Vitamin D opposes multilineage cell differentiation induced by Notch inhibition and BMP4 pathway activation in human colon organoids.

Understanding the mechanisms involved in colonic epithelial differentiation is key to unraveling the alterations causing inflammatory conditions and cancer. Organoid cultures provide an unique tool to address these questions but studies are scarce. We report a differentiation system toward enterocytes and goblet cells, the two major colonic epithelial cell lineages, using colon organoids generated from healthy tissue of colorectal cancer patients. Culture of these organoids in medium lacking stemness agents resulted in a modest ultrastructural differentiation phenotype with low-level expression of enterocyte (KLF4, KRT20, CA1, FABP2) and goblet cell (TFF2, TFF3, AGR2) lineage markers. BMP pathway activation through depletion of Noggin and addition of BMP4 resulted in enterocyte-biased differentiation. Contrarily, blockade of the Notch pathway using the γ-secretase inhibitor dibenzazepine (DBZ) favored goblet cell differentiation. Combination treatment with BMP4 and DBZ caused a balanced strong induction of both lineages. In contrast, colon tumor organoids responded poorly to BMP4 showing only weak signals of cell differentiation, and were unresponsive to DBZ. We also investigated the effects of 1α,25-dihydroxyvitamin D3 (calcitriol) on differentiation. Calcitriol attenuated the effects of BMP4 and DBZ on colon normal organoids, with reduced expression of differentiation genes and phenotype. Consistently, in normal organoids, calcitriol inhibited early signaling by BMP4 as assessed by reduction of the level of phospho-SMAD1/5/8. Our results show that BMP and Notch signaling play key roles in human colon stem cell differentiation to the enterocytic and goblet cell lineages and that calcitriol modulates these processes favoring stemness features.

Microliquid/Liquid Interfacial Sensors: Biomimetic Investigation of Transmembrane Mechanisms and Real-Time Determinations of Clemastine, Cyproheptadine, Epinastine, Cetirizine, and Desloratadine.

Antihistamines relieve allergic symptoms by inhibiting the action of histamine. Further understanding of antihistamine transmembrane mechanisms and optimizing the selectivity and real-time monitoring capabilities of drug sensors is necessary. In this study, a micrometer liquid/liquid (L/L) interfacial sensor has served as a biomimetic membrane to investigate the mechanism of interfacial transfer of five antihistamines, i.e., clemastine (CLE), cyproheptadine (CYP), epinastine (EPI), desloratadine (DSL), and cetirizine (CET), and realize the real-time determinations. Cyclic voltammetry (CV) and differential pulse voltammetry (DPV) techniques have been used to uncover the electrochemical transfer behavior of the five antihistamines at the L/L interface. Additionally, finite element simulations (FEMs) have been employed to reveal the thermodynamics and kinetics of the process. Visualization of antihistamine partitioning in two phases at different pH values can be realized by ion partition diagrams (IPDs). The IPDs also reveal the transfer mechanism at the L/L interface and provide effective lipophilicity at different pH values. Real-time determinations of these antihistamines have been achieved through potentiostatic chronoamperometry (I-t), exhibiting good selectivity with the addition of nine common organic or inorganic compounds in living organisms and revealing the potential for in vivo pharmacokinetics. Besides providing a satisfactory surrogate for studying the transmembrane mechanism of antihistamines, this work also sheds light on micro- and nano L/L interfacial sensors for in vivo analysis of pharmacokinetics at a single-cell or single-organelle level.

Fármacos antiepilépticos / Antiepileptic drugs

Se refieren las características farmacocinéticas y farmacodinámicas más destacadas de los fármacos antiepilépticos comercializados en los cuatro últimos años (acetato de eslicarbacepina, brivaracetam y perampanel). Se analiza su eficacia y tolerabilidad en estudios clínicos abiertos, que son los que reproducen su utilización en la vida diaria, sin los protocolos rígidos de los ensayos clínicos

We report the most notable pharmacokinetic and pharmacodynamic characteristics of the antiepileptic drugs commercialised in the last four years (eslicarbazepine acetate, brivaracetam and perampanel). Their efficacy and safety are analysed in open-label clinical trials, which are the ones that reproduce their use in everyday life, without the rigid protocols used in clinical trials

Olanzapina y consumo de cocaína en programas de mantenimiento con metadona: nuevos resultados / Olanzapine and cocaine consumption in methadone maintenance programs: new results

OBJETIVO: Evaluar el uso de olanzapina como tratamiento de reducción del uso de cocaína en programas de mantenimiento con metadona. PACIENTES Y MÉTODO: Se ha aplicado un diseño de cuadrado latino sobre 45 sujetos adscritos a tres programas de mantenimiento con metadona. Se utilizaron dos variables de bloqueo; la dosis de dispensación de metadona (con tres concentraciones: 81 mg/día) y la frecuencia de consumo de cocaína durante los 3 meses previos al inicio del tratamiento (también con tres concentraciones: sin consumo, 21 por ciento de determinaciones en orina positivas). La variable independiente dosis de olanzapina (con tres niveles: 0, 5 y 10 mg/día) se aplicó según el protocolo del diseño. Los sujetos recibían, junto a su dosis diaria de metadona, el tratamiento de olanzapina correspondiente a su asignación en el diseño. La variable resultado fue el porcentaje de consumos de cocaína estimado por control de orinas mediante inmunoanálisis, durante los 3 meses posteriores al inicio del tratamiento. Durante este período se recogió una prueba de orina semanal; en 37 sujetos se hicieron 12 controles y en 8 casos 13. RESULTADOS: El análisis de la varianza por descomposición de las fuentes de variación propio de un diseño de cuadrado latino ha ofrecido un efecto significativo para el tratamiento (F(2,36) = 17,19; p < 0,001) y para un efecto de interacción (F(2,36) = 12,47; p < 0,001). La proporción media de controles positivos entre los sujetos sin tratamiento ha sido del 22,6 por ciento, y entre los que han recibido tratamiento con olanzapina ha sido del 4,2 por ciento en los sujetos con dosis de 5 mg/día, y de 3,8 por ciento entre los tratados con 10 mg/día. CONCLUSIONES: Se evidencia un efecto significativo del tratamiento con olanzapina en la reducción del consumo de cocaína en usuarios participantes en un programa de mantenimiento con metadona. No obstante, la presencia de efectos de interacción obliga a ser cautos en la valoración de los resultados, y sería conveniente que se realizaran nuevos diseños que permitieran un mayor control de los efectos de las variables intervinientes (AU)