Schistosomiasis.

Schistosomiasis (bilharzia) is a neglected tropical disease caused by parasitic flatworms (blood flukes) of the genus Schistosoma, with considerable morbidity in parts of the Middle East, South America, Southeast Asia and, particularly, in sub-Saharan Africa. Infective larvae grow in an intermediate host (fresh-water snails) before penetrating the skin of the definitive human host. Mature adult worms reside in the mesenteric (Schistosoma mansoni and Schistosoma japonicum) or pelvic (Schistosoma haematobium) veins, where female worms lay eggs, which are secreted in stool or urine. Eggs trapped in the surrounding tissues and organs, such as the liver and bladder, cause inflammatory immune responses (including granulomas) that result in intestinal, hepato-splenic or urogenital disease. Diagnosis requires the detection of eggs in excreta or worm antigens in the serum, and sensitive, rapid, point-of-care tests for populations living in endemic areas are needed. The anti-schistosomal drug praziquantel is safe and efficacious against adult worms of all the six Schistosoma spp. infecting humans; however, it does not prevent reinfection and the emergence of drug resistance is a concern. Schistosomiasis elimination will require a multifaceted approach, including: treatment; snail control; information, education and communication; improved water, sanitation and hygiene; accurate diagnostics; and surveillance-response systems that are readily tailored to social-ecological settings.

Synthesis and bioactivities of two multiple antigen peptides as potential vaccine against schistosoma.

Based on the two antigenic peptides, 26-43 (P26) and 116-131 (P116), derived from 28 kDa glutathione S-transferase of Schistosoma mansoni (Sm28GST), two multiple antigenic peptides (MAPs), (P26)4-MAP and (P116)4-MAP with the same oligomeric lysine core, were synthesized by stepwise solid-phase peptide synthesis method. The antigenicities and protective effects of these two MAPs were examined on experimental animals. As shown in the dot-ELISA result, the synthetic MAPs could be recognized and bound by immunoglobins in both patient's and infected-rabbit's sera. After Kunming mice were immunized with (P26)4-MAP, the worm burden reduction rate and the liver egg reduction rate were 59.9% and 61.1%. In (P26)4-MAP or (P116)4-MAP immunized BALB/c mice, the worm burden reduction rates were 37.5% and 62.5%, respectively, and the liver egg reduction rates were 35.1% and 54.0%, respectively.

Identificação de proteínas de superfície e secretadas e caracterização de uma nova proteína de membrana do Schistosoma mansoni / Identification of surface proteins and secreted and characterization of a new membrane protein of Schistosoma mansoni

A resposta imune de humanos infectados com helmintos é direcionada a várias proteínas, inclusive aquelas secretadas ou de superfície, principalmente devido a localização no parasito que vive em contato direto com o sangue permitindo uma interação direta com componentes do sistema imune do hospedeiro. Embora várias proteínas expressas no tegumento do Schistosoma mansoni já têrem sido descritas e muitas seqüências de RNAm estarem depositadas em bancos de dados de domínio público, pouco se conhece sobre o papel das proteínas de superfície ou secretadas na biologia do parasito e na interação com o sistema imune do hospedeiro. Neste estudo predizemos proteínas secretadas e de superfície depositadas no banco de dados de proteínas da Rede ONSA/SP através dos programas de bioinformática e caracterizamos uma nova proteína de superfície do S. mansoni. A partir das 26.228 seqüências de proteínas analisadas pelos programas SignalP e Phobius observamos que 10,5 porcento foram anotadas como transmembranas, ancoradas ou secretadas e metade dessas proteínas (55,3 porcento) foi identificada por mais de um programa, reforçando a hipótese que pelo menos 5,81 porcento destas proteínas são possivelmente secretadas ou de superfície. A partir de anotações manuais observamos que a maioria das proteínas é transmembrana intracelular e extracelular (25,0 porcento e 22,1 porcento respectivamente) e apenas um pequeno número foi classificado como secretadas (6,0 porcento), presentes no retículo endoplasmático ou golgi (1,8 porcento) e ancoradas (1,7 porcento). Entretanto, o número de proteínas, com peptídeo sinal, identificadas em nossa análise, pode estar subestimado, pois as seqüências usadas em nosso estudo foram geradas por Orestes. Quando comparamos os modelos utilizados, observamos que o Phobius Transmembrana foi o programa que mais classificou corretamente as proteínas (62,1 porcento) tendo como a maioria das falso-positivas as proteínas intracelulares (40,1 porcento). O SignalP Modelo Markov (MM) foi o programa que mais classificou corretamente proteínas secretadas (17,3 porcento) quando comparado com o Modelo de Rede Neural (9,3 porcento) e Phobius secretada (15,3 porcento), sendo o programa mais sensível par identificação de peptídeo sinal. Entretanto, a maioria das proteínas falso-positivas classificadas pelo SignalP (MM) foram as proteínas transmembrana extra (30,2 porcento) e intracelulares (28,8 porcento). A partir de ferramentas de bioinformática para identificação de proteínas de superfície e o estudo e utilizando imunolocalização identificamos uma nova proteína do S. mansoni, Sm262 que parece ser um receptor com papel na via de sinalização e desenvolvimento do parasito.

Identificação de proteínas de superfície e secretadas e caracterização de uma nova proteína de membrana do Schistosoma mansoni

A resposta imune de humanos infectados com helmintos é direcionada a várias proteínas, inclusive aquelas secretadas ou de superfície, principalmente devido a localização no parasito que vive em contato direto com o sangue permitindo uma interação direta com componentes do sistema imune do hospedeiro. Embora várias proteínas expressas no tegumento do Schistosoma mansoni já têrem sido descritas e muitas seqüências de RNAm estarem depositadas em bancos de dados de domínio público, pouco se conhece sobre o papel das proteínas de superfície ou secretadas na biologia do parasito e na interação com o sistema imune do hospedeiro. Neste estudo predizemos proteínas secretadas e de superfície depositadas no banco de dados de proteínas da Rede ONSA/SP através dos programas de bioinformática e caracterizamos uma nova proteína de superfície do S. mansoni. A partir das 26.228 seqüências de proteínas analisadas pelos programas SignalP e Phobius observamos que 10,5 porcento foram anotadas como transmembranas, ancoradas ou secretadas e metade dessas proteínas (55,3 porcento) foi identificada por mais de um programa, reforçando a hipótese que pelo menos 5,81 porcento destas proteínas são possivelmente secretadas ou de superfície

A partir de anotações manuais observamos que a maioria das proteínas é transmembrana intracelular e extracelular (25,0 porcento e 22,1 porcento respectivamente) e apenas um pequeno número foi classificado como secretadas (6,0 porcento), presentes no retículo endoplasmático ou golgi (1,8 porcento) e ancoradas (1,7 porcento). Entretanto, o número de proteínas, com peptídeo sinal, identificadas em nossa análise, pode estar subestimado, pois as seqüências usadas em nosso estudo foram geradas por Orestes. Quando comparamos os modelos utilizados, observamos que o Phobius Transmembrana foi o programa que mais classificou corretamente as proteínas (62,1 porcento) tendo como a maioria das falso-positivas as proteínas intracelulares (40,1 porcento). O SignalP Modelo Markov (MM) foi o programa que mais classificou corretamente proteínas secretadas (17,3 porcento) quando comparado com o Modelo de Rede Neural (9,3 porcento) e Phobius secretada (15,3 porcento), sendo o programa mais sensível par identificação de peptídeo sinal. Entretanto, a maioria das proteínas falso-positivas classificadas pelo SignalP (MM) foram as proteínas transmembrana extra (30,2 porcento) e intracelulares (28,8 porcento). A partir de ferramentas de bioinformática para identificação de proteínas de superfície e o estudo e utilizando imunolocalização identificamos uma nova proteína do S. mansoni, Sm262 que parece ser um receptor com papel na via de sinalização e desenvolvimento do parasito

ATP-Difosfohidrolase do tegumento do schistosoma mansoni: caracterização e localização / ATP-diphosphohydrolase from Schistosoma mansoni tegument: characterization and localization

Nesta tese caracterizamos uma nova enzima na superfície do tegumento do Schistosma mansoni, uma ATP difosfohidrolase. Controles apropriados mostraram que as atividades ATPásica, ADPásica, pirofosfatásica e adenilato quinásica possivelmente contaminantes não são significativamente importantes. Foi mostrado também dependência para íons divalentes e um provável mecanismo de hidrólise sequencial. Experimentos anticorpos com sugerem que sua massa molecular esteja em torno de 50 KDa. É uma ecto-enzima, foi o que comprovado citoquímica por em microscopia eletrônica e pela capacidade do esquistossomo de hidrolisar ATP ou ADP adicionados no lado externo de vermes intactos. Parece ser sintetizada pelo próprio verme, já que esquistossômulos obtidos in vitro apresentaram atividades ATPásica ADPásica e nas condições mesmas usadas para medidas tegumento de vermes adultos. Esta ecto-enzima pode estar envolvida nos mecanismos de escape do parasita ao sistema hemostático e/ou imune do hospedeiro, bloqueando os sistemas que usam ADP e/ou ATP como intermediários.