Uric acid activates NRLP3 inflammasome in an in-vivo model of epithelial to mesenchymal transition in the kidney.

Uric acid (UA) has been associated with renal fibrosis and progression of chronic kidney disease. However, the underlying mechanisms of this process have still not been identified. Here, we studied the role of the innate imunity receptor NLRP3/ASC in UA induced epithelial-mesenchymal transition (EMT) in kidney. Wistar rats were fed with oxonic acid 2% and UA 2% (OXA + U), OXA + U plus allopurinol (ALL) or regular chow (C) for 7 weeks. We analyzed the presence of EMT markers, the expression of NLRP3, ASC, Caspase-1 and Smad 2/3 molecules and the mitochondrial morphological and functional characteristics. High UA induced renal fibrosis, mild chronic inflammation, as well as morphological and biochemical evidence of EMT. High UA also increased the expression of NLRP3/ASC with activation of both inflammasome related caspase-1 and inflammasome unrelated Smad 2/3 pathways. Ultrastructural co-localization of NLRP3 and Smad 2/3 indicated physical interaction between the two molecules. No morphological or functional changes were found between mitochondria exposed to high UA. In conclusion, kidney epithelial NLRP3/ASC expression was increased in high UA state in rats and both inflammasome related caspase-1 and non-inflammasome related P-Smad 2/3 pathways were associated with the observed EMT, inflammation and fibrosis induced by UA in the kidney.

HTA de difícil manejo: tratamiento desde un enfoque hemodinámico / Difficult-to-manage hypertension: treatment from a hemodynamic approach

INTRODUCCIÓN El tratamiento antihipertensivo se indica de manera empírica. Utilizando la Cardiografía por Impedancia (CI) podemos definir un tratamiento más preciso actuando sobre las variables hemodinámicas alteradas. OBJETIVO Comparar la eficiencia (número de drogas) para reducir la PA a <140/90 mmHg según tratamiento guiado por Cardiografía por Impedancia versus el indicado según guías NICE en pacientes con HTA de difícil manejo. MÉTODOS Inclusión; 30 y 60 años con diagnóstico de HTA no controlada medicados con ≥2 fármacos antihipertensivos y MAPA (Monitoreo Ambulatorio de Presión Arterial) ≥135/85 mmHg. Wash out de antihipertensivos durante 14 días. Se realizó la CI y se randomizó (1:1) en GCI (Grupo CI) y GN (grupo Nice). El GCI recibió tratamiento según un algoritmo predefinido. El GN se trató con IECA/ARA + Antag Cálcico o Tiacida. Al mes se realizó un MAPA control, si la PA >135/85 mmHg se aumentó tratamiento (paso 2 GCI o GN se agregó Espironolactona). La última visita fue a los 60 días y se realizó un nuevoa MAPA y CI. Todos los pacientes firmaron consentimiento informado. RESULTADOS Doce pacientes incluidos, 9 finalizaron el estudio, GCI (7) y GN (2), 1 se excluyó durante el washout por cefalea y 2 están realizando el estudio. La edad promedio fue 48,7 años. MAPA basal 140 ± 8,6/90,33 ± 5,8 mmHg. El GCI inició tratamiento con 1,14 vs 2 fármacos en el GN. El MAPA a las 4 semanas PA diurna 139,14 ± 12,54/90,28 ± 9,3 mmHg GCI vs 126,5/81,5 mmHg GN. El GCI aumentó a dos fármacos y presentaron a los 60 días MAPA con GCI 136,42 ± 14,18/88,85 ± 6,12 mmHg vs GN 129/85 mmHg. DISCUSIÓN El estudio se encuentra en fase de realización actualmente por lo que esperamos en el mediano plazo poder ampliar este informe

Transición epitelio-mesenquimática renal en un modelo experimental de Heperuricemia: participación de Nalp-3 y sus funciones canónicas y no-canónicas / Renal epithelial-mesenchymal transition in an experimental model of Hyperuricemia: participation Nalp-3 and its canonical and non-canonical functions

La fibrosis renal y la consecuente pérdida de las funciones del riñón son elementos comunes en la enfermedad renal crónica. La transición epitelio mesenquimatica (TEM) representa estadios tempranos del proceso de fibrosis. Recientemente se ha vinculado a la inmunidad innata en los procesos de injuria y fibrosis renal. Los pacientes con hiperuricemia presentan una mayor progresión a la enfermedad renal crónica, y mayor prevalencia de hipertensión arterial, induciendo fibrosis renal en modelos animales. No se conoce la participación de la inmunidad innata en la injuria renal inducida por ácido úrico. Para conocer la participación de la inmunidad innata en los procesos de TEM y fibrosis renal inducidos por ácido úrico se recurrió a un modelo desarrollado en rata Wistar macho con elevados niveles de ácido úrico (AOX+U). Para esto se suplementó la dieta con ácido oxónico al 2% (inhibidor de uricasa) y ácido úrico 2% durante 7 semanas. Dos grupos controles fueron considerados para comparar los hallazgos, un grupo con dieta estándar sin los agregados (C) y un segundo grupo control con suplemento de ácido oxónico y úrico, y además allopurinol en agua de bebida (ALL). Los niveles de ácido úrico y urea fueron testeados durante el tratamiento. A las 7 semanas los animales fueron sometidos a eutanasia y tejido renal fue obtenido para análisis de expresión proteica, análisis histológicos (fotónico y electrónico de transmisión) y para estudio mitocondrial: actividad de complejos de cadena respiratoria y respirometria de alta resolución mitocondrial.

SUMMARY: Chronic kidney disease (CKD) is associated with renal fibrosis and loss of kidney functions. Epithelial to mesenchimal transition (EMT) represents early stages of fibrosis. Currently the innate immunity has been associated with kidney injury and fibrosis. Hyperuricemic patients have more progression to CKD and higher prevalence of hypertension. Animals models have shown renal fibrosis induced by uric acid. It is not known the role of innate immunity in the uric acid induced damage in kidney. To describe the participation of the innate immunity in EMT and kidney fibrosis induced by uric acid we used a rat model with higher plasma levels of uric acid uric (AOX-U). These rats were feeding with oxonic acid 2% and uric acid 2% in regular chow during 7 weeks. Two control groups were included, “control group” (C) receiving regular chow without the supplements and the “ALL” group receiving not only the oxonic and uric acid supplement but also allopurinol in drinking water. The plasmatic uric acid and urea levels were checked during the follow-up. At 7 weeks the animals were euthanized and kidney tissue was harvested to protein expression analysis, histology and mitochondrial physiologic studies.