ABSTRACT
Objetivo: el factor de crecimiento vascular endotelial (VEGF) está expresado en la glía y en las células del epitelio pigmentario de la retina. Citoquinas y factores de crecimiento están asociados con la activacióncelular de función autócrina. La señal proinflamatoria inducida por interleuquina 1 (IL-l) y el estrés oxidativo activan la expresión gen ética de este factor de crecimiento.El objetivo de este trabajo es investigar el efecto de la IL-l y el estrés oxidativo generado por el factor de necrosis tumoral (TNF-a) y el peróxido de hidrógeno (H202) en la expresión del VEGF en células humanas del epitelio pigmen:tario de la retina (ARPE-19).Métodos: las células ARPE-19 son transfectadas por el método DOTAP con el promotor (1,6 kb) VEGF unido a un gen de luciferasa. Despúes de 3 horas de transfección las células fueron lavadas e incubadas porotras 8 a 10 horas antes de agregarles los inductores. Las células fueron incubadas por 6 horas en un medio desprovisto de nutrientes antes de agregarles IL-l ¡3, TNF-a y H2O2, y se incubaron durante 8 horas.La actividad de luciferasa fue medida usando como sustrato a la luciferina. Las células apoptóticas fueron detectadas mediante el uso de un microscópio de fluorescencia confocal usando la tinción Hoechst.Resultados: los resultados obtenidos indican que la IL-l¡3 y el TNF-a aumentan moderadamente la expresión del VEGF en células del ARPE-19. Por otro lado la suma del TNF-a y el H2O2 aumentan considerablemente la expresión del VEGF. La tinción Hoeschst de células transfectadas con el VEGF muestra la apoptósis celular producida por el estrés oxidativo.Conclusiones: diferentes citoquinas y el estrés oxidativo inducen la sobreexpresión del VEGF mediada por diferentes quinasas y factores nucleares en las ARPE-19. Esta expresión puede participar en la apoptosis celular de diferentes patologías retineanas como la retinopatia diabética. El estudio e identificación de esta vía celular puede ser potencialmente útil como blanco...
Subject(s)
Endothelium, Vascular , Pigment Epithelium of Eye , RetinaABSTRACT
Objetivo: el factor de crecimiento vascular endotelial (VEGF) está expresado en la glía y en las células del epitelio pigmentario de la retina. Citoquinas y factores de crecimiento están asociados con la activacióncelular de función autócrina. La señal proinflamatoria inducida por interleuquina 1 (IL-l) y el estrés oxidativo activan la expresión gen ética de este factor de crecimiento.El objetivo de este trabajo es investigar el efecto de la IL-l y el estrés oxidativo generado por el factor de necrosis tumoral (TNF-a) y el peróxido de hidrógeno (H202) en la expresión del VEGF en células humanas del epitelio pigmen:tario de la retina (ARPE-19).Métodos: las células ARPE-19 son transfectadas por el método DOTAP con el promotor (1,6 kb) VEGF unido a un gen de luciferasa. Despúes de 3 horas de transfección las células fueron lavadas e incubadas porotras 8 a 10 horas antes de agregarles los inductores. Las células fueron incubadas por 6 horas en un medio desprovisto de nutrientes antes de agregarles IL-l í3, TNF-a y H2O2, y se incubaron durante 8 horas.La actividad de luciferasa fue medida usando como sustrato a la luciferina. Las células apoptóticas fueron detectadas mediante el uso de un microscópio de fluorescencia confocal usando la tinción Hoechst.Resultados: los resultados obtenidos indican que la IL-lí3 y el TNF-a aumentan moderadamente la expresión del VEGF en células del ARPE-19. Por otro lado la suma del TNF-a y el H2O2 aumentan considerablemente la expresión del VEGF. La tinción Hoeschst de células transfectadas con el VEGF muestra la apoptósis celular producida por el estrés oxidativo.Conclusiones: diferentes citoquinas y el estrés oxidativo inducen la sobreexpresión del VEGF mediada por diferentes quinasas y factores nucleares en las ARPE-19. Esta expresión puede participar en la apoptosis celular de diferentes patologías retineanas como la retinopatia diabética. El estudio e identificación de esta vía celular puede ser potencialmente útil como blanco...(AU)
Subject(s)
Endothelium, Vascular , Pigment Epithelium of Eye , RetinaABSTRACT
Objetivo: el factor de crecimiento vascular endotelial (VEGF) está expresado en la glía y en las células del epitelio pigmentario de la retina. Citoquinas y factores de crecimiento están asociados con la activacióncelular de función autócrina. La señal proinflamatoria inducida por interleuquina 1 (IL-l) y el estrés oxidativo activan la expresión gen ética de este factor de crecimiento.El objetivo de este trabajo es investigar el efecto de la IL-l y el estrés oxidativo generado por el factor de necrosis tumoral (TNF-a) y el peróxido de hidrógeno (H202) en la expresión del VEGF en células humanas del epitelio pigmen:tario de la retina (ARPE-19).Métodos: las células ARPE-19 son transfectadas por el método DOTAP con el promotor (1,6 kb) VEGF unido a un gen de luciferasa. Despúes de 3 horas de transfección las células fueron lavadas e incubadas porotras 8 a 10 horas antes de agregarles los inductores. Las células fueron incubadas por 6 horas en un medio desprovisto de nutrientes antes de agregarles IL-l í3, TNF-a y H2O2, y se incubaron durante 8 horas.La actividad de luciferasa fue medida usando como sustrato a la luciferina. Las células apoptóticas fueron detectadas mediante el uso de un microscópio de fluorescencia confocal usando la tinción Hoechst.Resultados: los resultados obtenidos indican que la IL-lí3 y el TNF-a aumentan moderadamente la expresión del VEGF en células del ARPE-19. Por otro lado la suma del TNF-a y el H2O2 aumentan considerablemente la expresión del VEGF. La tinción Hoeschst de células transfectadas con el VEGF muestra la apoptósis celular producida por el estrés oxidativo.Conclusiones: diferentes citoquinas y el estrés oxidativo inducen la sobreexpresión del VEGF mediada por diferentes quinasas y factores nucleares en las ARPE-19. Esta expresión puede participar en la apoptosis celular de diferentes patologías retineanas como la retinopatia diabética. El estudio e identificación de esta vía celular puede ser potencialmente útil como blanco para el uso de diferentes drogas.(AU)
Subject(s)
Endothelium, Vascular , Pigment Epithelium of Eye , RetinaABSTRACT
Platelet-activating factor (1-O-alky1-2-acetyl-sn-glycero-3-phosphocholine, PAF) is present in brain, is released from neurons in culture and, in hippocampal slices, enhances glutamate release and long-term potentiation (LTP) through an action on membrane receptors sensitive to the antagonist, BN 52021. This led to the proposal that PAF may be a retrograde messenger in the genesis of LTP. LTP has been, in turn, proposed as a mechanism of memory. Male Wistar rats were implanted bilaterally with cannulae aimed at the amygdala and the dorsal hippocampus. After recovery from surgery, the animals were trained in step-down inhibitory avoidance using a 0.5 mA footshock, and tested for retention 24 h later. BN 52021 (0.5 mug) was amnestic when given into the hippocampus or the amygdala either before or immediately after training but not 30 min later. The findings support the idea that memory of this task depends on the generation of LTP at the time of training in hippocampus and amygdala, and further suggest that PAF is involved in the development of this LTP.
Subject(s)
Animals , Male , Rats , Amygdala/drug effects , Platelet Activating Factor/physiology , Hippocampus/drug effects , Lactones/administration & dosage , Memory , Long-Term Potentiation , Synapses , Rats, WistarABSTRACT
Olhos operados de descolamento de retina podem näo recuperar totalmente sua funçäo devido às alteraçöes retinianas secundárias ao descolamento. Para estudar essas alteraçöes, desenvolvemos um modelo experimental de descolamento de retina. Utilizando uma micropipeta conectada a uma seringa plástic com soluçäo salina, descolamentos de retina regmatogênicos foram induzidos em coelhos, através de uma retinotomia e injeçäo da soluçäo no espaço sub-retiniano. Oitenta olhos de quarenta coelhos albinos foram submetidos a este procedimento cirúrgico. Essa técnica mostrou-se segura, eficaz e possibilitou a obtençäo de tecido retiniano adequado para estudos anatômicos, fisiológicos e metabólicos da retina descolada.
Subject(s)
Animals , Rabbits , Male , Female , Retinal Detachment/physiopathology , Retinal Detachment/surgery , Retinal Detachment/rehabilitationABSTRACT
Foram estudados 93 pacientes sendo 59 com uveítes e 34 com patologias oculares, consideradas controles. As amostras de humor aquoso e soro foram analisadas para LTC4 por radioimunoensaio. Os resultados no humor aquoso foram signficantivamente maiores que no soro em todos os pacientes, sugerindo que houve produçäo intra ocular de leucotrienos. Näo houve diferença significativa entre os valores do humor aquoso das uveítes e controles, sugerindo que a produçäo intraocular de LT poderia ser decorrente de estimulaçäo pela paracentese ou entäo as patologias näo inflamatórias também poderiam estimular a síntese dod LTs. Os níveis de LTC4 näo mostraram relaçäo com a etiologias das uveítes. As uveites tiveram comportamento homogênio entre si com relaçäo ao tempo de história e atividade inflamatória. Determinou-se pela primeira vez o conteúdo sérico dos leucotrienos, que se mostrou existir, ao contrário do esperado. Demonstrou-se pela primeira vez que as células inflamatórias do humor aquoso de uveítes humanas säo capazes de produzir LTC4