In silico prospecting of the mtDNA of Macrobrachium amazonicum from transcriptome data.

BACKGROUND: Macrobrachium amazonicum is a freshwater prawn widely distributed in South America that is undergoing speciation, so the denomination "M. amazonicum complex" is used for it. The mitochondrial cytochrome c oxidase subunit I (COI) gene has been used to elucidate this speciation, but heteroplasmies and pseudogenes have been recorded, making separation difficult. Obtaining genes from cDNA (RNA) rather than genomic DNA is an effective tool to mitigate those two types of occurrences. The aim of this study was to assemble in silico the mitochondrial DNA (mtDNA) of the Amazonian coastal population of M. amazonicum inhabiting the state of Pará. RESULTS: Sequences were obtained from the prawn's transcriptome using the de novo approach. Six libraries of cDNA from the androgen gland, hepatopancreas, and muscle tissue were used. The mtDNA of M. amazonicum was 14,960 bp in length. It contained 13 protein-coding genes, 21 complete transfer RNAs, and the 12S and 16S subunits of ribosomal RNA. All regions were found on the light strand except tRNAGln, which was on the heavy strand. The control region (D-loop) was not recovered, making for a gap of 793 bp. The cladogram showed the formation of the well-defined Macrobrachium clade, with high support value in the established branches (91-100). The three-dimensional spatial conformation of the mtDNA-encoded proteins showed that most of them were mainly composed of major α-helices that typically shows in those proteins inserted in the membrane (mitochondrial). CONCLUSIONS: It was possible to assemble a large part of the mitochondrial genome of M. amazonicum in silico using data from other genomes deposited in GenBank and to validate it through the similarities between its COI and 16S genes and those from animals of the same region deposited in GenBank. Depositing the M. amazonicum mtDNA sequences in GenBank may help solve the taxonomic problems recorded for the species, in addition to providing complete sequences of candidate coding genes for use as biomarkers in ecological studies.

Digestibilidad aparente de materia seca, proteína y carbohidratos de la dieta con ensilado biológico de harina de maíz en Cryphiops (C.) caementarius / Apparent digestibility of dry matter, protein and carbohydrate of the diet with biological corn meal silage in Cryphiops (C.) caementarius

Resumen El objetivo del estudio fue determinar la digestibilidad aparente de la materia seca, proteína y carbohidratos de la dieta con ensilado biológico de harina de maíz en Cryphiops (C.) caementarius. Camarones adultos (4.50 a 7.20 cm de longitud total), se colectaron del río Pativilca (Lima, Perú) y en laboratorio se mantuvieron en recipientes individuales instalados dentro de seis acuarios (cuatro camarones por acuario). La dieta control fue sin ensilado y para la dieta experimental se reemplazó el 75% de la harina de maíz por el ensilado biológico de harina de maíz; ambas dietas tuvieron 1% de óxido crómico como marcador inerte. Los camarones fueron alimentados dos veces por día (40% a las 08:00 h y 60% a las 18:00 h) con el 6% del peso húmedo, durante 10 días. Para la colección de heces, los camarones fueron trasladados a un sistema de caja cribada (12 compartimentos) instalada dentro de un acuario. La digestibilidad aparente se determinó en base seca. Los camarones alimentados con la dieta con ensilado biológico de harina de maíz tuvieron altos coeficientes de digestibilidad aparente de carbohidratos (95.69%), proteína cruda (80.02%) y materia seca (76.19%), que aquellos alimentados con la dieta sin ensilado (p<0.05) que fue de 93.48, 78.21 y 74.36%, respectivamente. Los camarones adultos digieren con eficiencia los carbohidratos de la dieta con ensilado biológico de harina de maíz, en vez de la proteína de dicha dieta.

Abstract The aim of this study was to determine the apparent digestibility of dry matter, protein and carbohydrates of the diet with biological corn meal silage in Cryphiops (C.) caementarius. Adult prawn (4.50 to 7.20 cm total length) was collected from the Pativilca river (Lima, Peru) and in the laboratory each shrimp was kept in individual containers set up in six aquaria (four prawn per aquarium). The experimental diet was supplemented with corn meal biological silage and the control diet was without silage; both diets had 1% chromic oxide. Each diet had three replicates. Prawn was fed twice a day (40% at 08:00 h and 60% at 18:00 h) at 6% of wet weight for 10 days. For feces collection, the prawn was transferred to a system of sieved boxes (12 compartments) installed inside an aquarium. Apparent digestibility was determined on a dry basis. Prawn fed the diet with corn meal biological silage had higher apparent digestibility coefficient for carbohydrates (95.69%), crude protein (80.02%) and dry matter (76.19%) than those fed the diet without silage (p<0.05), which was 93.48, 78.21 and 74.36%, respectively. The adult prawn digested efficiently the carbohydrates of the corn meal biological silage diet, instead of the protein of this diet.

Natural diet of Macrobrachium brasiliense (Crustacea, Decapoda) in a Cerrado stream / Dieta natural de Macrobrachium brasiliense (Crustacea, Decapoda) em um córrego de Cerrado

Knowledge about the diet of a given species is essential to provide information on the growth and maintenance of populations in a natural environment. Macrobrachium brasiliense (Heller, 1862) is a species of freshwater prawn widely distributed in Brazil, being frequent in aquatic environments inserted in the Cerrado biome. The aim of this study was to evaluate the natural diet of a population of M. brasiliense, comparing the consumed food items according to sex, seasonality and body size of individuals. Monthly collections were carried out between September 2018 and August 2019. The individuals collected had their sex identified and the length of the cephalothorax measured. Stomach content was assessed based on the degree of repletion, the method of points and the frequency of occurrence. There was a high frequency of plant material in the stomach contents and a smaller but significant frequency of aquatic insects. There were no significant differences regarding the diet of males and females and between the dry and rainy seasons. It was observed an increase in total insect consumption with the increase in size of males and females of M. brasiliense. A diet preference for Trichoptera was recorded in both sampling periods for males and females. The results obtained confirm an omnivorous diet for the species and suggest that the composition and proportion of items may vary depending on the size of the individuals and the availability of the items in the environment.(AU)

O conhecimento acerca da dieta de uma determinada espécie é essencial para fornecer informações sobre o crescimento e manutenção das populações em ambiente natural. Macrobrachium brasiliense (Heller, 1862) é uma espécie de camarão de água doce com ampla distribuição no Brasil, ocorrendo frequentemente em ambientes aquáticos inseridos no bioma Cerrado. O objetivo deste estudo foi avaliar a dieta natural de uma população de M. brasiliense, comparando os itens alimentares consumidos em função do sexo, sazonalidade e tamanho corporal dos indivíduos. Foram realizadas coletas mensais entre setembro de 2018 a agosto de 2019. Os indivíduos coletados tiveram seu sexo identificado e o comprimento do cefalotórax mensurado. O conteúdo estomacal foi avaliado a partir do grau de repleção, método de pontos e de frequência de ocorrência. Verificou-se elevada frequência de detrito vegetal no conteúdo estomacal e uma frequência menor de insetos aquáticos, porém significativa. Não houve diferenças significativas quanto à dieta de machos e fêmeas e entre as estações seca e chuvosa. Foi observado um aumento do consumo total de insetos com aumento de tamanho de machos e fêmeas de M. brasiliense. Uma preferência de dieta por Trichoptera foi registrada em ambos os períodos de amostragem para machos e fêmeas.Os resultados obtidos confirmam uma dieta onívora para a espécie e sugerem que a composição e a proporção de itens podem variar em função do tamanho dos indivíduos e da disponibilidade dos itens no ambiente.(AU)

Natural diet of Macrobrachium brasiliense (Crustacea, Decapoda) in a Cerrado stream / Dieta natural de Macrobrachium brasiliense (Crustacea, Decapoda) em um córrego de Cerrado

Knowledge about the diet of a given species is essential to provide information on the growth and maintenance of populations in a natural environment. Macrobrachium brasiliense (Heller, 1862) is a species of freshwater prawn widely distributed in Brazil, being frequent in aquatic environments inserted in the Cerrado biome. The aim of this study was to evaluate the natural diet of a population of M. brasiliense, comparing the consumed food items according to sex, seasonality and body size of individuals. Monthly collections were carried out between September 2018 and August 2019. The individuals collected had their sex identified and the length of the cephalothorax measured. Stomach content was assessed based on the degree of repletion, the method of points and the frequency of occurrence. There was a high frequency of plant material in the stomach contents and a smaller but significant frequency of aquatic insects. There were no significant differences regarding the diet of males and females and between the dry and rainy seasons. It was observed an increase in total insect consumption with the increase in size of males and females of M. brasiliense. A diet preference for Trichoptera was recorded in both sampling periods for males and females. The results obtained confirm an omnivorous diet for the species and suggest that the composition and proportion of items may vary depending on the size of the individuals and the availability of the items in the environment.

O conhecimento acerca da dieta de uma determinada espécie é essencial para fornecer informações sobre o crescimento e manutenção das populações em ambiente natural. Macrobrachium brasiliense (Heller, 1862) é uma espécie de camarão de água doce com ampla distribuição no Brasil, ocorrendo frequentemente em ambientes aquáticos inseridos no bioma Cerrado. O objetivo deste estudo foi avaliar a dieta natural de uma população de M. brasiliense, comparando os itens alimentares consumidos em função do sexo, sazonalidade e tamanho corporal dos indivíduos. Foram realizadas coletas mensais entre setembro de 2018 a agosto de 2019. Os indivíduos coletados tiveram seu sexo identificado e o comprimento do cefalotórax mensurado. O conteúdo estomacal foi avaliado a partir do grau de repleção, método de pontos e de frequência de ocorrência. Verificou-se elevada frequência de detrito vegetal no conteúdo estomacal e uma frequência menor de insetos aquáticos, porém significativa. Não houve diferenças significativas quanto à dieta de machos e fêmeas e entre as estações seca e chuvosa. Foi observado um aumento do consumo total de insetos com aumento de tamanho de machos e fêmeas de M. brasiliense. Uma preferência de dieta por Trichoptera foi registrada em ambos os períodos de amostragem para machos e fêmeas.Os resultados obtidos confirmam uma dieta onívora para a espécie e sugerem que a composição e a proporção de itens podem variar em função do tamanho dos indivíduos e da disponibilidade dos itens no ambiente.

Natural diet of Macrobrachium brasiliense (Crustacea, Decapoda) in a Cerrado stream

ABSTRACT Knowledge about the diet of a given species is essential to provide information on the growth and maintenance of populations in a natural environment. Macrobrachium brasiliense (Heller, 1862) is a species of freshwater prawn widely distributed in Brazil, being frequent in aquatic environments inserted in the Cerrado biome. The aim of this study was to evaluate the natural diet of a population of M. brasiliense, comparing the consumed food items according to sex, seasonality and body size of individuals. Monthly collections were carried out between September 2018 and August 2019. The individuals collected had their sex identified and the length of the cephalothorax measured. Stomach content was assessed based on the degree of repletion, the method of points and the frequency of occurrence. There was a high frequency of plant material in the stomach contents and a smaller but significant frequency of aquatic insects. There were no significant differences regarding the diet of males and females and between the dry and rainy seasons. It was observed an increase in total insect consumption with the increase in size of males and females of M. brasiliense. A diet preference for Trichoptera was recorded in both sampling periods for males and females. The results obtained confirm an omnivorous diet for the species and suggest that the composition and proportion of items may vary depending on the size of the individuals and the availability of the items in the environment.

RESUMO O conhecimento acerca da dieta de uma determinada espécie é essencial para fornecer informações sobre o crescimento e manutenção das populações em ambiente natural. Macrobrachium brasiliense (Heller, 1862) é uma espécie de camarão de água doce com ampla distribuição no Brasil, ocorrendo frequentemente em ambientes aquáticos inseridos no bioma Cerrado. O objetivo deste estudo foi avaliar a dieta natural de uma população de M. brasiliense, comparando os itens alimentares consumidos em função do sexo, sazonalidade e tamanho corporal dos indivíduos. Foram realizadas coletas mensais entre setembro de 2018 a agosto de 2019. Os indivíduos coletados tiveram seu sexo identificado e o comprimento do cefalotórax mensurado. O conteúdo estomacal foi avaliado a partir do grau de repleção, método de pontos e de frequência de ocorrência. Verificou-se elevada frequência de detrito vegetal no conteúdo estomacal e uma frequência menor de insetos aquáticos, porém significativa. Não houve diferenças significativas quanto à dieta de machos e fêmeas e entre as estações seca e chuvosa. Foi observado um aumento do consumo total de insetos com aumento de tamanho de machos e fêmeas de M. brasiliense. Uma preferência de dieta por Trichoptera foi registrada em ambos os períodos de amostragem para machos e fêmeas.Os resultados obtidos confirmam uma dieta onívora para a espécie e sugerem que a composição e a proporção de itens podem variar em função do tamanho dos indivíduos e da disponibilidade dos itens no ambiente.

Trabajos originales Preferencia termal de machos adultos de Cryphiops caementarius previamente aclimatados a diferen- tes temperaturas / Thermal preference of adult males of Cryphiops caementarius previously acclimated at different temperatures

Resumen El objetivo fue determinar la preferencia termal de machos adultos de Cryphiops caementarius previamente aclimatados a diferentes temperaturas. Los camarones se colectaron del río Pativilca. En laboratorio, los camarones se aclimataron durante 30 días en nueve acuarios, cada uno con 10 recipientes circulares. En cada recipiente hubo un camarón (10 por acuario). Las temperaturas de aclimatación fueron de 19, 24 y 28 °C. El sistema de gradiente de temperatura (12 a 33 °C) fue una canaleta de PVC (3 m de longitud y 10 cm de profundidad) con 18 compartimentos. En un extremo de la canaleta se colocaron termorreguladores sumergibles (100W) y en el otro extremo, bolsas con hidrogel congeladas. La preferencia termal se determinó por el método agudo y las pruebas se realizaron entre las 08:00 y 14:00 h. Los camarones aclimatados a 24 °C se desplazaron a compartimentos cuyas temperaturas fueron más altas que la temperatura de aclimatación. Los camarones aclimatados a 24 °C se desplazaron a compartimentos cuyas temperaturas fueron alrededor de la temperatura de aclimatación. Los camarones aclimatados a 28 °C se desplazaron a compartimentos donde las temperaturas fueron más bajas que aquella de aclimatación. La preferencia termal de los camarones aclimatados a 19 °C fue de 22.7 °C, y la de los aclimatados a 24 °C fue de 24.8 °C, ambos sin diferencias significativas (p>0.05). En cambio, en los aclimatados a 28°C fue de 21.1 °C, que solo difirió (p<0.05) con los aclimatados a 19 °C. La preferencia termal final fue de 24.5 °C.

Abstract In this work, we establish the thermal preference of Cryphiops caementarius adult males, previously acclimated at different temperatures. Shrimp were collected from the Pativilca River. In the laboratory, shrimp were acclimated for 30 days in nine aquariums, each with 10 circular containers. In each container, there was a shrimp (10 per aquarium). Acclimation temperatures were 19, 24 and 28 °C. The gradient temperature system (12 to 33 °C) consisted for a PVC gutter (3 m long and 10 cm deep) with 18 compartments. Submersible thermoregulators (100W) were placed at one end of the gutter and the other end, frozen hydrogel bags. The thermal preference was determined by the acute method and the tests were performed between 08:00 and 14:00 h. Shrimp acclimated at 24 °C moved to compartments whose temperatures were higher than the acclimation temperature. Shrimp acclimated at 24 °C moved to compartments whose temperatures were around the acclimation temperature. Shrimp acclimated at 28 °C moved to compartments where temperatures were lower than acclimation. The thermal preference of acclimated shrimp at 19 °C was 22.7 °C, and those acclimated at 24 °C were 24.8 °C, both without significant differences (p>0.05). On the other hand, in acclimated ones at 28 °C it was 21.1 °C, which only differed (p<0.05) with those acclimated at 19 °C. The final thermal preference was 24.5 °C.

Influence of environmental variables on seasonal abundance and relative growth of Macrobrachium amazonicum (Crustacea: Decapoda: Caridea): variations of a continental population / Influência de variáveis ambientais na abundância sazonal e crescimento relativo de Macrobrachium amazonicum (Crustacea: Decapoda: Caridea): variações de uma população continental

The aim of the present study was to evaluate the influence of abiotic factors (conductivity, dissolved oxygen, pH, precipitation, and water temperature) on the abundance of Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862), as well as to compare the relative growth among demographic groups throughout the seasons in a lagoon system located in the municipality of Perdões, Minas Gerais. Monthly, from August/2013 to July/2014, the prawns were collected on macrophytes of the genus Eichhornia using a semi-circular sieve. In the laboratory, the specimens were categorized into juveniles, males, ovigerous females and non-ovigerous females, and measured as total length (TL), carapace length (CL), and abdomen length (AL). The predominance of juveniles was evident, representing 74.4%, followed by 16.7% males, 2.8% ovigerous females and 6.1% non-ovigerous females. The total abundance and the abundance of juveniles, males, and females were negatively correlated with conductivity. [...] The highest abundance of juveniles can be related to its occurrence in microhabitats that provide refuge, as Eichhornia. Despite some similar characteristics here observed in relation to the other populations throughout its distribution, as the high number of juveniles and the smaller size of males compared to females, the present study provides information that expands the knowledge on the plasticity of M. amazonicum, considering the sampled local - a lateral lagoon system. The obtained results promote the comprehension of the vast occurrence of the species and its adaptations to each specific environment, contributing to the elaboration of conservation and management guidelines for M. amazonicum and for the environment where it inhabits.(AU)

O objetivo do presente estudo foi avaliar a influência de fatores abióticos (condutividade, oxigênio dissolvido, pH, precipitação e temperatura da água) na abundância de Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862), bem como comparar o crescimento relativo entre as categorias demográficas ao longo das estações do ano, em uma lagoa marginal localizada no município de Perdões, em Minas Gerais. Os camarões foram coletados mensalmente, de agosto de 2013 a julho de 2014, em macrófitas do gênero Eichhornia com o uso de uma peneira semicircular. [...] A abundância total e a abundância de juvenis, machos e fêmeas foram correlacionadas negativamente com a condutividade. O crescimento relativo do CT e CA, em relação ao CC, foi diferente para juvenis, machos e fêmeas ao longo de todo ano, exceto durante o verão (para CT e CA) e o outono (para CA), quando o mesmo padrão foi observado para as três categorias demográficas (p>0,05), possivelmente devido à maior abundância de indivíduos jovens obtida durante estas estações. Esta maior abundância de juvenis pode estar relacionada à sua ocorrência em microhabitats que forneçam refúgio como Eichhornia. Apesar de algumas características semelhantes aqui observadas em relação às demais populações ao longo de sua distribuição geográfica, como o elevado número de juvenis e o menor tamanho dos machos em comparação às fêmeas, o presente estudo fornece informações que ampliam o conhecimento sobre a plasticidade de M. amazonicum, principalmente com relação ao local de amostragem - uma lagoa marginal. Desta forma, os resultados obtidos ampliam a compreensão sobre a vasta ocorrência da espécie e suas respectivas adaptações nos mais variados habitats, contribuindo para a elaboração de diretrizes de conservação e manejo para M. amazonicum e para o meio que habita.(AU)

Influence of environmental variables on seasonal abundance and relative growth of Macrobrachium amazonicum (Crustacea: Decapoda: Caridea): variations of a continental population

The aim of the present study was to evaluate the influence of abiotic factors (conductivity, dissolved oxygen, pH, precipitation, and water temperature) on the abundance of Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862), as well as to compare the relative growth among demographic groups throughout the seasons in a lagoon system located in the municipality of Perdões, Minas Gerais. Monthly, from August/2013 to July/2014, the prawns were collected on macrophytes of the genus Eichhornia using a semi-circular sieve. In the laboratory, the specimens were categorized into juveniles, males, ovigerous females and non-ovigerous females, and measured as total length (TL), carapace length (CL), and abdomen length (AL). The predominance of juveniles was evident, representing 74.4%, followed by 16.7% males, 2.8% ovigerous females and 6.1% non-ovigerous females. The total abundance and the abundance of juveniles, males, and females were negatively correlated with conductivity. The relative growth of TL and AL, in relation to CL, was different for juveniles, males and females thought the year, except during summer (for TL and AL) and autumn (for AL), when the same pattern was observed for the three demographic categories (p>0.05), possibly due to the highest abundance of juvenile individuals obtained in these seasons. The highest abundance of juveniles can be related to its occurrence in microhabitats that provide refuge, as Eichhornia. Despite some similar characteristics here observed in relation to the other populations throughout its distribution, as the high number of juveniles and the smaller size of males compared to females, the present study provides information that expands the knowledge on the plasticity of M. amazonicum, considering the sampled local - a lateral lagoon system. The obtained results promote the comprehension of the vast occurrence of the species and its adaptations to each specific environment, contributing to the elaboration of conservation and management guidelines for M. amazonicum and for the environment where it inhabits.(AU)

O objetivo do presente estudo foi avaliar a influência de fatores abióticos (condutividade, oxigênio dissolvido, pH, precipitação e temperatura da água) na abundância de Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862), bem como comparar o crescimento relativo entre as categorias demográficas ao longo das estações do ano, em uma lagoa marginal localizada no município de Perdões, em Minas Gerais. Os camarões foram coletados mensalmente, de agosto de 2013 a julho de 2014, em macrófitas do gênero Eichhornia com o uso de uma peneira semicircular. No laboratório, os espécimes foram categorizados em juvenis, machos, fêmeas e fêmeas ovígeras, e medidos quanto ao comprimento total (CT), comprimento da carapaça (CC) e comprimento do abdome (CA). O predomínio de juvenis foi evidente, representando 74,4%, seguido por 16,7% machos, 6,1% fêmeas e 2,8% fêmeas ovígeras. A abundância total e a abundância de juvenis, machos e fêmeas foram correlacionadas negativamente com a condutividade. O crescimento relativo do CT e CA, em relação ao CC, foi diferente para juvenis, machos e fêmeas ao longo de todo ano, exceto durante o verão (para CT e CA) e o outono (para CA), quando o mesmo padrão foi observado para as três categorias demográficas (p>0,05), possivelmente devido à maior abundância de indivíduos jovens obtida durante estas estações. Esta maior abundância de juvenis pode estar relacionada à sua ocorrência em microhabitats que forneçam refúgio como Eichhornia. Apesar de algumas características semelhantes aqui observadas em relação às demais populações ao longo de sua distribuição geográfica, como o elevado número de juvenis e o menor tamanho dos machos em comparação às fêmeas, o presente estudo fornece informações que ampliam o conhecimento sobre a plasticidade de M. amazonicum, principalmente com relação ao local de amostragem - uma lagoa marginal. Desta forma, os resultados obtidos ampliam a compreensão sobre a vasta ocorrência da espécie e suas respectivas adaptações nos mais variados habitats, contribuindo para a elaboração de diretrizes de conservação e manejo para M. amazonicum e para o meio que habita.(AU)

Influence of environmental variables on seasonal abundance and relative growth of Macrobrachium amazonicum (Crustacea: Decapoda: Caridea): variations of a continental population

The aim of the present study was to evaluate the influence of abiotic factors (conductivity, dissolved oxygen, pH, precipitation, and water temperature) on the abundance of Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862), as well as to compare the relative growth among demographic groups throughout the seasons in a lagoon system located in the municipality of Perdões, Minas Gerais. Monthly, from August/2013 to July/2014, the prawns were collected on macrophytes of the genus Eichhornia using a semi-circular sieve. In the laboratory, the specimens were categorized into juveniles, males, ovigerous females and non-ovigerous females, and measured as total length (TL), carapace length (CL), and abdomen length (AL). The predominance of juveniles was evident, representing 74.4%, followed by 16.7% males, 2.8% ovigerous females and 6.1% non-ovigerous females. The total abundance and the abundance of juveniles, males, and females were negatively correlated with conductivity. The relative growth of TL and AL, in relation to CL, was different for juveniles, males and females thought the year, except during summer (for TL and AL) and autumn (for AL), when the same pattern was observed for the three demographic categories (p>0.05), possibly due to the highest abundance of juvenile individuals obtained in these seasons. The highest abundance of juveniles can be related to its occurrence in microhabitats that provide refuge, as Eichhornia. Despite some similar characteristics here observed in relation to the other populations throughout its distribution, as the high number of juveniles and the smaller size of males compared to females, the present study provides information that expands the knowledge on the plasticity of M. amazonicum, considering the sampled local - a lateral lagoon system. The obtained results promote the comprehension of the vast occurrence of the species and its adaptations to each specific environment, contributing to the elaboration of conservation and management guidelines for M. amazonicum and for the environment where it inhabits.

O objetivo do presente estudo foi avaliar a influência de fatores abióticos (condutividade, oxigênio dissolvido, pH, precipitação e temperatura da água) na abundância de Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862), bem como comparar o crescimento relativo entre as categorias demográficas ao longo das estações do ano, em uma lagoa marginal localizada no município de Perdões, em Minas Gerais. Os camarões foram coletados mensalmente, de agosto de 2013 a julho de 2014, em macrófitas do gênero Eichhornia com o uso de uma peneira semicircular. No laboratório, os espécimes foram categorizados em juvenis, machos, fêmeas e fêmeas ovígeras, e medidos quanto ao comprimento total (CT), comprimento da carapaça (CC) e comprimento do abdome (CA). O predomínio de juvenis foi evidente, representando 74,4%, seguido por 16,7% machos, 6,1% fêmeas e 2,8% fêmeas ovígeras. A abundância total e a abundância de juvenis, machos e fêmeas foram correlacionadas negativamente com a condutividade. O crescimento relativo do CT e CA, em relação ao CC, foi diferente para juvenis, machos e fêmeas ao longo de todo ano, exceto durante o verão (para CT e CA) e o outono (para CA), quando o mesmo padrão foi observado para as três categorias demográficas (p>0,05), possivelmente devido à maior abundância de indivíduos jovens obtida durante estas estações. Esta maior abundância de juvenis pode estar relacionada à sua ocorrência em microhabitats que forneçam refúgio como Eichhornia. Apesar de algumas características semelhantes aqui observadas em relação às demais populações ao longo de sua distribuição geográfica, como o elevado número de juvenis e o menor tamanho dos machos em comparação às fêmeas, o presente estudo fornece informações que ampliam o conhecimento sobre a plasticidade de M. amazonicum, principalmente com relação ao local de amostragem - uma lagoa marginal. Desta forma, os resultados obtidos ampliam a compreensão sobre a vasta ocorrência da espécie e suas respectivas adaptações nos mais variados habitats, contribuindo para a elaboração de diretrizes de conservação e manejo para M. amazonicum e para o meio que habita.

Influence of environmental variables on seasonal abundance and relative growth of Macrobrachium amazonicum (Crustacea: Decapoda: Caridea): variations of a continental population

ABSTRACT The aim of the present study was to evaluate the influence of abiotic factors (conductivity, dissolved oxygen, pH, precipitation, and water temperature) on the abundance of Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862), as well as to compare the relative growth among demographic groups throughout the seasons in a lagoon system located in the municipality of Perdões, Minas Gerais. Monthly, from August/2013 to July/2014, the prawns were collected on macrophytes of the genus Eichhornia using a semi-circular sieve. In the laboratory, the specimens were categorized into juveniles, males, ovigerous females and non-ovigerous females, and measured as total length (TL), carapace length (CL), and abdomen length (AL). The predominance of juveniles was evident, representing 74.4%, followed by 16.7% males, 2.8% ovigerous females and 6.1% non-ovigerous females. The total abundance and the abundance of juveniles, males, and females were negatively correlated with conductivity. The relative growth of TL and AL, in relation to CL, was different for juveniles, males and females thought the year, except during summer (for TL and AL) and autumn (for AL), when the same pattern was observed for the three demographic categories (p>0.05), possibly due to the highest abundance of juvenile individuals obtained in these seasons. The highest abundance of juveniles can be related to its occurrence in microhabitats that provide refuge, as Eichhornia. Despite some similar characteristics here observed in relation to the other populations throughout its distribution, as the high number of juveniles and the smaller size of males compared to females, the present study provides information that expands the knowledge on the plasticity of M. amazonicum, considering the sampled local - a lateral lagoon system. The obtained results promote the comprehension of the vast occurrence of the species and its adaptations to each specific environment, contributing to the elaboration of conservation and management guidelines for M. amazonicum and for the environment where it inhabits.

RESUMO O objetivo do presente estudo foi avaliar a influência de fatores abióticos (condutividade, oxigênio dissolvido, pH, precipitação e temperatura da água) na abundância de Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862), bem como comparar o crescimento relativo entre as categorias demográficas ao longo das estações do ano, em uma lagoa marginal localizada no município de Perdões, em Minas Gerais. Os camarões foram coletados mensalmente, de agosto de 2013 a julho de 2014, em macrófitas do gênero Eichhornia com o uso de uma peneira semicircular. No laboratório, os espécimes foram categorizados em juvenis, machos, fêmeas e fêmeas ovígeras, e medidos quanto ao comprimento total (CT), comprimento da carapaça (CC) e comprimento do abdome (CA). O predomínio de juvenis foi evidente, representando 74,4%, seguido por 16,7% machos, 6,1% fêmeas e 2,8% fêmeas ovígeras. A abundância total e a abundância de juvenis, machos e fêmeas foram correlacionadas negativamente com a condutividade. O crescimento relativo do CT e CA, em relação ao CC, foi diferente para juvenis, machos e fêmeas ao longo de todo ano, exceto durante o verão (para CT e CA) e o outono (para CA), quando o mesmo padrão foi observado para as três categorias demográficas (p>0,05), possivelmente devido à maior abundância de indivíduos jovens obtida durante estas estações. Esta maior abundância de juvenis pode estar relacionada à sua ocorrência em microhabitats que forneçam refúgio como Eichhornia. Apesar de algumas características semelhantes aqui observadas em relação às demais populações ao longo de sua distribuição geográfica, como o elevado número de juvenis e o menor tamanho dos machos em comparação às fêmeas, o presente estudo fornece informações que ampliam o conhecimento sobre a plasticidade de M. amazonicum, principalmente com relação ao local de amostragem - uma lagoa marginal. Desta forma, os resultados obtidos ampliam a compreensão sobre a vasta ocorrência da espécie e suas respectivas adaptações nos mais variados habitats, contribuindo para a elaboração de diretrizes de conservação e manejo para M. amazonicum e para o meio que habita.

Histological alterations in gills of Macrobrachium amazonicum juveniles exposed to ammonia and nitrite.

Aquaculture has shown great growth in the last decades. Due to the restrictions on water use, production systems are becoming increasingly more intensive, raising concerns about the production water quality. Macrobrachium amazonicum is among the freshwater prawn species with favorable characteristics for production and possibility of intensification. Nitrogen compounds such as ammonia and nitrite affect the health of aquatic organisms since they quickly reach toxic concentrations. These compounds can also cause damage to the gill structure, leading to hypoxia in tissues, affecting acid-base balance, osmoregulation (salt absorption) and ammonia excretion, decreasing the immune capacity of the animal and, in extreme cases, cause death. The aim of this study was to assess histological changes in the gills of Macrobrachium amazonicum juveniles subjected to different concentrations of total ammonia and nitrite. The prawns were subjected to different concentrations of those compounds and their gills were removed and preserved for histological analysis. The gills were assessed for changes according to the Organ Index (Iorg) and, for each change, an importance factor (w) was attributed according to the degree of reversibility and applied according to the degree of extension or frequency of the damage. The damage to the gills in the treatments with 100% mortality, both for ammonia and nitrite, corresponded to the high occurrence of progressive, regressive, circulatory, and inflammation damages. The other treatments (which caused less mortality) had mainly inflammation and regressive damages, whose occurrence increased according to the increase in ammonia and nitrite concentration. The histological analysis confirmed that the higher the total ammonia and nitrite concentrations, the larger the damages caused to the gill structure and that lower nitrite concentrations caused similar damages to those caused by higher total ammonia concentrations, which reflects the lower capacity M. amazonicum has to tolerate nitrite.

Acute Toxicity of Nitrite to Various Life Stages of the Amazon River Prawn, Macrobrachium amazonicum, Heller, 1862.

This study determined the effects of nitrite on different life stages of the Amazon river prawn Macrobrachium amazonicum. Prawns of each life stage (postlarvae, juveniles and adults) were stocked in 24 experimental units (n = 10 prawns), under a complete randomized design. Individuals were exposed to nitrite (0, 1, 2, 4, 8 and 16 mg L-1). The median lethal concentration after 96 h (96 h LC50) was calculated through the Weibull I. The mortality results showed that M. amazonicum is slightly less tolerant to nitrite than other species of Macrobrachium. The 96 h LC50 for postlarvae, juveniles and adults of M. amazonicum were of 1.49, 2.36 and 2.34 mg nitrite/L, respectively. Nitrite intoxication risk quotient suggest moderated risk to low risk to the species. Usually in production systems nitrite values are lower than safe levels suggested in this study (0.1 mg L-1 to postlarvae and 0.2 mg L-1 nitrite to juvenile and adults), which makes our results appropriate for the production of this species.

Relationship between the coastal origin of the freshwater prawn Macrobrachium amazonicum and salinity levels in the hatchery / Relação entre a origem costeira de Macrobrachium amazonicum e o nível de salinidade na larvicultura

In the culture of crustacean larvae, the best survival rates are observed at optimal salinity due to the lower expenditure of energy for osmoregulation. In optimal conditions, greater longevity is expected under conditions of complete starvation. In the present study, larvae were obtained from ovigerous females of the freshwater prawn Macrobrachium amazonicum captured in two distinct regions of the Amazon coast of Pará, representing Amazonian várzea (Abaetetuba) and estuarine (Bragança) habitats. The larvae were maintained under starvation conditions, and from the zoea I to the zoea VII stages, they were exposed to salinities of 0, 2, 5, 10, 20 and 30 ppt. Based on the results of these trials, the larvae (100 larvae/L) were then reared in a dynamic closed system in 2L tanks at salinities of 5, 10 and 20 ppt, being fed with Artemia nauplii. In the larvae captured in estuarine habitats, longevity was greatest at a salinity of 10 ppt (12.00±0.79 days) and lowest in freshwater (6.77±3.47 days). In the várzea larvae, longevity was greatest at salinities of 2 (10.33±1.97 days), 5 (10.80±2.07 days) and 10 ppt (10.23±1.07 days). Other important differences were observed between the two groups of larvae. None of the estuarine larvae molted to the PL stage in freshwater and productivity was greatly reduced (43.2±7.8 PL/L) at a salinity of 5 ppt. By contrast, the várzea larvae developed into post-larvae (PL) normally in freshwater and could be reared at salinity 5 ppt with no loss of productivity. This permitted the minimization of management costs.(AU)

No cultivo das larvas de crustáceos maiores sobrevivências são observados nas salinidades ideais devido ao menor gasto energético com a osmorregulação. Em ótimas condições, é esperado maior longevidade destas sob completa inanição. No presente estudo, larvas foram obtidas de fêmeas ovígeras do camarão de água doce Macrobrachium amazonicum, capturadas de duas regiões costeiras da Amazônia: várzea (Abaetetuba/PA) e estuarina (Bragança/PA). As larvas foram mantidas em inanição a partir de zoea I e zoea VII e foram submetidas às salinidades 0, 2, 5, 10, 20 e 30 ppt,. Baseado nos resultados obtidos, as larvas (100 larvas/L) foram então cultivadas em sistema fechado dinâmico, em tanques com volume de 2L, nas salinidades: 5, 10, 20 ppt e alimentadas com náuplios de Artemia. Maiores longevidades foram observadas nas larvas de origem estuarina nas salinidade 10 (12,00 ± 0,79 dias) e menor em água doce (6,77 ± 3,47 dias). No entanto, melhores resultados foram registrados nas salinidades 2 (10,33 ± 1,97 dias), 5 (10,80 ± 2,07 dias) e 10 ppt (10,23 ± 1,07 dias) para as larvas de várzea. Relevante diferenças foram observadas quando comparados os dois cultivos:  as larvas de estuário não chegam a PL em água doce e apresentam redução da produtividade na salinidade 5 ppt (43,2 ± 7,8 PL/L) enquanto que as larvas de várzea atingem normalmente pós-larvas em água doce podendo ser cultivadas em salinidade 5ppt sem perda de produtividade, reduzindo assim os custos do manejo.(AU)

Relationship between the coastal origin of the freshwater prawn Macrobrachium amazonicum and salinity levels in the hatchery / Relação entre a origem costeira de Macrobrachium amazonicum e o nível de salinidade na larvicultura

In the culture of crustacean larvae, the best survival rates are observed at optimal salinity due to the lower expenditure of energy for osmoregulation. In optimal conditions, greater longevity is expected under conditions of complete starvation. In the present study, larvae were obtained from ovigerous females of the freshwater prawn Macrobrachium amazonicum captured in two distinct regions of the Amazon coast of Pará, representing Amazonian várzea (Abaetetuba) and estuarine (Bragança) habitats. The larvae were maintained under starvation conditions, and from the zoea I to the zoea VII stages, they were exposed to salinities of 0, 2, 5, 10, 20 and 30 ppt. Based on the results of these trials, the larvae (100 larvae/L) were then reared in a dynamic closed system in 2L tanks at salinities of 5, 10 and 20 ppt, being fed with Artemia nauplii. In the larvae captured in estuarine habitats, longevity was greatest at a salinity of 10 ppt (12.00±0.79 days) and lowest in freshwater (6.77±3.47 days). In the várzea larvae, longevity was greatest at salinities of 2 (10.33±1.97 days), 5 (10.80±2.07 days) and 10 ppt (10.23±1.07 days). Other important differences were observed between the two groups of larvae. None of the estuarine larvae molted to the PL stage in freshwater and productivity was greatly reduced (43.2±7.8 PL/L) at a salinity of 5 ppt. By contrast, the várzea larvae developed into post-larvae (PL) normally in freshwater and could be reared at salinity 5 ppt with no loss of productivity. This permitted the minimization of management costs.

No cultivo das larvas de crustáceos maiores sobrevivências são observados nas salinidades ideais devido ao menor gasto energético com a osmorregulação. Em ótimas condições, é esperado maior longevidade destas sob completa inanição. No presente estudo, larvas foram obtidas de fêmeas ovígeras do camarão de água doce Macrobrachium amazonicum, capturadas de duas regiões costeiras da Amazônia: várzea (Abaetetuba/PA) e estuarina (Bragança/PA). As larvas foram mantidas em inanição a partir de zoea I e zoea VII e foram submetidas às salinidades 0, 2, 5, 10, 20 e 30 ppt,. Baseado nos resultados obtidos, as larvas (100 larvas/L) foram então cultivadas em sistema fechado dinâmico, em tanques com volume de 2L, nas salinidades: 5, 10, 20 ppt e alimentadas com náuplios de Artemia. Maiores longevidades foram observadas nas larvas de origem estuarina nas salinidade 10 (12,00 ± 0,79 dias) e menor em água doce (6,77 ± 3,47 dias). No entanto, melhores resultados foram registrados nas salinidades 2 (10,33 ± 1,97 dias), 5 (10,80 ± 2,07 dias) e 10 ppt (10,23 ± 1,07 dias) para as larvas de várzea. Relevante diferenças foram observadas quando comparados os dois cultivos:  as larvas de estuário não chegam a PL em água doce e apresentam redução da produtividade na salinidade 5 ppt (43,2 ± 7,8 PL/L) enquanto que as larvas de várzea atingem normalmente pós-larvas em água doce podendo ser cultivadas em salinidade 5ppt sem perda de produtividade, reduzindo assim os custos do manejo.

Exploring developmental gene toolkit and associated pathways in a potential new model crustacean using transcriptomic analysis.

The crustaceans are one of the largest, most diverse, and most successful groups of invertebrates. The diversity among the crustaceans is also reflected in embryonic development models. However, the molecular genetics that regulates embryonic development is not known in those crustaceans that have a short germ-band development with superficial cleavage, such as Macrobrachium olfersi. This species is a freshwater decapod and has great potential to become a model for developmental biology, as well as for evolutionary and environmental studies. To obtain sequence data of M. olfersi from an embryonic developmental perspective, we performed de novo assembly and annotation of the embryonic transcriptome. Using a pooling strategy of total RNA, paired-end Illumina sequencing, and assembly with multiple k-mers, a total of 25,636,097 pair reads were generated. In total, 99,751 unigenes were identified, and 20,893 of these returned a Blastx hit. KEGG pathway analysis mapped a total of 6866 unigenes related to 129 metabolic pathways. In general, 21,845 unigenes were assigned to gene ontology (GO) categories: molecular function (19,604), cellular components (10,254), and biological processes (13,841). Of these, 2142 unigenes were assigned to the developmental process category. More specifically, a total of 35 homologs of embryonic development toolkit genes were identified, which included maternal effect (one gene), gap (six), pair-rule (six), segment polarity (seven), Hox (four), Wnt (eight), and dorsoventral patterning genes (three). In addition, genes of developmental pathways were found, including TGF-ß, Wnt, Notch, MAPK, Hedgehog, Jak-STAT, VEGF, and ecdysteroid-inducible nuclear receptors. RT-PCR analysis of eight genes related to embryonic development from gastrulation to late morphogenesis/organogenesis confirmed the applicability of the transcriptome analysis.

Development and functional morphology of the mouthparts and foregut in larvae and post-larvae of Macrobrachium jelskii (Decapoda: Palaemonidae).

The morphology of the mouthparts and foregut of the larvae and post-larvae of Macrobrachium jelskii was investigated to determine their functional roles in feeding, in order to understand the larval feeding behaviour and the changes that occur during its development. The mouthparts and foregut of the zoea I and II are morphologically similar, rudimentary and non-functional in feeding. Only in the final larval stage, zoea III, do the external mouthparts and foregut become structurally more complex and thus likely to play a potential role in feeding. Two behavioral trials (point of no return, point of reserve saturation) evaluated the resistance to starvation in zoea I, II, and III. The results indicate that they have sufficient nutritional reserves to permit them to complete metamorphosis without feeding. Overall, our results suggest that the zoea I and II of Macrobrachium jelskii engage in obligate lecithotrophy and zoea III in facultative lecithotrophy.

The effect of three commercial feeds used in aquaculture hatcheries on physiology of the prawn Macrobrachium amazonicum (Decapoda, Palaemonidae) / O efeito de três rações comerciais sobre a fisiologia do camarão Macrobrachium amazonicum (Decapoda, Palaemonidae)

We investigated the effect of three commercial feeds containing 32%, 35% (control), and 38% of crude protein on the physiology (metabolism, ammonia excretion, energy substrate and hepatosomatic index) of Macrobrachium amazonicum. The energetic content and energy/protein ratio of the feeds were quantified. The physiological aspects did not show differences among the animals fed with the three types of feeds concerning metabolism, ammonia excretion and energy substrate, which was kept as a proteins. However, we observed 120% higher hepatosomatic index in the animals fed with 38% of protein. This feed has also higher energetic value (4,700 ± 10.6 kcal kg-1) and an energy/protein ratio (12.2:1). It is possible that these characteristics of the feed have contributed to higher hepatosomatic index. In this sense, the feed containing 38% of protein seems to be more appropriate because it may promote better storage of reserves in the hepatopancreas, a beneficial condition to reproduction and growth.(AU)

Investigou-se o efeito de três diferentes rações comerciais contendo 32%, 35% (controle) e 38% de proteína bruta sobre a fisiologia (metabolismo, excreção de amônia, substrato energético utilizado e índice hepatossomático) do camarão Macrobrachium amazonicum. O conteúdo energético e a relação energia/proteína das rações foram quantificados. Não houve diferenças entre os animais alimentados com os três tipos de rações no que tange ao metabolismo, excreção de amônia e substrato energético utilizado, que se manteve como proteínas. No entanto, foi observado índice hepatossomático 120% maior nos animais alimentados com a ração contendo 38% de proteína bruta. Essa ração também possui maior valor energético (4700 ± 10.6 kcal/kg) e relação energia:proteína de 12.2:1. É possível que essas características da ração possam ter contribuído para um maior índice hepatossomático e, consequentemente, melhor armazenamento de reservas no hepatopâncreas, condição benéfica para a reprodução, crescimento.(AU)

The effect of three commercial feeds used in aquaculture hatcheries on physiology of the prawn Macrobrachium amazonicum (Decapoda, Palaemonidae) / O efeito de três rações comerciais sobre a fisiologia do camarão Macrobrachium amazonicum (Decapoda, Palaemonidae)

We investigated the effect of three commercial feeds containing 32%, 35% (control), and 38% of crude protein on the physiology (metabolism, ammonia excretion, energy substrate and hepatosomatic index) of Macrobrachium amazonicum. The energetic content and energy/protein ratio of the feeds were quantified. The physiological aspects did not show differences among the animals fed with the three types of feeds concerning metabolism, ammonia excretion and energy substrate, which was kept as a proteins. However, we observed 120% higher hepatosomatic index in the animals fed with 38% of protein. This feed has also higher energetic value (4,700 ± 10.6 kcal kg-1) and an energy/protein ratio (12.2:1). It is possible that these characteristics of the feed have contributed to higher hepatosomatic index. In this sense, the feed containing 38% of protein seems to be more appropriate because it may promote better storage of reserves in the hepatopancreas, a beneficial condition to reproduction and growth.

Investigou-se o efeito de três diferentes rações comerciais contendo 32%, 35% (controle) e 38% de proteína bruta sobre a fisiologia (metabolismo, excreção de amônia, substrato energético utilizado e índice hepatossomático) do camarão Macrobrachium amazonicum. O conteúdo energético e a relação energia/proteína das rações foram quantificados. Não houve diferenças entre os animais alimentados com os três tipos de rações no que tange ao metabolismo, excreção de amônia e substrato energético utilizado, que se manteve como proteínas. No entanto, foi observado índice hepatossomático 120% maior nos animais alimentados com a ração contendo 38% de proteína bruta. Essa ração também possui maior valor energético (4700 ± 10.6 kcal/kg) e relação energia:proteína de 12.2:1. É possível que essas características da ração possam ter contribuído para um maior índice hepatossomático e, consequentemente, melhor armazenamento de reservas no hepatopâncreas, condição benéfica para a reprodução, crescimento.

Avaliação do número de ovos em diferentes estágios de desenvolvimento embrionário de Macrobrachium pantanalense / Evaluation of number eggs in Macrobrachium pantanalense in different stages of embryonic development

This work aimed to evaluate the number of eggs in Macrobrachium pantanalense at different stages of embryonic development, since during period of incubation can result on embryos loss. Ovigerous females were collected in the Pantanal Sul Matogrossense and were selected in two size classes: small (29-40 mm) and large (53-64 mm). Twenty females were selected from each class at each stage of embryonic development (I, II and III). The differences between fertility and egg volume in each size class and embryonic development phase were compared using multifactorial analysis of variance. The fecundity of M. pantanalense increases as the size of females. The volume of eggs increased as embryonic development, being one of the reasons for reducing the number of eggs during incubation.(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar o número de ovos de Macrobrachium pantanalense em diferentes estágios de desenvolvimento embrionário, uma vez que durante o período de incubação pode ocorrer a perda de embriões. Fêmeas ovígeras foram coletadas no Pantanal Sul Matogrossense e selecionadas em duas classes de tamanho: pequenas (29-40 mm) e grandes (53-64 mm). Foram selecionadas 20 fêmeas de cada classe nos estágios de desenvolvimento embrionário I, II e III. As diferenças entre o número e volume dos ovos em cada classe de tamanho e fase de desenvolvimento embrionário foram comparadas utilizando análise de variância multifatorial. A fecundidade de M. pantanalense aumentou conforme o tamanho das fêmeas, porém o número de ovos diminuiu no decorrer do período de incubação. O volume dos ovos aumentou conforme o desenvolvimento embrionário, podendo ser um dos motivos da redução do número de ovos durante a incubação.(AU)

Avaliação do número de ovos em diferentes estágios de desenvolvimento embrionário de Macrobrachium pantanalense / Evaluation of number eggs in Macrobrachium pantanalense in different stages of embryonic development

This work aimed to evaluate the number of eggs in Macrobrachium pantanalense at different stages of embryonic development, since during period of incubation can result on embryos loss. Ovigerous females were collected in the Pantanal Sul Matogrossense and were selected in two size classes: small (29-40 mm) and large (53-64 mm). Twenty females were selected from each class at each stage of embryonic development (I, II and III). The differences between fertility and egg volume in each size class and embryonic development phase were compared using multifactorial analysis of variance. The fecundity of M. pantanalense increases as the size of females. The volume of eggs increased as embryonic development, being one of the reasons for reducing the number of eggs during incubation.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o número de ovos de Macrobrachium pantanalense em diferentes estágios de desenvolvimento embrionário, uma vez que durante o período de incubação pode ocorrer a perda de embriões. Fêmeas ovígeras foram coletadas no Pantanal Sul Matogrossense e selecionadas em duas classes de tamanho: pequenas (29-40 mm) e grandes (53-64 mm). Foram selecionadas 20 fêmeas de cada classe nos estágios de desenvolvimento embrionário I, II e III. As diferenças entre o número e volume dos ovos em cada classe de tamanho e fase de desenvolvimento embrionário foram comparadas utilizando análise de variância multifatorial. A fecundidade de M. pantanalense aumentou conforme o tamanho das fêmeas, porém o número de ovos diminuiu no decorrer do período de incubação. O volume dos ovos aumentou conforme o desenvolvimento embrionário, podendo ser um dos motivos da redução do número de ovos durante a incubação.