Reflexiones ético-legales entorno a la recogida y análisis de muestras biológicas humanas en los ensayos clínicos promovidos por las compañías farmacéuticas / Reflexions ètico-legals al voltantde la recollida i anàlisi de mostres biològiques humanesenels assaigs clínics promoguts per les companyies farmacèutiques / Ethical and legal considerations on collection and analysis of human biological samples within clinical trials sponsored by the pharmaceutical companies

La recogida de muestras biológicas humanas dentro del contexto de un ensayo clínico promovido por un laboratorio farmacéutico y no relacionada directamente con el ensayo es cada vez más habitual. Este artículo plantea los conflictos bioéticos que dicha recogida, almacenamiento y análisis conllevan, y como afrontarlos.(AU)

La recollida de mostres biològiques humanes dintre del context d ́un assaig clínic promogut per un laboratorio farmacèutic i no relacionada directament amb l ́assaig és cada cop més habitual. Aquest article planteja els conflictes bioètics que aquesta recollida, enmagatzematge i anàlisi comporten i com enfrontar-los.(AU)

The collection of human biological samples within a clinical trial sponsored by a pharmaceutical company and not directly related with the trial it is more and more common. This paper shows the bioethical conflicts regarding the collection, storage, and analysis and how to face them.(AU)

Orientações de biossegurança laboratorial relativa à doença do coronavírus (COVID-19): orientação provisória, 19 de março de 2020 / Laboratory biosafety guidance related to coronavirus disease (‎COVID-19)‎: interim guidance, 19 March 2020

[Introdução]: O objetivo deste documento é fornecer orientações provisórias de biossegurança laboratorial para testes com amostras clínicas de pacientes que atendam à definição de casos do novo patógeno identificado em Wuhan, China, ou seja, a doença do coronavírus 2019 (COVID-19). A OMS revisará essas recomendações conforme necessário.

Efficacy of an information system addressed to nursing staff for diminishing contaminated blood cultures: a blind clinical trial / Eficacia de un sistema de información dirigido al personal de enfermería para disminuir la contaminación de los hemocultivos: un ensayo clínico ciego

Introduction: Evaluate the efficacy of an information system addressed to nursing staff to lower the blood culture contamination rate. Methods: A blind clinical trial was conducted at Internal Medicine and Emergency Departments during 2011. After following a reeducation program in BC extraction, participants were randomly selected in a 1:1 ratio. Every participant of the experimental group was informed of each worker's individual performance; whereas the control group was only informed of the global results. Results: A total of 977 blood extractions were performed in 12 months. Blood culture contamination rate was 7.5%. This rate was higher in the Emergency Department than in Internal Medicine (10% vs. 3.8%; p=0.001). Factors associated with the higher risk of contamination were, in the univariate analysis, the extraction through a recently implanted blood route and the time of professional experience, while those associated with a lower risk were the extraction in Internal Medicine and through a butterfly needle. On multivariate analysis, extraction through a recently placed access was an independent risk factor for an increased contamination rate (OR 2.29; 95%CI 1.18-4.44, p=0.014), while individual information about the blood culture results (OR 0.11; 95%CI 0.023-0.57; p=0.008), and more than 9 years of professional experience were asso-ciated with fewer contaminations (OR 0.30; 95%CI 0.12-0.77; p=0.012). In the intervention group the contamination rate diminished by a 26 %. Conclusions: Drawing blood cultures through a recently taken peripheral venous access increased their risk of contamination. The intervention informing the nurse staff of the contamination rate is effective to decrease it

Objetivos: Evaluar la eficacia de un sistema de información dirigido al personal de enfermería, en la reducción de la tasa de contaminación de los hemocultivos. Métodos: Durante el año 2011, se realizó un ensayo clínico en los servicios de Medicina Interna y de Urgencias. Después de seguir un programa de reeducación en la extracción de los hemocultivos, los participantes, fueron aleatorizados en una proporción de 1:1. En el grupo de intervención se informó del porcentaje de hemocultivos contaminados de cada profesional y en el grupo control se aportaba la información del porcentaje global de contaminaciones. Resultados: Durante un periodo de 12 meses se realizaron 977 extracciones. La tasa de contaminación de los hemocultivos fue del 7,5%. Esta tasa fue mayor en Urgencias que en Medicina Interna (10% versus 3,8%, p=0,001). Los factores asociados con mayor riesgo de contaminación fueron, en el análisis univariable: la extracción a través de una vía sanguínea recientemente implantada y el tiempo de experiencia profesional; mientras que los que se asociaron con menor riesgo fueron la extracción en Medicina Interna (versus en Urgencias) y a través de una palomilla. En el análisis multivariable, la extracción de los hemocultivos de una vía recientemente implantada se relacionó de forma independiente con un incremento de las contaminaciones (OR 2,29, IC 95% 1,18-4,44, p=0,014),mientras que la información individual sobre los resultados de los hemocultivos (OR 0.11; IC 95% 0,023-0,57; p=0,008) y la experiencia profesional mayor de 9 años, lo hizo con menos contaminaciones (OR 0,30, IC 95% 0,12-0,77, p=0,012). En el grupo de intervención la tasa de contaminaciones se redujo en un 26%. Conclusión: La extracción de hemocultivos a través de una vena periférica recientemente implantada aumentó el riesgo de contaminación de los mismos. La intervención informativa a los enfermeros de la tasa de contaminación de los hemocultivos, es eficaz para disminuirla

Recomendaciones para la optimización del uso de marcadores tumorales de utilización frecuente. Recomendación (2018) / Recommendations for the optimization of the use of frequently used tumor markers. Recommendation 2018

Este documento describe las causas de error más frecuentes en la medición de marcadores tumorales séricos proteicos en sus diferentes fases: preanalítica, analítica y postanalítica y recomendaciones para detectar y solventar problemas, así como la interpretación de los resultados de los marcadores tumorales en la práctica clínica

This document describes the most frequent causes of error in the measurement of 13 serum protein tumour markers in their different phases: preanalytical, analytical and 14 postanalytic and recommendations to detect and solve problems, as well as the 15 interpretation of the results of the Tumor Markers in clinical practice

Estabilidad de analitos conservados en tubo cerrado con film versus cerrado con tapa plástica / Stability of analytes stored in a tube sealed with film versus closed with plastic cap

Introducción: El laboratorio debe garantizar la estabilidad de las muestras conservadas con la finalidad de una eventual confirmación de resultados o corregir posibles errores u omisiones al ingresar las solicitudes médicas. Con este objetivo se comparó la estabilidad de los analitos de muestras conservadas en el tubo primario selladas con film contra cierre con tapa plástica. Material y métodos: Veinticuatro muestras de sangre fueron alicuotadas en dos tubos primarios, uno cerrado con tapa plástica y otro con film. A ambas alícuotas se les midieron 26 analitos de química clínica durante siete días consecutivos, en un autoanalizador Cobas c 501 de Roche y se conservaron en refrigerador a 2-8°C. Se calcularon los coeficientes de variación y el error total. Los resultados obtenidos se compararon con el requisito de calidad respectivo establecido por el laboratorio. Conclusiones: Se observó una mayor variabilidad en los tubos cerrados con film respecto de los cerrados con tapa plástica. Todas las enzimas evaluadas cumplieron el requisito de calidad durante 4 días. A excepción del hierro todos los iones fueron estables solo un día. Los metabolitos fueron estables durante una semana a excepción de glucosa, proteínas totales, ácido úrico y albúmina. Se recomienda que cada laboratorio evalúe la estabilidad de los analitos en base a su forma de trabajo

Introduction: The laboratory must be able to guarantee the stability of stored patient samples for confirmation of results or errors in the interpretation of the medical request. The aim of this study was to evaluate the stability of the blood analytes preserved in tubes sealed with film versus a plastic cap. Material and methods: A total of 24 blood samples were aliquoted into two tubes; one sealed with film, and the other with a plastic cap. Twenty-six clinical chemistry analytes were measured for 7 consecutive days using a Roche Cobas c 501 autoanalyser. The samples were stored in a refrigerator between 2-8C. The total error and coefficient of variation were calculated, and the results were compared against the quality requirements of the laboratory. Conclusions: The variation was higher in the tubes sealed with film than in those with a plastic cap. Enzymes remained within the quality requirements for four days, and ions, apart from iron, were stable for only one day. The metabolites were stable for seven days excluding glucose, uric acid, total proteins, and albumin. It is suggested that each laboratory must evaluate the stability of analytes based on its workflow

Desarrollo de procedimientos de medida basados en la cromatografía líquida de alta resolución / Development of measurement procedures based on high-performance liquid chromatography

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Procedimiento para el estudio de interferencias exógenas en la medición de magnitudes biológicas. Documento técnico (2017) / Procedure for the study of exogenous interferences in the measurement of biological quantities. Technical document (2017)

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Avaliação da qualidade e da estabilidade de amostras de soro humano para análise e armazenamento em biorrepositório / Evaluation of the quality and the stability of human samples for analysis and storage in biorepository

Objetivo: O Estudo das Condições de Vida e Saúde de Pomerode, SC (SHIP-Brasil), conduzido pela Universidade Regional de Blumenau, visa estratificar os fatores de risco e genéticos eventualmente existentes na gênese das mais variadas doenças. Para tal são necessários exames laboratoriais, antropométricos, genéticos e de imagem para a definição das mesmas e o acompanhamento de sua evolução. Este trabalho teve como objetivo avaliar a qualidade das amostras armazenadas no biorrepositório do estudo, que podem ser utilizadas para pesquisas de biomarcadores no futuro. Métodos: Foram avaliadas amostras de soro em jejum de 56 voluntários. Os analitos estudados foram glicose, colesterol total, creatinina e transaminase glutâmico-pirúvica (ALT), após 1, 2 e 3 anos de armazenamento a -80ºC. Os resultados foram analisados com o Teste t de Student e de acordo com o Erro Permitido Máximo para cada analito. Resultados: Não encontramos evidências de que as amostras do Estudo SHIP-Brasil possam perder a sua qualidade após serem armazenadas por longos períodos. Conclusão: Os Procedimentos Operacionais Padrão (POPs) estabelecidos estão adequados para o processamento e preservação das amostras.

Qualificação do transporte de amostras para o monitoramento da qualidade de água tratada para uso em diálise / Qualification of the sample transport for monitoring the quality of water for dialysis purpose

As condições de coleta e o transporte das amostras de água tratada para uso em diálise são etapas críticas para garantir a qualidade dos resultados analíticos. A temperatura no transporte de amostras deve assegurar a manutenção das características físicas e biológicas desde a coleta até o recebimento pelo laboratório analítico. O objetivo deste estudo foi de qualificar o transporte de amostras de água tratada para diálise desde os Serviços de Diálise do estado de São Paulo até o Instituto Adolfo Lutz, realizado durante a execução do Programa Estadual de Monitoramento. Os resultados obtidos indicaram que o sistema adotado, utilizando-se caixas isotérmicas e gelo reutilizável, é capaz de garantir as condições adequadas de temperatura durante o transporte do ponto de coleta das amostras até o laboratório analítico.

The conditions for collecting and transporting the dialysis water samples are the critical steps to assure the quality of the analytical results. The temperature during the water samples transport should ensure the maintenance of the physical and biological characteristics of samples from their collections to the analytical laboratory. The objective of this study was to qualify the transport of the dialysis water samples from the Dialysis Services of the state of São Paulo to the Adolfo Lutz Institute, during the performance of the State Monitoring Program. By using the isothermal boxes and the reusable ices, the obtained results indicated that the adopted system were able to guarantee the adequate temperature conditions during the transport from the sample collection point to the analytical laboratory.

Impacto de métodos de preservação na caracterização por taxonomia polifásica de isolados de sporothrix spp / Impact of preservation methods on polyphasic taxonomy characterization of sporothrix spp isolates

Os métodos de preservação empregados em micologia buscam manter a viabilidade e a estabilidade das características fenotípicas e genéticas. Entretanto, alterações podem ocorrer dependendo da metodologia empregada. Atualmente são escassos os dados da estabilidade dos isolados de Sporothrix spp., incluindo perfis fenotípicos, genotípicos e proteômicos após o armazenamento. Com a recente descrição das novas espécies patogênicas, para o homem e outros mamíferos, torna-se necessário o armazenamento desses fungos em coleções de culturas para estudos futuros, possibilitando maior conhecimento sobre a taxonomia, fisiologia e virulência de Sporothrix spp. Portanto, o objetivo desse estudo foi avaliar métodos de preservação que permitam manter a estabilidade dos perfis fenotípicos, genotípicos e proteômicos dos isolados de Sporothrix spp.. Com esse propósito foram utilizados 8 isolados de Sporotrix spp., armazenados por três diferentes métodos. Preservação em água destilada, sob refrigeração a 4ºC e criopreservação a -80°C, por períodos de 6, 12, 18 e 24 meses de armazenamento. Os isolados foram identificados pelo sequenciamento parcial dos genes calmodulina e ß-tubulina e pela PCR fingerprinting. A estabilidade do fenótipo foi realizada, por meio das provas fenotípicas sugeridas na chave de identificação das espécies de Sporothrix spp. que incluem: morfologia dos conídios, diâmetro da colônia a 30°C, teste de termotolerância a 37°C e assimilação de carboidratos, glicose sacarose e rafinose. O dimorfismo também foi avaliado após a preservação. A estabilidade genotípica foi realizada por meio do sequenciamento parcial do gene codificador da ß-tubulina

A estabilidade proteômica foi realizada por espectrometria de massa (MALDI-TOF MS), após 24 meses de preservação. Todos os isolados foram recuperados dos três métodos em todos os períodos avaliados. No entanto, os isolados preservados em água destilada apresentaram contaminações. Alterações morfológicas foram observadas após preservação a -80°C, um isolado deixou de apresentar colônia pigmentada e conídios demáceos. O diâmetro das colônias assim como a termotolerância permaneceram estáveis nos três métodos. A principal alteração ocorreu com o perfil de assimilação de carboidratos e essa variação modificou a identificação das espécies pela chave taxonômica. A estabilidade genotípica para o gene codificador da ß-tubulina foi preservada após 24 meses em ambos os métodos de armazenamento. Entretanto, baixo polimorfismo foi detectado após preservação em água destilada. Os isolados foram identificados corretamente por espectometria de massa após o armazenamento, porém alterações no perfil protéico foram observadas. O método de preservação a 4°C foi o mais efetivo para preservar os isolados de Sporothrix spp., manteve estável a maioria das características fenotípicas, como também a estabilidade do genótipo por até 24 meses de armazenamento. Esse é um método simples e de baixo custo que pode seu usado em laboratórios de recursos limitados como, um método alternativo de preservação. (AU)

Influencia de la fase preanalítica en la cuantificación de la carga viral: aprendiendo de la experiencia / Influence of pre-analytical phase in viral load quantification: learning with the experience

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A critical analysis of the Recommendation CM/Rec(2016)6 of the Committee of Ministers to member States on research on biological materials of human origin on the basis of the comments made by the experts participating in its public consultation process

On 11 May 2016, the Council of Europe adopted the Recommendation CM/Rec(2016)6 of the Committee of Ministers to Member States on research on biological materials of human origin. This new legal tool is meant to play a key role in the harmonization of the regulation of the topic addressed in the Council of Europe geographical scope, and even beyond. This paper develops a critical analysis of the new Recommendation on the basis of the comments made by academics, representatives of the biotechnology industry, members of the ethics committees, professional and patient associations, national agencies, etc. in a public consultation organized to refine the preliminary draft of the document. It offers a detailed account of its main clauses while comparing them with the suggestions made by the participants in the consultation, highlighting the main disagreements that remained in its final version. In this way, it contributes to the most recent stage of development, both by performing a valuable analysis of the document and by including a critical comment on the utility of the public consultation made during the process

El 11 de mayo de 2016, el Consejo de Europa aprobó la Recomendación CM/Rec(2016)6 del Comité de Ministros a los Estados Miembros sobre investigación con materiales biológicos de origen humano. Este nuevo instrumento jurídico está destinado a desempeñar un papel clave en la armonización de la regulación del tema abordado en el ámbito geográfico del Consejo de Europa, e incluso más allá. En este documento se desarrolla un análisis crítico de la nueva Recomendación sobre la base de las observaciones formuladas por académicos, representantes de la industria biotecnológica, miembros de los comités de ética, asociaciones profesionales y de pacientes, agencias nacionales, etc. en la consulta preliminar sobre el documento realizada por el Consejo. Ofrece una descripción detallada de sus prin.cipales cláusulas, comparándolas con las sugerencias de los participantes en la consulta y destacando los principales desacuerdos que quedaron en su versión final. De esta manera, contribuye al estado de la cuestión a través de una doble vía, tanto realizando un valioso análisis del documento como incluyendo un comentario crítico sobre la utilidad de la consulta pública realizada durante el proceso

Estabilidad de metabolitos del cannabis y cocaína en orina conservada a -20 °C en laboratorio de Armada (San Fernando), durante un periodo de tiempo superior a 1 año / Stability of cannabis metabolites and cocaine in urine preserved at -20ºC in Armada (San Fernando) laboratory over a period of time of more than 1 year

Antecedentes: El consumo de drogas constituye un problema en el medio militar, siendo el cannabis y la cocaína, las drogas ilegales con una mayor prevalencia de consumo. Los laboratorios situados en establecimientos farmacéuticos son los encargados de la realización del análisis preliminar de cribado de muestras, como lo marca la Instrucción Técnica 1/2012 de IGESAN, siendo confirmados los resultados positivos de estos, en el Instituto de Toxicología de la Defensa. Las muestras cuyos resultados sean positivos a drogas de abuso se conservarán durante seis meses (excepto Orden Judicial o expediente disciplinario en curso) a -20 °C, por si se requiere repetir la determinación. Los metabolitos presentes en la orina pueden deteriorarse durante su almacenamiento y conservación, obteniendo resultados distintos si reanalizamos la muestra. Así, es importante para el laboratorio conocer la estabilidad de los metabolitos presentes en dichas muestras. Objetivo: Estudiar la estabilidad de los metabolitos del cannabis y cocaína en orina, después de haber sido conservadas a -20 °C durante más de un ano. Material y métodos: 91 muestras de orina que resultaron positivas (65 a metabolitos del cannabis, 25 a metabolitos de cocaína y 1 a cannabis y cocaína), utilizando el analizador Cobas Integra 400 plusR (método semicuantitativo-cualitativo que usa una técnica inmunológica, con puntos de corte de 50 ng/ml para cannabis y 300 ng/ml para cocaína). Fueron conservadas en tubos de plástico a -20 °C durante mas de un ano. Tras descongelar y agitar suavemente para homogeneizarlas, se reanalizaron con el mismo analizador. Resultados: De los 66 muestras positivas a metabolitos de cannabis se produjo una disminución media respecto a los valores iniciales de -22,89% (rango +43,15 a -73,36). De las 26 muestras positivas a metabolitos de cocaína se produjo una disminución media respecto a los valores iniciales de -4,02% (rango de +7,03 a -49,01). Conclusiones: Observamos que los metabolitos del cannabis presentes en las orinas congeladas durante mas de un ano, disminuyen en mayor medida que los de la cocaina. Resultaron porcentajes similares a los obtenidos por otros autores en el caso de cannabis, aunque no asi en caso de cocaína (AU)

Antecedents: drug consumption constitutes a problem in the military milieu, being cannabis and cocaine the illegal drugs with a highest prevalence of consumption. Laboratories situated in pharmaceutical establishments are responsible for carrying out the preliminary analysis of screening samples, as it is shown by the I.T. 1/2012 of IGESAN, which confirmed the positive results of these in the Toxicology Institute of Defense. Samples whose results are positive to abused drugs would be kept for six months at -20 oC, if required by repeating the test. Metabolites which are present in urine could be deteriorated during storage and conservation, getting different results when the sample is revised. For laboratories it is important to know the stability of the metabolites present in the samples. Objective: to investigate cannabis and cocaine metabolite stabilities in urine, after having been kept at -20 oC for more than a year. Material and methods: 91 urine samples turned out positive (65 to cannabis, 25 to cocaine and 1 to both), using the analyzer Cobas Integra 400 plusR (semiquantitative-qualitative method using an immunological technique, with cutoffs of 50 ng/ml for cannabis and 300 ng/ml for cocaine). They were stored in plastic tubes at -20 °C for more than a year. After defrosting and shaking them softly to homogenize, they were reanalyzed with the same analyzer. Results: for the 66 positive samples of cannabis metabolites the average decrease from initial values was of -22, 89% (range -73.36% to +43.15%).For the 26 positive samples of cocaine metabolites the average decrease from initial values was of -4.02% (range -49.01% to +7.03%). Conclusions: It was reported that cannabis metabolites present in frozen urine for more than a year decreased to a greater extent than those of cocaine. Cannabis percentages were similar to those obtained by other authors, whereas this was not the case of cocaine metabolites (AU)

Avaliação de terapias imunossupressoras em transplantes renais com uma abordagem metabolômica / Assessment of immunosuppressive therapies with a metabolomic approach

O aprimoramento das técnicas analíticas viabilizou a metabolômica, uma área da ciência que busca compreender, de forma comparativa, os metabólitos envolvidos nas vias bioquímicas. A metabolômica está inserida no contexto das "ômicas", que teve início na "Era Genômica", a qual permitiu a identificação de diversos genes. Em seguida, o interesse dos pesquisadores centrou no estudo dos metabólitos (metabolômica) mostrando ser uma ferramenta valiosa na pesquisa do transplante renal, que exige um tratamento medicamentoso por meio de imunossupressores. A combinação destes imunossupressores pode minimizar a rejeição do órgão transplantado, reforçando a necessidade de um estudo metabolômico, a fim de avaliar e comparar as mudanças ocorridas após o transplante em nível molecular, melhorando o conhecimento sobre a influência destes regimes e dando subsídios sobre prognósticos possíveis na área de transplante renal. Nesta tese foram avaliadas 2 terapias: Everolimo/ Prednisona/Tacrolimo (grupo 1) e Micofenolato mofetil/Prednisona/Tacrolimo (grupo 2) a partir de uma abordagem untargeted. No presente trabalho foram coletadas amostras de urina de pacientes ao longo de 6 meses. Foi necessário determinar a melhor condição para análise das amostras de urina dos pacientes. Desta forma, foram realizados estudos sobre alguns parâmetros que impactam no preparo de amostra abordando a influência da urease, tipos e proporção de solventes para precipitação de proteína, seleção do melhor agente derivatizante e tratamento de dados. A avaliação da medida de qualidade dos tratamentos com urease foi feita a partir do desvio padrão relativo (RSD) dos valores de intensidade de pico. A concentração de 10 mg mL-1 apresentou o melhor resultado. O estudo mostrou também que o teor de ureia na urina pode influenciar na identificação dos compostos. O número de compostos identificados foi menor quando a urina não foi tratada com urease, com aproximadamente 10 compostos a menos em relação à amostra tratada com a enzima, na mesma concentração de ureia adicionada. Dos solventes orgânicos testados para precipitação de proteínas nas amostras de urina, o isopropanol mostrou ser o solvente mais adequado na proporção 1:6 urina:solvente (v/v), utilizando-se 100 µL de urina. Foram testados dois protocolos de derivatização para análises por GC-MS: metoximação e sililação utilizando BSTFA e cloroformiato de metila. A comparação mostrou que o procedimento por BSTFA, com 40 metabólitos identificados, foi superior ao cloroformiato de metila, com 13 compostos identificados. No tratamento de dados com o software XCMS, os seguintes parâmetros foram avaliados: largura a meia altura do pico (fwhm), largura da banda (bw) e threshold (sntresh). Para avaliar a melhor combinação destes parâmetros, foi feita uma variação univariada destes valores. A qualidade do resultado de cada combinação foi monitorada pelos valores gerados de número de missing values, quantidade de picos com RSD <15% e número de valores duplicados. Os valores ótimos foram obtidos para a combinação: fwhm=4, bw=2 e threshold=5. A abordagem do estudo dos dois grupos de pacientes baseou-se inicialmente na comparação entre o dia 7 da terapia com os demais períodos (dia 14, mês 1, mês 3 e mês 6) e posteriormente avaliou-se a evolução temporal. A partir do mês 3 os valores de correlação e predição dos modelos de PLS-DA são melhores e já é eficaz na diferenciação entre os dois grupos. Foram observadas perturbações no metabolismo de carboidratos em ambos os grupos, como açúcares, glicerol e N-acetil-D-manosamina. No grupo 1, foram observados metabólitos discriminantes da classe dos poliois e das vias do ciclo do ácido cítrico e degradação de xenobióticos, enquanto que, no grupo 2, foi observada alteração do hidroxibutirato, um corpo cetônico. Neste grupo, foi observado também um aumento do ácido hipúrico, ácido acetamido butírico, ácido benzoico, entre outros. Nesta tese foi possível demonstrar que a metabolômica é uma ferramenta importante para comparar metabólitos discriminantes entre dois regimes imunossupressores, sendo um estudo piloto que visa fornecer subsídios para avaliação da influência destas terapias no prognóstico de transplante renal

The improvement of analytical techniques enabled the emergence of metabolomics, which aims to compare the metabolites involved in biochemical pathways, in certain biological conditions. Metabolomics is inserted in the "omics" context, which began in the "Genomic Age", and allowed the identification of several genes. After that, the researchers focused on the study of metabolites. Among several applications, metabolomics can be a valuable tool in renal transplant research, which requires a drug treatment through immunosuppressants. The combination of these immunosuppressants can minimize toxicity and rejection of the transplanted organ, reinforcing the need for a metabolomic study, in order to evaluate and compare changes after transplantation at the molecular level, improving knowledge about the influence of these regimens and giving subsidies on prognosis in the area of renal transplantation. In this thesis two immunosuppressive therapies were evaluated by an untargeted approach: Everolimus/Prednisone/Tacrolimus (group 1) and Mycophenolate mofetil/Prednisone/Tacrolimus (group 2). In this study, urine samples were collected from patients over 6 months. It was necessary to determine the best condition for analysis of patients' urine samples. Thus, studies were carried out on some parameters that impact on sample preparation, evaluating the influence of urease, types and proportion of solvents for protein precipitation, selection of the best derivatizing agent, and data treatment. The evaluation of the quality measure of the urease treatments was made from the relative standard deviation (RSD) of the peak intensity values. The concentration of 10 mg mL-1 presented the best result. The study also showed that urine urea content may influence the identification of the compounds. The number of identified compounds was lower when urine was not treated with urease, with approximately 10 compounds less than the enzyme-treated sample, at the same concentration of urea added. In the evaluation of the organic solvents tested for protein precipitation in the urine samples, isopropanol was the most suitable solvent in the ratio 1: 6 urine:solvent (v/v), using 100 µL of urine. Two derivatization protocols were tested for GC-MS analysis: metoximation and silylation with BSTFA and methyl chloroformate. The comparison between the two derivatization protocols showed that the BSTFA procedure, with 40 identified metabolites, was superior to methyl chloroformate with 13 compounds identified. In data processing with the XCMS software, the following parameters were evaluated: full width at half maximum of the peak (fwhm), bandwidth (bw) and threshold (sntresh). To evaluate the best combination of these parameters, a univariate variation of these values was made. The quality of the result of each combination was monitored by the number of missing values, number of peaks with RSD <15%, and number of duplicate values. The optimal values were obtained for the combination: fwhm=4, bw=2 and threshold =5. The study of the two groups of patients was initially based on the comparison between day 7 of the therapy with the other periods (day 14, month 1, month 3 and month 6) and later the temporal evolution was evaluated. From month 3 the values of correlation and prediction of the PLS-DA models are better and already effective in the differentiation between the two groups. Disorders in carbohydrate metabolism were observed in both groups with sugars and glycerol and N-acetyl-D-mannosamine as discriminant metabolites. In group 1, discriminant metabolites of the class of polyols and citric acid cycle pathways and degradation of xenobiotics were observed, and in group 2 alteration of hydroxybutyrate, a ketone body, was observed. In this group an increase of hippuric acid, acetamido butyric acid, benzoic acid, among others, was also observed. In this thesis it was possible to demonstrate that metabolomics is an important tool to compare discriminant metabolites between two immunosuppressive regimens, being a pilot study that aims to provide future subsidies to evaluate the influence of these therapies on the renal transplant prognosis

'Patient blood management' en cirugía ortopédica / 'Patient blood management' in orthopaedic surgery

Los procedimientos de cirugía ortopédica y traumatológica (COT) pueden ocasionar pérdidas significativas de sangre y anemia postoperatoria aguda, que en muchos casos requiere transfusión de sangre alogénica (TSA). Las desventajas clínicas, económicas y logísticas de la TSA han promovido el desarrollo de programas multidisciplinares y multimodales, genéricamente conocidos como programas de Patient Blood Management (PBM), cuyo objetivo es el de reducir o eliminar la necesidad de TSA y mejorar el resultado clínico. Estos programas se apoyan en la aplicación de cuatro grupos de medidas perioperatorias: 1) uso de criterios restrictivos de transfusión; 2) estimulación de la eritropoyesis; 3) reducción del sangrado; y 4) transfusión de sangre autóloga. En este artículo, revisamos la eficacia, seguridad y recomendaciones de las estrategias aplicables en COT, así como los condicionantes para el desarrollo e implementación de los programas de PBM en esta especialidad (AU)

Orthopaedic and trauma surgical procedures (OTS) can lead to significant blood losses and acute postoperative anaemia, which in many cases requires allogeneic blood transfusions (ABT). The clinical, economic and logistical disadvantages of ABT have promoted the development of multidisciplinary and multimodal programs generically known as Patient Blood Management (PBM) programs, which have as their objective to reduce or eliminate the need for ABT and improve clinical outcomes. These programs are supported by the implementation of four groups of perioperative measures: (1) use of restrictive transfusion criteria; (2) stimulation of erythropoiesis; (3) reduction of bleeding; and (4) autologous blood transfusion. In this article, a review is presented of the effectiveness, safety and recommendations of applicable strategies in OTS, as well as the barriers and requirements to the development and implementation of PBM programs in this surgical specialty (AU)

Manual de normas y procedimientos para la toma de muestras y su envío al Laboratorio Nacional de Salud / Manual of standards and procedures for taking samples and sending them to the National Health Laboratory

"Este manual tiene el objetivo de dar a conocer el procedimiento para la toma, almacenamiento y transporte de muestras al LNS así como los conceptos básicos de Bioseguridad. Es de utilidad para personal de laboratorio, enfermería, epidemiología, clínicos y otros que intervienen en este proceso." Incluye un correo electrónico y número telefónico para cualquier consulta en relación al tema. Contiene además, las definiciones de los conceptos relacionados al tema principal, además de la infraestructura que deberá tener el transporte de muestras, incluidos el equipo y el manejo de las mismas. Especifica procedimiento para la toma de muestras de varias enfermedades, entre ellas: Rotavirus, Enfermedad diarreica aguda de etiología bacteriana, Cólera, Fiebre Tifoidea, Hepatitis A, B o C, Dengue, Chikungunya, entre muchas más. En los anexos, incluye los códigos geográficos departamentales y municipales (como herramienta para la identificación de personas con VHI) También contiene en la sección de anexos, una lista de "Laboratorios que realizan cultivos de microbacterias" en el país. Además incluye "Fichas epidemiológicas" de distintas enfermedades

Utilidad del análisis modal de fallos y efectos para la detección de errores en el transporte de muestras al laboratorio clínico / Modal failure analysis and effects in the detection of errors in the transport of samples to the clinical laboratory

Objetivo. Debido a un descenso en la concentración del parámetro bioquímico glucosa en algunas muestras procedentes de los centros externos de extracción y el riesgo para la seguridad del paciente que supone, se decidió aplicar una adaptación de la herramienta «Análisis Modal de Fallos y Efectos Aplicada a los Servicios de Salud» (HFMEA) para la gestión del riesgo en la fase preanalítica del transporte de muestras desde centros externos al laboratorio clínico. Material y métodos. Estudio retrospectivo de los valores del parámetro bioquímico glucosa, durante 2 meses consecutivos. Análisis en sus diferentes fases: identificación del problema, formación de equipo, descripción gráfica del proceso, análisis de riesgos, diseño de la intervención e indicadores y responsables para la implementación. Resultados. Los resultados del parámetro glucosa en una de las rutas de transporte fueron significativamente inferiores (p = 0,006). Se analizaron los fallos y las causas potenciales de este problema. Se aplicaron criterios de criticidad y detectabilidad (puntuación ≥ 8) en el árbol de decisión y se decidió intervenir en: el desarrollo del sistema gestor documental, la reorganización de las extracciones en algunos centros y rutas de transporte, los acumuladores de frío de los contenedores de muestra, y el control de tiempos y temperaturas de transporte. Conclusiones. Para la etapa preanalítica, se proponen indicadores de calidad para el control de tiempo y temperatura de las muestras transportadas. La revisión periódica de determinados parámetros analíticos puede ayudar a detectar problemas en el transporte de muestras. La técnica HFMEA es de gran utilidad para el laboratorio clínico (AU)

Objective. Owing to the decrease in values of biochemical glucose parameter in some samples from external extraction centres, and the risk this implies to patient safety; it was decided to apply an adaptation of the «Health Services Failure Mode and Effects Analysis» (HFMEA) to manage risk during the pre-analytical phase of sample transportation from external centres to clinical laboratories. Materials and methods. A retrospective study of glucose parameter was conducted during two consecutive months. The analysis was performed in its different phases: to define the HFMEA topic, assemble the team, graphically describe the process, conduct a hazard analysis, design the intervention and indicators, and identify a person to be responsible for ensuring completion of each action. Results. The results of glucose parameter in one of the transport routes, were significantly lower (P = .006). The errors and potential causes of this problem were analysed, and criteria of criticality and detectability were applied (score ≥ 8) in the decision tree. It was decided to: develop a document management system; reorganise extractions and transport routes in some centres; quality control of the sample container ice-packs, and the time and temperature during transportation. Conclusions. This work proposes quality indicators for controlling time and temperature of transported samples in the pre-analytical phase. Periodic review of certain laboratory parameters can help to detect problems in transporting samples. The HFMEA technique is useful for the clinical laboratory (AU)

Vitrificación de embriones y transferencia en ciclo posterior como estrategia segura y eficiente en pacientes altas respondedoras / No disponible

OBJETIVO: El objetivo de este estudio retrospectivo fue comparar el impacto de dos estrategias de maduración ovocitaria en un grupo de pacientes alta respondedoras con riesgo de hiperestimulación ovárica. MATERIAL Y MÉTODOS: La pauta de estimulación empleada, basada en el empleo concomitante de la hormona folículo estimulante (FSHr) (75 IU) y la gonadotropina menopaúsica humana (hMG-HP) (75 IU), consistió en un protocolo corto con antagonistas de la hormona liberadora de gonadotropinas (GnRH) en combinación con dos pautas de maduración ovocitaria: administración de un bolo de agonista de la GnRH (aGnRH) (n=37) seguida de la criopreservación de embriones y transferencia embrionaria en ciclo posterior o de gonadotropina coriónica humana (hCG) (n=49) y transferencia embrionaria en fresco. RESULTADOS: Los resultados obtenidos fueron comparables para la tasa de fecundación siendo significativamente superior en el grupo donde se administró el aGnRH como inductor de la ovulación (739/888 [83,2%] vs. 441/618 [71,3%], p < 0,05). No se obtuvieron diferencias significativas para las tasas de implantación (35/100 [35%] vs. 41/127 [32,3%]) o embarazo clínico (30/36 [83,3%] vs. 32/41 [78%]). CONCLUSIÓN: La estrategia conseguida al combinar la administración de un bolo de aGnRH con la vitrificación programada de embriones ofrece una alternativa segura y eficiente para evitar la hiperestimulación ovárica sin restar posibilidades de embarazo. La inducción de la maduración ovocitaria con agonistas de la GnRH en pacientes con alta respuesta consigue la obtención de un mayor número de embriones para realizar una transferencia embrionaria sin comprometer el estado clínico de la paciente ni los resultados del ciclo

OBJECTIVE: The aim of this retrospective study was to compare the impact of two strategies for oocyte maturation in a group of high responders at risk of ovarian hyperstimulation. MATERIALS AND METHODS: The stimulation based on a concomitant administration of recombinant follicle stimulating hormone (rFSH) (75 UI) and human menopausal gonadotrophin (hMG-HP) (75 UI), was arranged as a gonadotrophin releasing hormone (GnRH) antagonist short protocol combined with two different approaches of final oocyte maturation: GnRH agonist triggering (aGnRH) and embryo transfer in a later non stimulated cycle (n=37) or human chorionic gonadotropin (hCG) followed by fresh embryo transfer (n=49). RESULTS: The fertilization rate resulted significantly higher when aGnRH was used as ovulation inducer (739/888 [83.2%] vs. 441/618 [71.3%], p <0.05). No differences between the subgroups were detected in terms of cumulative implantation (35/100 [35%] vs. 41/127 [32.3%]) and clinical pregnancy rates (30/36 [83.3%] vs. 32/41 [78%]). CONCLUSION: The strategy achieved by combining the administration of a single bolus of aGnRH with elective vitrification of all embryos offers a safe and efficient alternative to avoid the risk of ovarian hyperstimulation without decreasing the chances of pregnancy. The induction of oocyte maturation with GnRH agonists in high responders provides a high number of embryos to be transferred without compromising the clinical condition of the patient and reproductive outcome

Estabilidad de 27 magnitudes bioquímicas en muestras de suero conservadas en refrigeración / Stability of 27 biochemical parameters in serum samples stored in the refrigerator

Introducción: Para asegurar la fiabilidad de los resultados de las magnitudes bioquímicas en muestras conservadas durante varios días, se aconseja realizar estudios de estabilidad según las condiciones de conservación empleadas. Con el presente estudio queremos conocer los límites de estabilidad de 27 magnitudes bioquímicas bajo las condiciones de conservación utilizadas en nuestro laboratorio. Material y métodos: Se recogieron 20 muestras de suero en tubos con gel separador y se conservaron a 4 ◦C. Las magnitudes bioquímicas se midieron 2 veces al día, con un intervalo de 6 h, durante 5 días. El cambio de concentración de las magnitudes a cada uno de los tiempos (Xt) respecto al valor inicial (X0) se expresó como cambio porcentual (Xt%) = (Xt/X0)*100 y se calculó la media de dicho cambio (Xmt%). La estabilidad se evaluó según 3 criterios. Criterio metrológico según la variación analítica interdía (CVa), por el que la Xmt% no podría superar al cambio significativo mínimo (CSM = ±1,65*CVa). Criterio biológico basado en la variación biológica intraindividual (CVb), por el que la Xmt% no podría superar al cambio significativo deseable (CSD = ±0,5*CVb). Y criterio combinado de ambos, por el que la Xmt% no podría superar el límite de cambio total (LCT = ± √ (1,65*CVa)2 + (0,5*CVb)2). Resultados: Veinte magnitudes se consideraron no estables según CSM y 14 según CSD. Al final del estudio, 9 magnitudes se consideraron no estables según el criterio LCT. Conclusión: Los criterios CSM y CSD resultan demasiados restrictivos. La combinación de ambos se ajusta más a las necesidades de nuestro laboratorio. Cada laboratorio debería estudiar la estabilidad de sus muestras con sus propias condiciones de conservación (AU)

Introduction: To ensure the reliability of the results of biochemical parameters in samples stored for several days, it is advisable to carry out stability studies according to the storage conditions employed. The limits of stability of 27 biochemical parameters under the storage conditions used in our laboratory were determined. Material and method: Twenty samples were collected in serum tubes with gel separator and stored at 4◦C. The biochemical parameters were measured twice daily at an interval of 6 h for5 days. The change in the concentration of parameters at each of the times (Xt) compared to the initial value (X0) was expressed as a percentage change (Xt%) = (Xt/X0)*100 and the mean percentage change (Xmt%) was calculated. The stability was evaluated according to 3 criteria. Metrology criteria according to within-day analytical variation (CVa), by which Xmt % could not exceed the minimum significant change (MSC = ±1.65*CVa). Biological criteria based on intra-individual biological variation (CVb), by which Xmt % could not exceed the desirable significant change (DSC = ±0.5*CVb). And the criteria based on the combination of both, by which Xmt % could not exceed the total limit of change (TLC = ±√ (1.65*CVa) 2+ (0.5*CVb)2). Results: The 20 parameters were considered stable according to MSC and 14 were according to DSC. In the end, nine parameters were considered stable according to the TLC criteria. Conclusion: MSC and DSC criteria are too restrictive. The TLC criteria is better suited to the needs of our laboratory. Each laboratory should investigate the stability of samples with their own storage conditions (AU)