Evidence for changes in brain enkephalin contents associated to male rat sexual activity.

Indirect evidence suggests that ejaculation might activate endogenous opioid systems, which exert an inhibitory influence on male rat sexual behaviour. The objective of the present study was to search for putative long-term changes in the contents of immunoreactive (IR) Met-enkephalin (IR-Met), Leu-enkephalin (IR-Leu) and opioid octapeptide Met--Arg(6)--Gly(7)--Leu(8) (IR-Oct) in specific brain areas, after the execution of different amounts of sexual activity. Additionally, basal contents of these enkephalins were compared between sexually active (SA) and persistent sexually inactive (SI) rats. Immunoreactivity to enkephalins was determined by radioimmunoanalysis, in the frontal cortex, the hypothalamus and midbrain of SA and SI rats, as well as 24 or 48 h after males had one ejaculation or copulated to exhaustion. Twenty-four hours after sexual activity, there was a generalised increase in enkephalin contents that returned to control values at the 48 h measurement in all brain areas, but the hypothalamus, where IR-Met and IR-Oct remained elevated. No differences in the magnitude of the changes were found between rats that ejaculated once and sexually satiated males. IR-Oct concentration in the hypothalamus of SI rats appeared significantly higher than in SA animals, with no differences in IR-Met and IR-Leu. Results give direct evidence of the activation of endogenous opioid systems by male rat sexual activity. The occurrence of long lasting increases in the contents of IR-Met and IR-Oct in the hypothalamus of rats that copulated was detected. Finally, an intrinsically elevated octapeptide concentration in the hypothalamus of SI rats was found.

Liberación in vitro de encefalinas durante la depresión postictal y la actividad interictal / In vitro liberation of enkephalins during postical depression and interictal activity

Los péptidos opioides han sido propuestos como agentes inhibidores de la aparición, propagación y severidad de una crisis convulsiva. Su posible participación en los procesos epilépticos implica su liberación a partir de las terminales nerviosas que las contienen. El propósito del presente trabajo fue el de estudiar en diversas estructuras del cerebro de la rata, la liberación in vitro de encefalinas durante la fase ictal, depresión postictal y actividad interictal. Los experimentos se hicieron en ratas macho de la cepa wistar, las cuales fueron sometidas al kindling químico mediante la administración, por vía intraperitoneal, de una dosis diaria de 30mg/kg de pentilenetetrazol, y fueron sacrificadas durante la fase ictal y la depresión postictal. La actividad interictal se estudió al aplicar, en forma crónica, 50 UI de penicilina-G sódica en la amígdala del lóbulo temporal. La concentración de encefalinas se midió por medio de la técnica de radioinmunoensayo. Los resultados obtenidos muestran que la liberación in vitro de encefalinas, provocadas por potasio, aumenta significativamente durante la depresión postictal y la actividad interictal. El efecto es de naturaleza selectiva en cuanto a la estructura y el péptido analizado. Estos datos apoyan la hipótesis concerniente a la participación de las encefalinas en los mecanismos que subyacen en la depresión postictal y la actividad interictal

Los opioides como péptidos ancestrales: estudio inmunohistoquímico en el molusco Helix aspersa y en el anfibio Ambystoma mexicanum / Opioids as ancestral peptides: inmunohistochemical study in the Helix aspersa mollusk and in the amphibious Ambystoma mexicanum

Existe una variedad de estudios multidisciplinarios de tipo farmacológico, fisiológico e inmunohistoquímico que han sido de gran utilidad en las investigaciones de la biología comparada de los péptidos opioides, y las posibles funciones en las que participan a lo largo de la escala filogenética. Se ha encontrado que estos péptidos y sus receptores específicos, se han mantenido estables a través de la evolución. Además, se ha demostrado que los opioides están distribuidos ampliamente a lo largo de la escala filogénetica. Nuestro grupo ha realizado estudios inmunohistoquímicos para leucina encefalina, metionina encefalia, dinorfina 1-8 y beta-endorfina en dos especies: el caracol de jardín Helix aspersa y el ajolote Ambystoma mexicanum. Los resultados obtenidos en el Helix aspersa mostraron inmunorreactividad a la leucina encefalina en interneuronas de la vía sensorial del tentáculo, en interneuronas de los ganglios parietales, y en neuronas neurosecretoras del cuerpo dorsal del mesocerebro, principalmente. La inmunorreactividad a metionina tuvo una distribución más amplia. Se encontró que la inmunorreactividad a encefalinas tiene una variación estacional. Así mismo, se encontró por medio de inmunohistoquímica y HPLC, inmunorreactividad al octapéptido Met-5Arg-Gly-Leu en el anillo periesofágico de este organismo. Se estudió la liberación de encefalinas en estos ganglios y se encontró que es provocada por alto potasio y dependiente de calcio. En el Ambystoma mexicanum se demostró la existencia de inmunorreactividad a metionina encefalina a dinorfina, se encontró únicamente en fibras de la eminencia media y el lóbulo posterior; la inmunorreactividad a leucina encefalina se distribuyó en algunas fibras del lóbulo posterior y de la eminencia media, y en una gran cantidad de células del lóbulo anterior. Este último hallazgo sugirió que este péptido pudiera tener un papel hormonal. La distribución de encefalinas en el cerebro del A. mexicanum fue muy similar a la encontrada en los mamíferos y otros vertebrados. En telencéfalo, la concentración principalmente en el complejo estrioamigdalino y en la región septal. En diencéfalo, se localizó en los núcleos habenulares e hipotalámicos. De los datos presentados en este trabajo, se pudo conluir que los péptidos opioides tienen una distribución parecida en organismos representativos de diferentes grupos taxonómicos, y cuya función es similar dentro de estos grupos

Evidence for enkephalin- and endorphin-immunoreactive cells in the anterior pituitary of the axolotl Ambystoma mexicanum.

An immunohistochemical study of opioid peptides in the hypophysis of the axolotl, Ambystoma mexicanum, was carried out with antisera against leu-enkephalin, beta-endorphin, met-enkephalin, and dynorphin A (1-8). We found leu-enkephalin immunoreactivity in some fibers of the neural lobe and the median eminence. In contrast to previous reports on mammals and other vertebrates, we found leu-enkephalin immunoreactivity in many cells scattered throughout the anterior lobe. As in other vertebrates, the beta-endorphin immunoreactivity was present in all the cells of the intermediate lobe and in a few cells of the anterior lobe. Met-enkephalin and dynorphin A (1-8) immunoreactivities were only present in the neural lobe and the median eminence. The presence of leu-enkephalin and beta-endorphin in the anterior lobe suggests that these peptides could be acting as hormones released from the hypophysis of the unmetamorphosed amphibian.

Sondas de perfusión intracerebral in vivo: un nuevo diseño y su evaluación / In vivo intracerebral perfusion catheters: a new desing and its evaluation

A pesar del desarrollo reciente de técnica biofísicas para dar imágenes de las funciones del cerebro en el animal integro (v.g. tomografía de emisión de positrones, resonancia magnética nuclear), las sondas de perfusión intracerebral son aún el único medio directo de estudio de los fenómenos neuroquímicos in vivo. Sin embargo, estos instrumentos tradicionales de perfusión, por su naturaleza invasiva y la lesión que producen, reclaman nuevos diseños y mejorias. Hemos rediseñado la sonda clásica de perfusión -cánula concéntrica de infusión y extracción- modificando la geometría de su punta: La cánula de infusión se retrajo hacia adentro de la cánula externa (de extracción) para evitar que hiciera contacto directo con el tejido y lo erosinara; además, para aumentar la interfase de difusión entre el tejido y el líquido de perfusión, se perforaron ranuras en el cuerpo de la cánula externa. Esta sonda ranurada elimina prácticamente las lesiones accidentales por obstrucciones al flujo y los sangrados durante la perfusión, pero conserva la misma eficiencia de difusión que se obtiene con las sondas tradicionales. La sonda que hemos construido es de geometría idéntica a la nueva generación de sondas de diálisis intracerebral y comparte muchas de sus ventajas en cuanto a la protección del tejido. Añ carecer de la barrera que establece una membrana de diálisis, permite el libre acceso al tejido cerebral. Estas sondas de perfusión, más seguras y eficientes, pudieran ser aplicadas en la clínica a corto plazo

Amnesia as a major side effect of electroconvulsive shock: the possible involvement of hypothalamic opioid systems.

Electroconvulsive shock (ECS) is used in the treatment of depression and causes antero- and retrograde amnesia as a side effect. One of the many neurochemical effects of ECS is depletion of brain beta-endorphin and Met-enkephalin. These two opioid peptides cause antero- and retrograde amnesia also. Naloxone antagonizes the amnestic effect of ECS and of the opioid peptides. Thus, it is possible that the amnestic effect of ECS is mediated by an endogenous release of the peptides. Surgical posterior hypothalamic deafferentation, but not anterior deafferentation or fornix transection, abolishes the amnestic effect of ECS. This suggests that the hyperactivation of endogenous opioid systems by ECS that leads to amnesia is mediated by posterior ascending fibers to the hypothalamus. The relevance of these considerations to the treatment of depression merits investigation.