Proteinograma e concentração sérica de IgG em potros, do nascimento aos trinta dias de vida, tratados com plasma / Proteinogram and serum IgG concentration in newborn foals up to thirty days of life treated with plasma

Este trabalho teve por objetivo avaliar o proteinograma e concentrações séricas de IgG (após a padronização de teste ELISA) em potros do nascimento aos trinta dias de idade, antes e depois de mamarem colostro e serem tratados com plasma por via intravenosa. Foram utilizados 20 potros e suas respectivas mães, além de quatro animais doadores de plasma. Foram colhidas amostras de sangue dos potros em cinco momentos, logo após o nascimento e antes de mamar colostro (M1), dez horas após nascimento (M2), 24 horas após nascimento e previamente administração do plasma sanguíneo (M3), 48 horas de vida e 24 horas após administração do plasma sanguíneo (M4), e 30 dias após nascimento (M5). Foram colhidos sangue e colostro das éguas progenitoras no momento do parto. A concentração de proteína total (PT) e albumina foram determinadas em analisador bioquímico, a concentração de PT também foi avaliada em refratômetro manual. O fracionamento proteico foi realizado utilizando eletroforese em gel de agarose. A densidade do colostro foi avaliada com colostrômetros de refração BRIX e de densidade específica. A concentração de IgG total de todas as amostras foi determinada por teste ELISA. Com o sistema de ELISA aqui proposto foi possível determinar concentrações de IgG em amostras de soro, plasma e colostro equino com adequada repetibilidade. A média ± desvio padrão da concentração sérica de IgG dos potros ao nascer, foi de 15±8mg/dL, com dez horas de vida foi de 2.408±608mg/dL, se manteve em níveis semelhantes até 48 horas (2.364±784mg/dL) e diminuíram significativamente aos 30 dias de vida (1.414±586mg/dL). A concentração sérica e colostral de IgG nas éguas foi de 1.746±505mg/dL e 7.714±2.619mg/dL, respectivamente. A concentração plasmática de IgG dos doadores de plasma foi de 2.026±148mg/dL. Houve correlação positiva entre as concentrações séricas de IgG e PT (r=0,69 para refratômetro e r=0,76 para bioquímico), GT (r=0,81) e gamaglobulina (r=0,85). Dez horas após o nascimento foi possível verificar a transferência de imunidade passiva, possibilitando adotar medidas profiláticas e/ou terapêuticas em haras de criação de cavalos. Considerando que a proteína total, globulinas totais e fração γ-globulina apresentam correlação com IgG, estas determinações são úteis para monitorar os potros após mamarem o colostro. Um litro de plasma administrado às 24 horas de vida não foi suficiente para aumentar as concentrações séricas de IgG, 24 horas após transfusão, em potros com adequada transferência de imunidade passiva.(AU)

The aim of this study was to evaluate serum protein and serum IgG concentrations (after a direct enzyme immunoassay test ELISA optimization) in newborns foals from birth to thirty days of life before and after colostrum consumption and intravenous treatment with plasma. Twenty foals and their respective progenitors as well as four plasma donor's horses were used. Blood samples were obtained from newborn foals at five time points, immediately after birth and before colostrum intake (M1), ten hours after birth (M2), 24 hours after birth and prior administration of blood plasma (M3), 48 hours after birth and 24 hours after plasma administration (M4), and 30 days after birth (M5). Blood and colostrum samples were collected from the progenitor mares immediately postpartum. Concentration of total protein (TP) and albumin were determined using a biochemical analyzer. The TP concentration was also measured by refractometer. Fractions of total serum protein were separated using agarose gel electrophoresis. Colostrum density was evaluated using BRIX refractometer and specific density colostrometer. Total IgG concentration was determined by an enzyme-linked immunosorbent assay. With the ELISA system proposed here it was possible to determine IgG concentrations in serum, plasma, and equine colostrum samples with adequate repeatability. Serum IgG concentration in foals at birth was 15±8mg/dL (mean ± standard deviation) raising at ten hours (2,408±608mg/dL) and remaining at similar levels up to 48 hours of life (2,364±784mg/dL), and decreasing significantly at 30 days of age (1,414±586mg/dL). Serum and colostrum IgG concentrations of mares were 1,746±505mg/dL and 7,714±2,619mg/dL, respectively. The plasma IgG concentrations from donor mares were 2,026±148mg/dL. Total protein, total globulins, and γ-globulin fraction showed correlation with IgG. Ten hours post birth was an adequate time to verify the transfer of passive immunity, allowing to adoption prophylactic and/or therapeutic measures in a horse farms. One liter of plasma administered at 24 hours of life was not sufficient to raise serum IgG concentrations in foals without passive immunity transfer failure.(AU)

Identificación molecular del Gen RhD mediante PCR / Molecular identification of the RhD gene by PCR

Introducción. Con objeto de identificar al gen Rh(D) en sujetos positivo, se elaboró una estrategia basada en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Material y métodos. Se estudiaron a 8 sujetos adultos, identificando el fenotipo del sistema Rh (CcDEe) con técnicas inmunohematológicas. Se extrajo el DNA genómico a partir de leucocitos de sangre periférica y se utilizaron dos iniciadores (24C y R13N) para la amplificación. Este par de iniciadores delimitan las secuencias comunes entre los exones 4 y 5 de los genes RhD y RhCE. Resultados. Inmunológicamente se identificaron cinco sujetos Rh negativo y tres Rh positivo. En la imagen electroforética, se observaron dos patrones de amplificación: uno de dos bandas (de 600 pb y de 1200 pb) y un segundo patrón de una sola banda (de 1200 pb). La banda de 1200 pb se amplificó en los sujetos Rh positivo y negativo (y corresponde al gen RhCE). La banda de 600 pb, sólo se presentó en sujetos Rh positivo (correspondiente al gen RhD). No hubo diferencias entre los resultados inmunohematológicos y el análisis molecular en los diferentes fenotipos. Conclusiones. El empleo de esta estrategia basada en la técnica de PCR, permite la tipificación del gen RhD en los sujetos Rh positivo, con diferentes fenotipos del sistema Rh

Utilidad clínica de la electrforesis de proteínas

El suero humano contiene más de 120 proteínas que pueden ser identificadas bioquímicamente,y separadas y cuantificadas electroforéticamente según sus respectivas características físico-químicas. De acuerdo con las técnicas utilizadas, en la electroforesis de proteínas en acetato de celulosa es posible identificar cinco grupos, a saber: albúmina, a1 globulinas, a2 globulinas, b globulinas y y globulinas. El análisis de la electroforesis de proteínas debe ser cuantitativo y cualitativo. La electroforesis de proteínas no aporta resultados patognomónicos y , en consecuencia, las alteraciones que en ella se encuentren deben ser confirmadas por métodos de mayor sensiblidad y especificidad. Como tal, la prueba es una excelente heramienta de tamización, muy similar al hemograma y al citoquímico de orina en la clínica. Se definen los valores de referencia, las alteraciones más significativas de cada banda electroforética y los principales patrones, en particular aquellos de mayor interés clínico. Por último, se establecen las bases para su adecuada interpretación.

Búsqueda de rotavirus en muestras fecales resuspendidas en medio de transporte utilizado para el diagnóstico bacteriológico / Rotaviruses search in rectal samples placed on transport medium for bacteriological diagnosis

Rutinariamente el diagnóstico de gastroenteritis en niños hospitalizados no incluye la búsqueda de rotavirus como agente causal. Para el examen bacteriológico se utiliza una muestra de hisopo rectal colocada en medio de transporte, la cual podría servir también, para la búsqueda de rotavirus. El objetivo del presente trabajo fue determinar la presencia de rotavirus en 105 muestras de hisopos rectales resuspendidos en medio de transporte de Stuart, provenientes de pacientes menores de 5 años de edad, hospitalizados con un cuadro gastrointestinal en el Hospital General Regional 25 del IMSS. Estas muestras previamente fueron reportadas como negativas para agentes causales de diarrea, a excepción de una, que fue positiva para Vibrio Cholerae. A las 105 Muestras se les realizó la extracción del RNA viral y se analizaron por electroforesis en geles de poliacrilamida al 10 por ciento. Se detectaron 28 positivas para rotavirus, de las cuales 26 presentaron un patrón electroforético de tipo largo y 2 de tipo corto. La distribución de los segmentos de RNA en grupos de 4, 2, 3 y 2 bandas, sugiere que en todos los casos se trata de rotavirus del grupo A. Estos resultados muestran que es posible detectar la presencia de rotavirus, utilizando la misma muestra que se toma para el diagnóstico bacteriológico y que el genoma viral presente en la muestra puede conservarse en congeladores de tipo doméstico por periodos prolongados, lo cual es muy conveniente en la realización de estudios epidemiológicos

Análise electroforética da farinha de trigo sarraceno em comazaçao com a farinha de trigo suave / Electrophoretic analysis of meal of buckwheat in comparison with common wheat flour

A composiçao das proteínas alcool (prolaminas) obtidas das farinhas de trigo suave por dois procedimentos foram analizadas por el electroforense a pH 3,1 e, após disociaçao, na presença de dodecil sulfato de sódio a pH 8,0. Os perfis obtidos da fracâo prolamina do trigo sarraceno muito diferentes tanto qualitativamente como quantitativamente daqueles da prolamina, do trigo suave. Parece, portanto, provável que ofeitos adversos associados com alimentares contendo gliadina de trigo a pacientes celíacos seriam reduzidos e possivelmente evitados se a farinha de trigo fosse substituida pela farinha de trigo sarraceno

Análisis electroforético de extractos de periplaneta australasiae y p. americana / Electrophoretic analysis of periplaneta australasiae and periplaneta americana extracts

Se prepararon extractos proteicos de todo el cuerpo de cucarachas Periplaneta americana y Periplaneta australasiae (Dictyoptera: Blattidae). Las proteínas correspondientes fueron separadas e identificadas mediante electroforesis en geles de poliacrilamida con duodecil sulfato de sodio (SDS-PAGE).Los perfiles proteicos fueron analizados, encontrándose numerosas bandas compartidas y no compartidas en los extractos de cada especie.Lo anterior podría ser la causa de la reactividad cruzada e individual a estas cucarachas mostrada por pruebas cutáneas en pacientes alérgicos a estos extractos.

La electroforesis de proteínas y su aplicación en la clínica

La experiencia clínica de muchos años ha demostrado que la electroforesis de proteínas en suero es una excelente prueba de laboratorio. Son múltiples las entidades en las que tienen gran importancia clínica. Para su adecuada utilización e interpretación se requiere tener conocimientos acerca de su composición, comportamiento y variaciones de acuerdo a cada entidad nosológica. Las publicaciones sobre este tópico son escasas y las revisiones disponibles fueron publicadas hace muchos años. En este artículo se describen las principales fracciones obtenidas en la electroforesis en acetato de celulosa y se establece una correlación con las principales patologías que la modifican. Además, se definen y esquematizan los patrones electroforéticos mas característicos y de mayor ocurrencia clínica.

An improved electrophoretic technique - abstract

A simply electrophoretic apparatus which could be constructed in any laboratory workshop is described. The electrodes are inexpensive and a negligible amount of platinum is used. Using cellulose acetate membrane as supporting medium a run could be completed in less than 3 hours. The apparatus is so designed that microelectrophoresis in agar or starch gel on microscopic glass slides can readily be performed (AU)

Studies on thyroid nodules in Jamaica

Preliminary studies in thyroid weight, incidence of nodules and iodine content at autopsy indicate that in Jamaica, all these parameters are low. Functional studies indicate a low rate of thyroid activity and an apparent border-line iodine deficiency. The low incidence of nodules at autopsy suggests, however, that iodine deficiency is not a major factor in the pathogenesis of goitre in Jamaica. On the other hand, approximately 50 patients are operated on each year at the U.C.H.W.I for non toxic nodular goitre. Studies are therefore being made of the surgically removed thyroid tissue in this group by means of electrophoresis and chromatography of iodinated proteins and amino acids in the hope of uncovering some other pathogenetic factors (AU)

The incidence and clinical effects of abnormal haemoglobin in Jamaica (abstract only)

The mode of inheritance of the genes carrying abnormal haemoglobins is discussed, together with the methods used for their study. Some of our findings in Jamaica during the last nine months are presented. 780 women attending the ante-natal clinic have been investigated by haemoglobin electrophoresis. The incidence of the sickle cell trait is 9.5 per cent and of the haemoglobin C trait 3.4 per cent. In addition two women were found to have unsuspected sickle cell/haemoglobin C disease, and one lady had apparent sickle cell anaemia - she has four healthy children. The clinical features of sickle cell anaemia and other related diseases are discussed. Three cases of Cooley's Anaemia are reported, but the incidence of the Cooley gene is not known. The importance of this gene is stressed, for in conjunction with the S gene a condition - sickle cell/thalassaemia disease - is produced which may be indistinguishable clinically and in the laboratory from sickle cell anaemia. A case of sickle cell/thalassaemia disease is reported in which normal haemoglobin (A) production is completely suppressed giving the same electrophoretic and haematological picture as is found in sickle cell anaemia. The importance of differentiating this condition from sickle cell anaemia is stressed. This can be done by family studies. An example of homozygous haemoglobin C disease is reported. (AU)