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RESUMEN

OBJECTIVE: To clone, express and purify nucleocapsid protein from SARS coronavirus PUMC2 strain. METHODS: According to the published SARS coronavirus genome sequences, the full length cDNA of N protein from SARS coronavirus PUMC2 strain was cloned by RT-PCR and the cDNA was cloned into the pET32a expression vector. The recombinant N protein was expressed in E. coli BL21 (DE3), and purified by Ni(2+)-NTA. RESULTS: Prokaryoticly expressed and purified N protein of SARS coronavirus PUMC2 strain was obtained. CONCLUSIONS: The SARS coronavirus recombinant N protein obtained by genetic engineering methods can be used for further functional study of SARS coronavirus N protein.

Asunto(s)

Clonación Molecular , ADN Viral/genética , Proteínas de la Nucleocápside/genética , Coronavirus Relacionado al Síndrome Respiratorio Agudo Severo/genética , Secuencia de Aminoácidos , Secuencia de Bases , Proteínas de la Nucleocápside de Coronavirus , ADN Complementario/genética , Escherichia coli/genética , Vectores Genéticos , Genoma Viral , Datos de Secuencia Molecular , Proteínas de la Nucleocápside/biosíntesis , Proteínas de la Nucleocápside/aislamiento & purificación , ARN Viral/genética , Proteínas Recombinantes de Fusión/biosíntesis , Proteínas Recombinantes de Fusión/genética , Reacción en Cadena de la Polimerasa de Transcriptasa Inversa , Coronavirus Relacionado al Síndrome Respiratorio Agudo Severo/aislamiento & purificación , Análisis de Secuencia de ADN

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