido para avaliar resíduos de 15 inseticidas organoclorados em amostras de mel de origem unifloral e multifloral de Dir, Paquistão. Amostras de mel (5 g cada) foram extraídas com solventes orgânicos de grau GC e, em seguida, submetidas ao evaporador rotativo até a secura. Os extratos foram então misturados com n-hexano (5 ml) e purificados por cromatografia em coluna. Os extratos purificados (1μl cada) foram processados através de cromatógrafo gasoso acoplado a detector de captura de elétrons (GC-ECD) para identificação e quantificação dos inseticidas. Dos 15 inseticidas testados, 46,7% foram detectados enquanto 53,3% não foram detectados nas amostras de mel. O heptacloro foi o inseticida mais prevalente com um nível médio de 0,0018 mg / kg detectado em 80% das amostras, seguido por β-HCH com um nível médio de 0,0016 mg / kg detectado em 71,4% das amostras de mel. Amostras de mel da parede de Acacia modesta foram 100% positivos para heptacloro com um nível médio de 0,0048 mg / kg seguido por β-HCH com um nível médio de 0,003 mg / kg e frequência de 83,3%. Níveis mínimos dos inseticidas testados foram detectados no mel unifloral de Ziziphus jujuba da usina. Metoxicloro, Endosulfan, Endrin e metabólitos do DDT não foram detectados nas amostras de mel estudadas. Alguns dos inseticidas testados são proibidos no Paquistão, mas ainda são detectados em amostras de mel, indicando seu uso na área de estudo. Os níveis detectados de todos os inseticidas estavam abaixo dos Níveis Máximos de Resíduos (MRLs) e seguros para os consumidores. No entanto, os níveis detectados podem causar mortalidade na fauna de insetos. O uso de inseticidas proibidos é um dos principais fatores responsáveis pelo declínio das populações de importantes insetos polinizadores, incluindo as abelhas.(AU)

Diversity, distribution and relative abundance of the mosquito fauna (Diptera: Culicidae) of Malakand and Dir Lower, Pakistan / Diversidade, distribuição e abundância relativa da fauna de mosquitos (Diptera: Culicidae) de Malakand e Dir Lower, Paquistão

The present study was conducted to evaluate the diversity, distribution (C) and relative abundance (RA) of the mosquito fauna (Diptera: Culicidae) of Malakand and Dir Lower, Pakistan. Collection of specimens (n = 1087) was made during September 2018 to July 2019 at six different habitats including freshwater bodies, rice fields, animal sheds, indoors, drains and sewage waters. Specimens were collected through light traps, pyrethrum spray, aspirators and nets and subsequently killed, preserved and then arranged in entomological boxes for identification. Three genera were identified namely Culex, Anopheles and Aedes. A total of fourteen species were identified namely: Cx. quinquefasciatus (Say, 1823), An. stephensi (Liston, 1901), Cx. tritaeniorhynchus (Giles, 1901), Ae. vittatus (Bigot, 1861), An. maculatus (Theobald, 1901), An. fluviatilis (James, 1902), Cx. vishnui (Theobald, 1901), Ae. aegypti (Linnaeus, 1762) An. subpictus (Grassi, 1899), An. dthali (Patton, 1905), An. culicifascies (Giles, 1901), An. pallidus (Theobald, 1901), Ae. albopictus (Skuse, 1894) and An. annularis (van der Wulp, 1884). Cx. quinquefasciatus was found constantly distributed in the study area with RA = 16.5% and C = 100%. An. annularis was found as a satellite species, sporadically distributed in the study area having RA = 0.9% and C = 17%. Diversity indices of mosquitoes in the studied habitats were found as, Shannon-Wiener Index (2.415), Simpson Index (9.919), Fisher's Index (2.269) and Margalef's Index (1.859). A statistically significant difference was recorded in mosquito diversity in the six habitats (Kruskal-Wallis, chi-squared, H = 17.5, df = 5, P = 0.003 at α = 0.05). The present study encompasses [...].(AU)

O presente estudo foi conduzido para avaliar a diversidade, distribuição (C) e abundância relativa (RA) da fauna de mosquitos (Diptera: Culicidae) de Malakand e Dir Lower, Paquistão. A coleta de espécimes (n = 1087) foi feita durante o período de setembro de 2018 a julho de 2019 em seis habitats diferentes, incluindo corpos dágua, campos de arroz, galpões de animais, ambientes internos, ralos e águas residuais. Os espécimes foram coletados por meio de armadilhas luminosas, spray de piretro, aspiradores e redes e posteriormente mortos, preservados e depois dispostos em caixas entomológicas para identificação. Três gêneros foram identificados, nomeadamente Culex, Anopheles e Aedes. Um total de 14 espécies foi identificado, a saber: Cx. quinquefasciatus (Say, 1823), An. stephensi (Liston, 1901), Cx. tritaeniorhynchus (Giles, 1901), Ae. vittatus (Bigot, 1861), An. maculatus (Theobald, 1901), An. fluviatilis (James, 1902), Cx. vishnui (Theobald, 1901), Ae. aegypti (Linnaeus, 1762), An. subpictus (Grassi, 1899), An. dthali (Patton, 1905), An. culicifascies (Giles, 1901), An. pallidus (Theobald, 1901), Ae. albopictus (Skuse, 1894) e An. annularis (Van der Wulp, 1884). Cx. quinquefasciatus foi encontrado constantemente distribuído na área de estudo com AR = 16,5% e C = 100%. A. annularis foi encontrada como espécie satélite, distribuída esporadicamente na área de estudo com RA = 0,9% e C = 17%. Os índices de diversidade de mosquitos nos habitats estudados foram encontrados como índice de Shannon-Wiener (2,415), índice de Simpson (9,919), índice de Fisher (2,269) e índice de Margalef (1,859). Uma diferença estatisticamente significativa foi registrada na diversidade de mosquitos nos seis habitats (Kruskal-Wallis, qui-quadrado, H = 17,5, df = 5, P = 0,003 em α = 0,05). O presente estudo abrange a fauna de mosquitos de Malakand, Paquistão, com respeito à diversidade, abundância relativa e distribuição em [...].(AU)

Diversity, distribution and relative abundance of the mosquito fauna (Diptera: Culicidae) of Malakand and Dir Lower, Pakistan / Diversidade, distribuição e abundância relativa da fauna de mosquitos (Diptera: Culicidae) de Malakand e Dir Lower, Paquistão

The present study was conducted to evaluate the diversity, distribution (C) and relative abundance (RA) of the mosquito fauna (Diptera: Culicidae) of Malakand and Dir Lower, Pakistan. Collection of specimens (n = 1087) was made during September 2018 to July 2019 at six different habitats including freshwater bodies, rice fields, animal sheds, indoors, drains and sewage waters. Specimens were collected through light traps, pyrethrum spray, aspirators and nets and subsequently killed, preserved and then arranged in entomological boxes for identification. Three genera were identified namely Culex, Anopheles and Aedes. A total of fourteen species were identified namely: Cx. quinquefasciatus (Say, 1823), An. stephensi (Liston, 1901), Cx. tritaeniorhynchus (Giles, 1901), Ae. vittatus (Bigot, 1861), An. maculatus (Theobald, 1901), An. fluviatilis (James, 1902), Cx. vishnui (Theobald, 1901), Ae. aegypti (Linnaeus, 1762) An. subpictus (Grassi, 1899), An. dthali (Patton, 1905), An. culicifascies (Giles, 1901), An. pallidus (Theobald, 1901), Ae. albopictus (Skuse, 1894) and An. annularis (van der Wulp, 1884). Cx. quinquefasciatus was found constantly distributed in the study area with RA = 16.5% and C = 100%. An. annularis was found as a satellite species, sporadically distributed in the study area having RA = 0.9% and C = 17%. Diversity indices of mosquitoes in the studied habitats were found as, Shannon-Wiener Index (2.415), Simpson Index (9.919), Fisher's Index (2.269) and Margalef's Index (1.859). A statistically significant difference was recorded in mosquito diversity in the six habitats (Kruskal-Wallis, chi-squared, H = 17.5, df = 5, P = 0.003 at α = 0.05). The present study encompasses [...].

O presente estudo foi conduzido para avaliar a diversidade, distribuição (C) e abundância relativa (RA) da fauna de mosquitos (Diptera: Culicidae) de Malakand e Dir Lower, Paquistão. A coleta de espécimes (n = 1087) foi feita durante o período de setembro de 2018 a julho de 2019 em seis habitats diferentes, incluindo corpos d’água, campos de arroz, galpões de animais, ambientes internos, ralos e águas residuais. Os espécimes foram coletados por meio de armadilhas luminosas, spray de piretro, aspiradores e redes e posteriormente mortos, preservados e depois dispostos em caixas entomológicas para identificação. Três gêneros foram identificados, nomeadamente Culex, Anopheles e Aedes. Um total de 14 espécies foi identificado, a saber: Cx. quinquefasciatus (Say, 1823), An. stephensi (Liston, 1901), Cx. tritaeniorhynchus (Giles, 1901), Ae. vittatus (Bigot, 1861), An. maculatus (Theobald, 1901), An. fluviatilis (James, 1902), Cx. vishnui (Theobald, 1901), Ae. aegypti (Linnaeus, 1762), An. subpictus (Grassi, 1899), An. dthali (Patton, 1905), An. culicifascies (Giles, 1901), An. pallidus (Theobald, 1901), Ae. albopictus (Skuse, 1894) e An. annularis (Van der Wulp, 1884). Cx. quinquefasciatus foi encontrado constantemente distribuído na área de estudo com AR = 16,5% e C = 100%. A. annularis foi encontrada como espécie satélite, distribuída esporadicamente na área de estudo com RA = 0,9% e C = 17%. Os índices de diversidade de mosquitos nos habitats estudados foram encontrados como índice de Shannon-Wiener (2,415), índice de Simpson (9,919), índice de Fisher (2,269) e índice de Margalef (1,859). Uma diferença estatisticamente significativa foi registrada na diversidade de mosquitos nos seis habitats (Kruskal-Wallis, qui-quadrado, H = 17,5, df = 5, P = 0,003 em α = 0,05). O presente estudo abrange a fauna de mosquitos de Malakand, Paquistão, com respeito à diversidade, abundância relativa e distribuição em [...].

Honey as a bioindicator of environmental organochlorine insecticides contamination / Mel como bioindicador de contaminação ambiental de inseticidas organoclorados

Honey is a suitable matrix for the evaluation of environmental contaminants including organochlorine insecticides. The present study was conducted to evaluate residues of fifteen organochlorine insecticides in honey samples of unifloral and multifloral origins from Dir, Pakistan. Honey samples (5 g each) were extracted with GC grade organic solvents and then subjected to Rotary Evaporator till dryness. The extracts were then mixed with n-Hexane (5 ml) and purified through Column Chromatography. Purified extracts (1μl each) were processed through Gas Chromatograph coupled with Electron Capture Detector (GC-ECD) for identification and quantification of the insecticides. Of the 15 insecticides tested, 46.7% were detected while 53.3% were not detected in the honey samples. Heptachlor was the most prevalent insecticide with a mean level of 0.0018 mg/kg detected in 80% of the samples followed by β-HCH with a mean level of 0.0016 mg/kg detected in 71.4% of the honey samples. Honey samples from Acacia modesta Wall. were 100% positive for Heptachlor with a mean level of 0.0048 mg/kg followed by β-HCH with a mean level of 0.003 mg/kg and frequency of 83.3%. Minimum levels of the tested insecticides were detected in the unifloral honey from Ziziphus jujuba Mill. Methoxychlor, Endosulfan, Endrin and metabolites of DDT were not detected in the studied honey samples. Some of the tested insecticides are banned in Pakistan but are still detected in honey samples indicating their use in the study area. The detected levels of all insecticides were below the Maximum Residue Levels (MRLs) and safe for consumers. However, the levels detected can cause mortality in insect fauna. The use of banned insecticides is one of the main factors responsible for the declining populations of important insect pollinators including honeybees.

O mel é uma matriz adequada para a avaliação de contaminantes ambientais, incluindo inseticidas organoclorados. O presente estudo foi conduzido para avaliar resíduos de 15 inseticidas organoclorados em amostras de mel de origem unifloral e multifloral de Dir, Paquistão. Amostras de mel (5 g cada) foram extraídas com solventes orgânicos de grau GC e, em seguida, submetidas ao evaporador rotativo até a secura. Os extratos foram então misturados com n-hexano (5 ml) e purificados por cromatografia em coluna. Os extratos purificados (1μl cada) foram processados através de cromatógrafo gasoso acoplado a detector de captura de elétrons (GC-ECD) para identificação e quantificação dos inseticidas. Dos 15 inseticidas testados, 46,7% foram detectados enquanto 53,3% não foram detectados nas amostras de mel. O heptacloro foi o inseticida mais prevalente com um nível médio de 0,0018 mg / kg detectado em 80% das amostras, seguido por β-HCH com um nível médio de 0,0016 mg / kg detectado em 71,4% das amostras de mel. Amostras de mel da parede de Acacia modesta foram 100% positivos para heptacloro com um nível médio de 0,0048 mg / kg seguido por β-HCH com um nível médio de 0,003 mg / kg e frequência de 83,3%. Níveis mínimos dos inseticidas testados foram detectados no mel unifloral de Ziziphus jujuba da usina. Metoxicloro, Endosulfan, Endrin e metabólitos do DDT não foram detectados nas amostras de mel estudadas. Alguns dos inseticidas testados são proibidos no Paquistão, mas ainda são detectados em amostras de mel, indicando seu uso na área de estudo. Os níveis detectados de todos os inseticidas estavam abaixo dos Níveis Máximos de Resíduos (MRLs) e seguros para os consumidores. No entanto, os níveis detectados podem causar mortalidade na fauna de insetos. O uso de inseticidas proibidos é um dos principais fatores responsáveis pelo declínio das populações de importantes insetos polinizadores, incluindo as abelhas.

Diversity of the Anisoptera & Zygoptera (Odonata: Insecta) of Swat, Pakistan / Diversidade de Anisoptera e Zygoptera (Odonata: Insecta) de Swat, Paquistão

Odonates are important biological control agents for the control of insect pests and insect disease vectors of medical and veterinary importance. The present study was conducted to evaluate the odonate fauna of Swat, Pakistan from March to October 2019. A total of 200 specimens of odonates were collected from diverse habitats. The collected specimens of the order Odonata belonged to 5 families, three families of suborder Anisoptera namely Libellulidae, Gomphidae and Aeshnidae while two families of suborder Zygoptera (Chlorocyphidae and Coenagrionidae). The specimens were categorized into 12 genera and 22 species. Libellulidae was the dominant family (n = 138) accounting for 69% of the odonate fauna. Orthetrum was the dominant genus (n = 73) of suborder Anisoptera accounting for 36.5% of the odonate fauna. The least dominant genera were Anax, Paragomphus and Rhyothemis (n = 5 each) accounting each for 2.5% of the odonate fauna. In Zygoptera, the dominant genus was Ceriagrion (12.5%) and the least dominant genus was Ischnura (6%). Pantala flavescens (Fabricius, 1798) was the most abundant odonate species in the study area recorded from all surveyed habitats. Shannon Diversity Index (H) was 2.988 and Simpson Diversity Index (D) was 0.95 for the collected odonate fauna. The highest abundance of Odonata was recorded in August, September and May while no odonate species were recorded in January, February, November and December. Lotic water bodies were the most suitable habitats with abundant odonate fauna. Anax immaculifrons (Rambur, 1842) was the largest sized odonate species having a wingspan of 53.2±1.63 mm and body length of 56.3 ± 0.4 mm. The present study shows the status of odonate fauna of Swat, Pakistan in diverse habitats and seasonsonal variation throughout the year. Further work is recommended to bridge the gaps in the existing literature.

Odonatos são importantes agentes de controle biológico para o controle de insetos-praga e vetores de doenças de insetos de importância médica e veterinária. O presente estudo foi conduzido para avaliar a fauna de odonatos de Swat, Paquistão, de março a outubro de 2019. Um total de 200 espécimes de odonatos foi coletado em diversos habitats. Os espécimes coletados da ordem Odonata pertenciam a cinco famílias, três famílias da subordem Anisoptera, a saber, Libellulidae, Gomphidae e Aeshnidae, enquanto duas famílias eram da subordem Zygoptera (Chlorocyphidae e Coenagrionidae). Os espécimes foram classificados em 12 gêneros e 22 espécies. Libellulidae foi a família dominante (n = 138), respondendo por 69% da fauna de odonatos. Orthetrum foi o gênero dominante (n = 73) da subordem Anisoptera, responsável por 36,5% da fauna de odonatos. Os gêneros menos dominantes foram Anax, Paragomphus e Rhyothemis (n = 5 cada), representando cada um 2,5% da fauna de odonatos. Em Zygoptera, o gênero dominante foi Ceriagrion (12,5%), e o gênero menos dominante foi Ischnura (6%). Pantala flavescens (Fabricius, 1798) foi a espécie de odonato mais abundante na área de estudo, registrada em todos os habitats pesquisados. O Índice de Diversidade de Shannon (H) foi de 2,988, e o Índice de Diversidade de Simpson (D) foi de 0,95 para a fauna de odonatos coletados. A maior abundância de Odonata foi registrada em agosto, setembro e maio, enquanto nenhuma espécie de Odonata foi registrada em janeiro, fevereiro, novembro e dezembro. Corpos d’água lóticos foram os habitats mais adequados, com abundante fauna de odonatos. Anax imaculifrons (Rambur, 1842) foi a espécie de odonato de maior tamanho, com envergadura de 53,2 ± 1,63 mm e comprimento do corpo de 56,3 ± 0,4 mm. O presente estudo mostrou o status da fauna de odonatos de Swat, Paquistão, em diversos habitats e variação sazonal ao longo do ano. Recomenda-se trabalho adicional para preencher as lacunas na literatura existente.

Diversity, distribution and relative abundance of the mosquito fauna (Diptera: Culicidae) of Malakand and Dir Lower, Pakistan

Abstract The present study was conducted to evaluate the diversity, distribution (C) and relative abundance (RA) of the mosquito fauna (Diptera: Culicidae) of Malakand and Dir Lower, Pakistan. Collection of specimens (n = 1087) was made during September 2018 to July 2019 at six different habitats including freshwater bodies, rice fields, animal sheds, indoors, drains and sewage waters. Specimens were collected through light traps, pyrethrum spray, aspirators and nets and subsequently killed, preserved and then arranged in entomological boxes for identification. Three genera were identified namely Culex, Anopheles and Aedes. A total of fourteen species were identified namely: Cx. quinquefasciatus (Say, 1823), An. stephensi (Liston, 1901), Cx. tritaeniorhynchus (Giles, 1901), Ae. vittatus (Bigot, 1861), An. maculatus (Theobald, 1901), An. fluviatilis (James, 1902), Cx. vishnui (Theobald, 1901), Ae. aegypti (Linnaeus, 1762) An. subpictus (Grassi, 1899), An. dthali (Patton, 1905), An. culicifascies (Giles, 1901), An. pallidus (Theobald, 1901), Ae. albopictus (Skuse, 1894) and An. annularis (van der Wulp, 1884). Cx. quinquefasciatus was found constantly distributed in the study area with RA = 16.5% and C = 100%. An. annularis was found as a satellite species, sporadically distributed in the study area having RA = 0.9% and C = 17%. Diversity indices of mosquitoes in the studied habitats were found as, Shannon-Wiener Index (2.415), Simpson Index (9.919), Fishers Index (2.269) and Margalefs Index (1.859). A statistically significant difference was recorded in mosquito diversity in the six habitats (Kruskal-Wallis, chi-squared, H = 17.5, df = 5, P = 0.003 at = 0.05). The present study encompasses mosquito fauna of Malakand, Pakistan with respect to diversity, relative abundance and distribution in diverse habitats and all seasons of the year. This will assist scientists working in various fields related with epidemiology, medical and veterinary entomology, ecology and allied areas of biological sciences.

Resumo O presente estudo foi conduzido para avaliar a diversidade, distribuição (C) e abundância relativa (RA) da fauna de mosquitos (Diptera: Culicidae) de Malakand e Dir Lower, Paquistão. A coleta de espécimes (n = 1087) foi feita durante o período de setembro de 2018 a julho de 2019 em seis habitats diferentes, incluindo corpos dágua, campos de arroz, galpões de animais, ambientes internos, ralos e águas residuais. Os espécimes foram coletados por meio de armadilhas luminosas, spray de piretro, aspiradores e redes e posteriormente mortos, preservados e depois dispostos em caixas entomológicas para identificação. Três gêneros foram identificados, nomeadamente Culex, Anopheles e Aedes. Um total de 14 espécies foi identificado, a saber: Cx. quinquefasciatus (Say, 1823), An. stephensi (Liston, 1901), Cx. tritaeniorhynchus (Giles, 1901), Ae. vittatus (Bigot, 1861), An. maculatus (Theobald, 1901), An. fluviatilis (James, 1902), Cx. vishnui (Theobald, 1901), Ae. aegypti (Linnaeus, 1762), An. subpictus (Grassi, 1899), An. dthali (Patton, 1905), An. culicifascies (Giles, 1901), An. pallidus (Theobald, 1901), Ae. albopictus (Skuse, 1894) e An. annularis (Van der Wulp, 1884). Cx. quinquefasciatus foi encontrado constantemente distribuído na área de estudo com AR = 16,5% e C = 100%. A. annularis foi encontrada como espécie satélite, distribuída esporadicamente na área de estudo com RA = 0,9% e C = 17%. Os índices de diversidade de mosquitos nos habitats estudados foram encontrados como índice de Shannon-Wiener (2,415), índice de Simpson (9,919), índice de Fisher (2,269) e índice de Margalef (1,859). Uma diferença estatisticamente significativa foi registrada na diversidade de mosquitos nos seis habitats (Kruskal-Wallis, qui-quadrado, H = 17,5, df = 5, P = 0,003 em = 0,05). O presente estudo abrange a fauna de mosquitos de Malakand, Paquistão, com respeito à diversidade, abundância relativa e distribuição em diversos habitats e em todas as estações do ano. Isso ajudará os cientistas que trabalham em vários campos relacionados com a epidemiologia, entomologia médica e veterinária, ecologia e áreas afins das ciências biológicas.

Honey as a bioindicator of environmental organochlorine insecticides contamination

Abstract Honey is a suitable matrix for the evaluation of environmental contaminants including organochlorine insecticides. The present study was conducted to evaluate residues of fifteen organochlorine insecticides in honey samples of unifloral and multifloral origins from Dir, Pakistan. Honey samples (5 g each) were extracted with GC grade organic solvents and then subjected to Rotary Evaporator till dryness. The extracts were then mixed with n-Hexane (5 ml) and purified through Column Chromatography. Purified extracts (1l each) were processed through Gas Chromatograph coupled with Electron Capture Detector (GC-ECD) for identification and quantification of the insecticides. Of the 15 insecticides tested, 46.7% were detected while 53.3% were not detected in the honey samples. Heptachlor was the most prevalent insecticide with a mean level of 0.0018 mg/kg detected in 80% of the samples followed by -HCH with a mean level of 0.0016 mg/kg detected in 71.4% of the honey samples. Honey samples from Acacia modesta Wall. were 100% positive for Heptachlor with a mean level of 0.0048 mg/kg followed by -HCH with a mean level of 0.003 mg/kg and frequency of 83.3%. Minimum levels of the tested insecticides were detected in the unifloral honey from Ziziphus jujuba Mill. Methoxychlor, Endosulfan, Endrin and metabolites of DDT were not detected in the studied honey samples. Some of the tested insecticides are banned in Pakistan but are still detected in honey samples indicating their use in the study area. The detected levels of all insecticides were below the Maximum Residue Levels (MRLs) and safe for consumers. However, the levels detected can cause mortality in insect fauna. The use of banned insecticides is one of the main factors responsible for the declining populations of important insect pollinators including honeybees.

Resumo O mel é uma matriz adequada para a avaliação de contaminantes ambientais, incluindo inseticidas organoclorados. O presente estudo foi conduzido para avaliar resíduos de 15 inseticidas organoclorados em amostras de mel de origem unifloral e multifloral de Dir, Paquistão. Amostras de mel (5 g cada) foram extraídas com solventes orgânicos de grau GC e, em seguida, submetidas ao evaporador rotativo até a secura. Os extratos foram então misturados com n-hexano (5 ml) e purificados por cromatografia em coluna. Os extratos purificados (1l cada) foram processados através de cromatógrafo gasoso acoplado a detector de captura de elétrons (GC-ECD) para identificação e quantificação dos inseticidas. Dos 15 inseticidas testados, 46,7% foram detectados enquanto 53,3% não foram detectados nas amostras de mel. O heptacloro foi o inseticida mais prevalente com um nível médio de 0,0018 mg / kg detectado em 80% das amostras, seguido por -HCH com um nível médio de 0,0016 mg / kg detectado em 71,4% das amostras de mel. Amostras de mel da parede de Acacia modesta foram 100% positivos para heptacloro com um nível médio de 0,0048 mg / kg seguido por -HCH com um nível médio de 0,003 mg / kg e frequência de 83,3%. Níveis mínimos dos inseticidas testados foram detectados no mel unifloral de Ziziphus jujuba da usina. Metoxicloro, Endosulfan, Endrin e metabólitos do DDT não foram detectados nas amostras de mel estudadas. Alguns dos inseticidas testados são proibidos no Paquistão, mas ainda são detectados em amostras de mel, indicando seu uso na área de estudo. Os níveis detectados de todos os inseticidas estavam abaixo dos Níveis Máximos de Resíduos (MRLs) e seguros para os consumidores. No entanto, os níveis detectados podem causar mortalidade na fauna de insetos. O uso de inseticidas proibidos é um dos principais fatores responsáveis pelo declínio das populações de importantes insetos polinizadores, incluindo as abelhas.

Diversity of the Anisoptera & Zygoptera (Odonata: Insecta) of Swat, Pakistan

Abstract Odonates are important biological control agents for the control of insect pests and insect disease vectors of medical and veterinary importance. The present study was conducted to evaluate the odonate fauna of Swat, Pakistan from March to October 2019. A total of 200 specimens of odonates were collected from diverse habitats. The collected specimens of the order Odonata belonged to 5 families, three families of suborder Anisoptera namely Libellulidae, Gomphidae and Aeshnidae while two families of suborder Zygoptera (Chlorocyphidae and Coenagrionidae). The specimens were categorized into 12 genera and 22 species. Libellulidae was the dominant family (n = 138) accounting for 69% of the odonate fauna. Orthetrum was the dominant genus (n = 73) of suborder Anisoptera accounting for 36.5% of the odonate fauna. The least dominant genera were Anax, Paragomphus and Rhyothemis (n = 5 each) accounting each for 2.5% of the odonate fauna. In Zygoptera, the dominant genus was Ceriagrion (12.5%) and the least dominant genus was Ischnura (6%). Pantala flavescens (Fabricius, 1798) was the most abundant odonate species in the study area recorded from all surveyed habitats. Shannon Diversity Index (H) was 2.988 and Simpson Diversity Index (D) was 0.95 for the collected odonate fauna. The highest abundance of Odonata was recorded in August, September and May while no odonate species were recorded in January, February, November and December. Lotic water bodies were the most suitable habitats with abundant odonate fauna. Anax immaculifrons (Rambur, 1842) was the largest sized odonate species having a wingspan of 53.2±1.63 mm and body length of 56.3 ± 0.4 mm. The present study shows the status of odonate fauna of Swat, Pakistan in diverse habitats and seasonsonal variation throughout the year. Further work is recommended to bridge the gaps in the existing literature.

Resumo Odonatos são importantes agentes de controle biológico para o controle de insetos-praga e vetores de doenças de insetos de importância médica e veterinária. O presente estudo foi conduzido para avaliar a fauna de odonatos de Swat, Paquistão, de março a outubro de 2019. Um total de 200 espécimes de odonatos foi coletado em diversos habitats. Os espécimes coletados da ordem Odonata pertenciam a cinco famílias, três famílias da subordem Anisoptera, a saber, Libellulidae, Gomphidae e Aeshnidae, enquanto duas famílias eram da subordem Zygoptera (Chlorocyphidae e Coenagrionidae). Os espécimes foram classificados em 12 gêneros e 22 espécies. Libellulidae foi a família dominante (n = 138), respondendo por 69% da fauna de odonatos. Orthetrum foi o gênero dominante (n = 73) da subordem Anisoptera, responsável por 36,5% da fauna de odonatos. Os gêneros menos dominantes foram Anax, Paragomphus e Rhyothemis (n = 5 cada), representando cada um 2,5% da fauna de odonatos. Em Zygoptera, o gênero dominante foi Ceriagrion (12,5%), e o gênero menos dominante foi Ischnura (6%). Pantala flavescens (Fabricius, 1798) foi a espécie de odonato mais abundante na área de estudo, registrada em todos os habitats pesquisados. O Índice de Diversidade de Shannon (H) foi de 2,988, e o Índice de Diversidade de Simpson (D) foi de 0,95 para a fauna de odonatos coletados. A maior abundância de Odonata foi registrada em agosto, setembro e maio, enquanto nenhuma espécie de Odonata foi registrada em janeiro, fevereiro, novembro e dezembro. Corpos dágua lóticos foram os habitats mais adequados, com abundante fauna de odonatos. Anax imaculifrons (Rambur, 1842) foi a espécie de odonato de maior tamanho, com envergadura de 53,2 ± 1,63 mm e comprimento do corpo de 56,3 ± 0,4 mm. O presente estudo mostrou o status da fauna de odonatos de Swat, Paquistão, em diversos habitats e variação sazonal ao longo do ano. Recomenda-se trabalho adicional para preencher as lacunas na literatura existente.

Honey as a bioindicator of environmental organochlorine insecticides contamination / Mel como bioindicador de contaminação ambiental de inseticidas organoclorados

Abstract Honey is a suitable matrix for the evaluation of environmental contaminants including organochlorine insecticides. The present study was conducted to evaluate residues of fifteen organochlorine insecticides in honey samples of unifloral and multifloral origins from Dir, Pakistan. Honey samples (5 g each) were extracted with GC grade organic solvents and then subjected to Rotary Evaporator till dryness. The extracts were then mixed with n-Hexane (5 ml) and purified through Column Chromatography. Purified extracts (1μl each) were processed through Gas Chromatograph coupled with Electron Capture Detector (GC-ECD) for identification and quantification of the insecticides. Of the 15 insecticides tested, 46.7% were detected while 53.3% were not detected in the honey samples. Heptachlor was the most prevalent insecticide with a mean level of 0.0018 mg/kg detected in 80% of the samples followed by β-HCH with a mean level of 0.0016 mg/kg detected in 71.4% of the honey samples. Honey samples from Acacia modesta Wall. were 100% positive for Heptachlor with a mean level of 0.0048 mg/kg followed by β-HCH with a mean level of 0.003 mg/kg and frequency of 83.3%. Minimum levels of the tested insecticides were detected in the unifloral honey from Ziziphus jujuba Mill. Methoxychlor, Endosulfan, Endrin and metabolites of DDT were not detected in the studied honey samples. Some of the tested insecticides are banned in Pakistan but are still detected in honey samples indicating their use in the study area. The detected levels of all insecticides were below the Maximum Residue Levels (MRLs) and safe for consumers. However, the levels detected can cause mortality in insect fauna. The use of banned insecticides is one of the main factors responsible for the declining populations of important insect pollinators including honeybees.

Resumo O mel é uma matriz adequada para a avaliação de contaminantes ambientais, incluindo inseticidas organoclorados. O presente estudo foi conduzido para avaliar resíduos de 15 inseticidas organoclorados em amostras de mel de origem unifloral e multifloral de Dir, Paquistão. Amostras de mel (5 g cada) foram extraídas com solventes orgânicos de grau GC e, em seguida, submetidas ao evaporador rotativo até a secura. Os extratos foram então misturados com n-hexano (5 ml) e purificados por cromatografia em coluna. Os extratos purificados (1μl cada) foram processados através de cromatógrafo gasoso acoplado a detector de captura de elétrons (GC-ECD) para identificação e quantificação dos inseticidas. Dos 15 inseticidas testados, 46,7% foram detectados enquanto 53,3% não foram detectados nas amostras de mel. O heptacloro foi o inseticida mais prevalente com um nível médio de 0,0018 mg / kg detectado em 80% das amostras, seguido por β-HCH com um nível médio de 0,0016 mg / kg detectado em 71,4% das amostras de mel. Amostras de mel da parede de Acacia modesta foram 100% positivos para heptacloro com um nível médio de 0,0048 mg / kg seguido por β-HCH com um nível médio de 0,003 mg / kg e frequência de 83,3%. Níveis mínimos dos inseticidas testados foram detectados no mel unifloral de Ziziphus jujuba da usina. Metoxicloro, Endosulfan, Endrin e metabólitos do DDT não foram detectados nas amostras de mel estudadas. Alguns dos inseticidas testados são proibidos no Paquistão, mas ainda são detectados em amostras de mel, indicando seu uso na área de estudo. Os níveis detectados de todos os inseticidas estavam abaixo dos Níveis Máximos de Resíduos (MRLs) e seguros para os consumidores. No entanto, os níveis detectados podem causar mortalidade na fauna de insetos. O uso de inseticidas proibidos é um dos principais fatores responsáveis pelo declínio das populações de importantes insetos polinizadores, incluindo as abelhas.

Diversity of the Anisoptera & Zygoptera (Odonata: Insecta) of Swat, Pakistan / Diversidade de Anisoptera e Zygoptera (Odonata: Insecta) de Swat, Paquistão

Abstract Odonates are important biological control agents for the control of insect pests and insect disease vectors of medical and veterinary importance. The present study was conducted to evaluate the odonate fauna of Swat, Pakistan from March to October 2019. A total of 200 specimens of odonates were collected from diverse habitats. The collected specimens of the order Odonata belonged to 5 families, three families of suborder Anisoptera namely Libellulidae, Gomphidae and Aeshnidae while two families of suborder Zygoptera (Chlorocyphidae and Coenagrionidae). The specimens were categorized into 12 genera and 22 species. Libellulidae was the dominant family (n = 138) accounting for 69% of the odonate fauna. Orthetrum was the dominant genus (n = 73) of suborder Anisoptera accounting for 36.5% of the odonate fauna. The least dominant genera were Anax, Paragomphus and Rhyothemis (n = 5 each) accounting each for 2.5% of the odonate fauna. In Zygoptera, the dominant genus was Ceriagrion (12.5%) and the least dominant genus was Ischnura (6%). Pantala flavescens (Fabricius, 1798) was the most abundant odonate species in the study area recorded from all surveyed habitats. Shannon Diversity Index (H) was 2.988 and Simpson Diversity Index (D) was 0.95 for the collected odonate fauna. The highest abundance of Odonata was recorded in August, September and May while no odonate species were recorded in January, February, November and December. Lotic water bodies were the most suitable habitats with abundant odonate fauna. Anax immaculifrons (Rambur, 1842) was the largest sized odonate species having a wingspan of 53.2±1.63 mm and body length of 56.3 ± 0.4 mm. The present study shows the status of odonate fauna of Swat, Pakistan in diverse habitats and seasonsonal variation throughout the year. Further work is recommended to bridge the gaps in the existing literature.

Resumo Odonatos são importantes agentes de controle biológico para o controle de insetos-praga e vetores de doenças de insetos de importância médica e veterinária. O presente estudo foi conduzido para avaliar a fauna de odonatos de Swat, Paquistão, de março a outubro de 2019. Um total de 200 espécimes de odonatos foi coletado em diversos habitats. Os espécimes coletados da ordem Odonata pertenciam a cinco famílias, três famílias da subordem Anisoptera, a saber, Libellulidae, Gomphidae e Aeshnidae, enquanto duas famílias eram da subordem Zygoptera (Chlorocyphidae e Coenagrionidae). Os espécimes foram classificados em 12 gêneros e 22 espécies. Libellulidae foi a família dominante (n = 138), respondendo por 69% da fauna de odonatos. Orthetrum foi o gênero dominante (n = 73) da subordem Anisoptera, responsável por 36,5% da fauna de odonatos. Os gêneros menos dominantes foram Anax, Paragomphus e Rhyothemis (n = 5 cada), representando cada um 2,5% da fauna de odonatos. Em Zygoptera, o gênero dominante foi Ceriagrion (12,5%), e o gênero menos dominante foi Ischnura (6%). Pantala flavescens (Fabricius, 1798) foi a espécie de odonato mais abundante na área de estudo, registrada em todos os habitats pesquisados. O Índice de Diversidade de Shannon (H) foi de 2,988, e o Índice de Diversidade de Simpson (D) foi de 0,95 para a fauna de odonatos coletados. A maior abundância de Odonata foi registrada em agosto, setembro e maio, enquanto nenhuma espécie de Odonata foi registrada em janeiro, fevereiro, novembro e dezembro. Corpos d'água lóticos foram os habitats mais adequados, com abundante fauna de odonatos. Anax imaculifrons (Rambur, 1842) foi a espécie de odonato de maior tamanho, com envergadura de 53,2 ± 1,63 mm e comprimento do corpo de 56,3 ± 0,4 mm. O presente estudo mostrou o status da fauna de odonatos de Swat, Paquistão, em diversos habitats e variação sazonal ao longo do ano. Recomenda-se trabalho adicional para preencher as lacunas na literatura existente.

Diversity, distribution and relative abundance of the mosquito fauna (Diptera: Culicidae) of Malakand and Dir Lower, Pakistan / Diversidade, distribuição e abundância relativa da fauna de mosquitos (Diptera: Culicidae) de Malakand e Dir Lower, Paquistão

Abstract The present study was conducted to evaluate the diversity, distribution (C) and relative abundance (RA) of the mosquito fauna (Diptera: Culicidae) of Malakand and Dir Lower, Pakistan. Collection of specimens (n = 1087) was made during September 2018 to July 2019 at six different habitats including freshwater bodies, rice fields, animal sheds, indoors, drains and sewage waters. Specimens were collected through light traps, pyrethrum spray, aspirators and nets and subsequently killed, preserved and then arranged in entomological boxes for identification. Three genera were identified namely Culex, Anopheles and Aedes. A total of fourteen species were identified namely: Cx. quinquefasciatus (Say, 1823), An. stephensi (Liston, 1901), Cx. tritaeniorhynchus (Giles, 1901), Ae. vittatus (Bigot, 1861), An. maculatus (Theobald, 1901), An. fluviatilis (James, 1902), Cx. vishnui (Theobald, 1901), Ae. aegypti (Linnaeus, 1762) An. subpictus (Grassi, 1899), An. dthali (Patton, 1905), An. culicifascies (Giles, 1901), An. pallidus (Theobald, 1901), Ae. albopictus (Skuse, 1894) and An. annularis (van der Wulp, 1884). Cx. quinquefasciatus was found constantly distributed in the study area with RA = 16.5% and C = 100%. An. annularis was found as a satellite species, sporadically distributed in the study area having RA = 0.9% and C = 17%. Diversity indices of mosquitoes in the studied habitats were found as, Shannon-Wiener Index (2.415), Simpson Index (9.919), Fisher's Index (2.269) and Margalef's Index (1.859). A statistically significant difference was recorded in mosquito diversity in the six habitats (Kruskal-Wallis, chi-squared, H = 17.5, df = 5, P = 0.003 at α = 0.05). The present study encompasses mosquito fauna of Malakand, Pakistan with respect to diversity, relative abundance and distribution in diverse habitats and all seasons of the year. This will assist scientists working in various fields related with epidemiology, medical and veterinary entomology, ecology and allied areas of biological sciences.

Resumo O presente estudo foi conduzido para avaliar a diversidade, distribuição (C) e abundância relativa (RA) da fauna de mosquitos (Diptera: Culicidae) de Malakand e Dir Lower, Paquistão. A coleta de espécimes (n = 1087) foi feita durante o período de setembro de 2018 a julho de 2019 em seis habitats diferentes, incluindo corpos d'água, campos de arroz, galpões de animais, ambientes internos, ralos e águas residuais. Os espécimes foram coletados por meio de armadilhas luminosas, spray de piretro, aspiradores e redes e posteriormente mortos, preservados e depois dispostos em caixas entomológicas para identificação. Três gêneros foram identificados, nomeadamente Culex, Anopheles e Aedes. Um total de 14 espécies foi identificado, a saber: Cx. quinquefasciatus (Say, 1823), An. stephensi (Liston, 1901), Cx. tritaeniorhynchus (Giles, 1901), Ae. vittatus (Bigot, 1861), An. maculatus (Theobald, 1901), An. fluviatilis (James, 1902), Cx. vishnui (Theobald, 1901), Ae. aegypti (Linnaeus, 1762), An. subpictus (Grassi, 1899), An. dthali (Patton, 1905), An. culicifascies (Giles, 1901), An. pallidus (Theobald, 1901), Ae. albopictus (Skuse, 1894) e An. annularis (Van der Wulp, 1884). Cx. quinquefasciatus foi encontrado constantemente distribuído na área de estudo com AR = 16,5% e C = 100%. A. annularis foi encontrada como espécie satélite, distribuída esporadicamente na área de estudo com RA = 0,9% e C = 17%. Os índices de diversidade de mosquitos nos habitats estudados foram encontrados como índice de Shannon-Wiener (2,415), índice de Simpson (9,919), índice de Fisher (2,269) e índice de Margalef (1,859). Uma diferença estatisticamente significativa foi registrada na diversidade de mosquitos nos seis habitats (Kruskal-Wallis, qui-quadrado, H = 17,5, df = 5, P = 0,003 em α = 0,05). O presente estudo abrange a fauna de mosquitos de Malakand, Paquistão, com respeito à diversidade, abundância relativa e distribuição em diversos habitats e em todas as estações do ano. Isso ajudará os cientistas que trabalham em vários campos relacionados com a epidemiologia, entomologia médica e veterinária, ecologia e áreas afins das ciências biológicas.

New data on family Araneidae from district Swat with updated checklist of the family from Pakistan.

The aims of the present research was to find out the diversity of family Araneidae in district Swat Pakistan and to provide updated checklist of the family Araneidae from Pakistan. Also their occurrence throughout the year was given from District Swat Khyber Pakhtunkhwa, Pakistan. Data was collected from January 2018 to December-2018 from seven different Tehsils of District Swat by using different methods like pitfall trap, ground hand collection, air hand collection and were then preserved in plastic vials and appendorf tubes by using 70% ethanol. Camera mounted on microscope was used for photography. By using literature from World Spider Catalog, 2022, spiders were identified to species level. In a ttal of 1243 specimens of family Araneidae 4 genera and 7 species were identified. Dominant species with great number of specimen collected was Cyrtophora citricolla with 229 (18.4%) samples, followed by Bojaranius mitificus (15.7%), Neoscona Scylla (15.4%), Argiope lobata (14.8), Neoscona theisi (14.6%) and Neoscona polyspinippes (13.8%) respectively. While lowest collection was done of Argiope versicolor with 90 (7.3%) samples. High occurrence of spiders was studied during July 187 samples. Fluctuation in temperature can affect the diversity of spiders observed and recorded in present study with lowest collection done in low temperature. Moreover, the humidity also play a great role in spiders' population and occurrence.

Mitochondrial DNA diversity and maternal origins of Pakistani donkey.

Domestic donkey plays a key role as a draft animal in rural economy of Pakistan where its population is increasing every year. The complete mtDNA control region of forty randomly sampled donkeys was PCR- amplified and sequenced bi-directionally using specific primers. Distinct mtDNA haplotypes obtained in the current study (KY446001-KY446011) were subjected to haplotype (h) and nucleotide diversity (π) measures using DnaS as well as to phylogenetic, Network, and AMOVA analyses. There were a total 27 polymorphic sites present within 11 unique mtDNA haplotypes from the studied 40 animals from different regions. Neighbor-joining network and median-joining network both illustrated the splitting of all these haplotypes into two well-defined Nubian and Somali lineages, confirming African maternal origin of Pakistani domestic donkey. Diversity parameters h (0.967± 0.037) and π (0.02917± 0.00307) were found to reveal high levels of genetic diversity in Pakistani donkeys. AMOVA demonstrated only 1% of genetic differences between two mtDNA maternal lineages, pointing to lack of population substructure in Pakistani donkeys as is the case with worldwide domestic donkey population. Pakistani donkeys have African maternal origin and high levels of mtDNA diversity. High genetic diversity may be due to non-selective breeding and heteroplasmy. We herein provide the first report on mtDNA diversity of control region in Pakistani domestic donkey.

PCR-RFLP Based genetic diversity of Plasmodium vivax genotypes in district Mardan, Pakistan / Diversidade genética baseada em PCR RFLP de genótipos de Plasmodium vivax no distrito de Mardan, Paquistão

Plasmodium vivax is the most common human malaria parasite in Asian countries including Pakistan. Present study was designed to explore the genetic diversity of plasmodium vivax genotypes based on Pvmsp-3α and Pvmsp-3βgenes using allelic specific nested PCR and RFLP assays markers from field isolates in district Mardan, Pakistan. Blood samples of 200 P. vivax malarial patients were collected after taking their written informed consent. Genetic diversity in nested PCR products was determined by Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) utilizing Alu1 and PstI restriction enzymes for alpha and beta gene products digestion, respectively. For analysis the genetic diversity of the sub allelic variants of Pvmsp3α and Pvmsp3β genes, Chi-Square test was performed by utilizing Minitab programming software 18. The P value 0.05 was considered as statistically significant. For Pvmsp 3α genes after gel electrophoresis of digested products, four distinct genotypes were obtained from total of 50 samples; type A: 35 (70%) (1.5-2.0 kb), 12 of type B (24%) (1.5-1.7 kb), 2 of type C (4%) (0.5-1.5) and one for type D (2%) (0.5-0.65 kb) which could be characterized into 9 allelic pattern (A1-A4, B1-B3, C1, D), in which A3 remained the most predominant. For Pvmsp-3βgenes, three distinct genotypes were obtained from 50 samples; 40(80%) of type A (1.5-2.5 kb), 9 (18%) of type B (1.0-1.5kb) and 1(2%) of type C (0.65 kb) which could be characterized into 6 allelic patterns (A1-A3, B1-B2, and C1). Most dominant one in Type A was A1 alleles which were noted (46%), while in Type B, the most dominant were B1 (10%).This study is the first ever report of molecular epidemiology and genetic variation in Pvmsp-3α and Pvmsp-3β genes of P. vivax isolates by using PCR/RFLP from District Mardan and [...].(AU)

O Plasmodium vivax é o parasita da malária humana mais comum nos países asiáticos, incluindo o Paquistão. O presente estudo foi desenhado para explorar a diversidade genética de genótipos de Plasmodium vivax baseados nos genes Pvmsp-3α e Pvmsp-3β, usando marcadores de ensaios alélicos nested PCR e RFLP de isolados de campo no distrito de Mardan, Paquistão. Amostras de sangue de 200 pacientes com malária por P. vivax foram coletadas após assinatura do termo de consentimento livre e esclarecido. A diversidade genética em produtos de PCR nested foi determinada por polimorfismo de fragmento de restrição (RFLP) utilizando as enzimas de restrição Alu1 e PstI para a digestão dos produtos dos genes alfa e beta, respectivamente. Para análise da diversidade genética das variantes subalélicas dos genes Pvmsp3α e Pvmsp3β, o teste Qui-quadrado foi realizado utilizando o software de programação Minitab 18. O valor P = 0,05 foi considerado estatisticamente significativo. Para os genes Pvmsp 3α, após eletroforese em gel de produtos digeridos, quatro genótipos distintos foram obtidos de um total de 50 amostras; tipo A: 35 (70%) (1,5-2,0 kb), 12 do tipo B (24%) (1,5-1,7 kb), 2 do tipo C (4%) (0,5-1,5) e um para o tipo D (2%) (0,5-0,65 kb), que podem ser caracterizados em nove padrões alélicos (A1-A4, B1-B3, C1, D), em que A3 permaneceu como o mais predominante. Para Pvmsp-3βgenes, três genótipos distintos foram obtidos a partir de 50 amostras; 40 (80%) do tipo A (1,5-2,5 kb), 9 (18%) do tipo B (1,0-1,5 kb) e 1 (2%) do tipo C (0,65 kb), que podem ser caracterizados em seis padrões alélicos (A1-A3, B1-B2 e C1). Os mais dominantes no tipo A foram o alelo A1, observados em 46%, enquanto, no tipo B, os mais dominantes foram B1 (10%). Este estudo é o primeiro relato de epidemiologia molecular e variação genética em Pvmsp-3α. Os genes Pvmsp-3β de isolados de P. vivax utilizando PCR/RFLP do Distrito Mardan mostraram um nível notável de diversidade genética nos genes estudados [...].(AU)

Description of Lutziella swatensis sp. n (Trematoda: Dicrocoelidae) from Rattus rattus in Swat, Pakistan / Descrição de Lutziella swatensis sp. n (Trematoda: Dicrocoelidae) de Rattus rattus em Swat, Paquistão

A new species of the genus Lutziella (Rohde, 1966) Yamaguti, 1971 is described here and named Lutziella swatensis sp.nov. from the liver of rat (Rattus rattus L.). The new species is characterized by having body flat, smooth, longer than broad with maximum width at the level of the ovary, oral sucker with weak musculature, pharynx small; eosophagus long; caeca of irregular shape which bifurcate on the anterior border of the ovary in to unequal portions, acetabulum weakly muscular, post-testicular, testes lobed, cirrus pouch somewhat median, small in size containing winding seminal vesicle, prostatic complex and short ejaculatory duct. Genital pore median. Ovary post testicular, submedian; seminal receptacle overlapping ovary, laurers canal present. Vitellaria follicular extending on each side from almost the level of testes to anterior portion of posterior half of the body. Uterus filled with eggs occupying most of the body, eggs oval rather small, numerous, brownish in colour, excretory vesicle tubular with terminal pore. Lutziella swatensis n. sp. is the second species of the genus known from Pakistan as well as the second species described from murid rodents in the world.(AU)

Uma nova espécie do gênero Lutziella (Rohde, 1966) Yamaguti, 1971 é descrita aqui e denominada Lutziella swatensis sp.nov. do fígado do rato (Rattus rattus L.). A nova espécie é caracterizada por ter corpo liso, liso, mais longo que largo com largura máxima ao nível do ovário, otário oral com musculatura débil, faringe pequena; eosôfago longo; ceco de forma irregular que se bifurca na borda anterior do ovário em porções desiguais, acetábulo fracamente muscular, pós-testicular, testículos lobados, bolsa cirrus um pouco mediana, pequeno em tamanho contendo vesícula seminal sinuosa, complexo prostático e ducto ejaculatório curto. Mediana dos poros genitais. Ovário pós testicular, submediano; ovário sobreposto do receptáculo seminal, canal de laurer presente. Vitellaria folicular que se estende de cada lado de quase o nível dos testículos para a porção anterior da metade posterior do corpo. Útero cheio de ovos que ocupam a maior parte do corpo, oval ovos bastante pequenos, numerosos, de cor acastanhada, vesícula excretor tubular com poro terminal. Lutziella swatensis n. sp. é a segunda espécie do gênero conhecida do Paquistão, bem como a segunda espécie descrita de roedores do mundo.(AU)