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1.
Ann Hematol ; 95(10): 1595-601, 2016 Oct.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-27465156

RESUMO

Aquaporin-1 (AQP1) is the membrane water channel responsible for changes in erythrocyte volume in response to the tonicity of the medium. As the aberrant distribution of proteins in hereditary spherocytosis (HS) generates deficiencies of proteins other than those codified by the mutated gene, we postulated that AQP1 expression might be impaired in spherocytes. AQP1 expression was evaluated through flow cytometry in 5 normal controls, 1 autoimmune hemolytic anemia, 10 HS (2 mild, 3 moderate, 2 severe, and 3 splenectomized), and 3 silent carriers. The effect of AQP1 inhibitors was evaluated through water flow-based tests: osmotic fragility and hypertonic cryohemolysis. Serum osmolality was measured in 20 normal controls and 13 HS. The effect of erythropoietin (Epo) on AQP1 expression was determined in cultures of erythroleukemia UT-7 cells, dependent on Epo to survive. Independent of erythrocyte size, HS patients showed a lower content of AQP1 in erythrocyte membranes which correlated with the severity of the disease. Accordingly, red blood cells from HS subjects were less sensitive to cryohemolysis than normal erythrocytes after inhibition of the AQP1 water channel. A lower serum osmolality in HS with respect to normal controls suggests alterations during reticulocyte remodeling. The decreased AQP1 expression could contribute to explain variable degrees of anemia in hereditary spherocytosis. The finding of AQP1 expression induced by Epo in a model of erythroid cells may be interpreted as a mechanism to restore the balance of red cell water fluxes.


Assuntos
Aquaporina 1/biossíntese , Eritrócitos/metabolismo , Regulação da Expressão Gênica , Esferocitose Hereditária/sangue , Adolescente , Adulto , Anemia Hemolítica Autoimune/sangue , Anemia Hemolítica Autoimune/genética , Aquaporina 1/sangue , Aquaporina 1/genética , Transporte Biológico , Água Corporal , Linhagem Celular , Criança , Pré-Escolar , Membrana Eritrocítica/metabolismo , Eritrócitos/patologia , Eritropoetina/farmacologia , Hemólise , Heterozigoto , Humanos , Leucemia Linfocítica Crônica de Células B/sangue , Pessoa de Meia-Idade , Concentração Osmolar , Fragilidade Osmótica , Esferocitose Hereditária/genética , Esferocitose Hereditária/cirurgia , Esplenectomia
2.
Pediatr Blood Cancer ; 59(7): 1299-301, 2012 Dec 15.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-22488885

RESUMO

We studied 31 children with hemolytic anemia, or with positive family history for hereditary spherocytosis (HS), to assess the reliability of capillary blood samples for the diagnosis. HS was diagnosed in 20 patients. Cryohemolysis (CH) was positive in 94% and eosin-5'-maleimide flow cytometry in 90% of them, whereas flow cytometric osmotic fragility was positive in 94%. Capillary blood sampling showed to be useful for the diagnosis. Simultaneous use of these three tests allows confirming diagnosis in 100% of patients. The use of very small blood volumes (300 µl) allows an earlier diagnosis in neonates and small infants.


Assuntos
Anemia Hemolítica/diagnóstico , Coleta de Amostras Sanguíneas/métodos , Esferocitose Hereditária/diagnóstico , Anemia Hemolítica/terapia , Capilares , Criança , Pré-Escolar , Resinas Compostas , Amarelo de Eosina-(YS)/análogos & derivados , Congelamento , Testes Hematológicos/métodos , Hemólise , Humanos , Lactente , Recém-Nascido , Fragilidade Osmótica , Sensibilidade e Especificidade , Esferocitose Hereditária/terapia
3.
Ann Hematol ; 90(6): 625-34, 2011 Jun.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-21080168

RESUMO

This prospective study was carried out to assess the usefulness of five laboratory tests in the diagnosis of hereditary spherocytosis (HS), based on the correlation of erythrocyte membrane protein defects with clinical and laboratory features, and also to determine the membrane protein deficiencies detected in Argentina. Of 116 patients and their family members tested, 62 of them were diagnosed to have HS. The specificity of cryohemolysis (CH) test was 95.2%, and its cut-off value to distinguish HS from normal was 2.8%. For flow cytometry, cut-off points of 17% for mean channel fluorescence (MCF) decrease and 14% coefficient of variation (CV) increase showed 95.9% and 92.2% specificity, respectively. Both tests showed the highest percentages of positive results for diagnosis. Either CH or flow cytometry was positive in 93.5% of patients. In eight patients, flow cytometry was positive only through CV increase. Protein defects were detected in 72.3% of patients; ankyrin and spectrin were the most frequently found deficiencies. The CV of the fluorescence showed significantly higher increases in moderate and severe anemia than in mild anemia (p = 0.003). Severity of anemia showed no other correlation with tests results, type of deficient protein, inheritance pattern, or neonatal jaundice. CH and flow cytometry are easy methods with the highest diagnostic accuracy. Simultaneous reading of mean channel fluorescence (MCF) decrease and CV increase improve diagnostic usefulness of flow cytometry. This test seems to be a reliable predictor of severity. The type of detected protein deficiency has no predictive value for outcome. Predominant ankyrin and spectrin deficiencies agree with reports from other Latin American countries.


Assuntos
Técnicas de Laboratório Clínico , Testes Hematológicos/métodos , Esferocitose Hereditária/diagnóstico , Adolescente , Adulto , Idoso , Argentina , Criança , Pré-Escolar , Técnicas de Laboratório Clínico/normas , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida/métodos , Família , Citometria de Fluxo , Hemólise/fisiologia , Humanos , Lactente , Recém-Nascido , Maleimidas , Pessoa de Meia-Idade , Valor Preditivo dos Testes , Estudos Prospectivos , Esferocitose Hereditária/sangue , Adulto Jovem
4.
Med. intensiva ; 20(1): 13-18, 2003. ilus, tab
Artigo em Espanhol | BINACIS | ID: bin-4225

RESUMO

Introducción: Los pacientes que sobreviven a la injuria inicial por trauma severo presentan con elevada frecuencia complicaciones infecciosas, sépticas y disfunción multiorgánica. El traumatismo de cráneo (TEC) parece ser un factor de riesgo independiente en relación con la aparición de esas complicaciones. Los mecanismos causales estarían relacionados a una parálisis de la inmunidad celular inducida por el TEC. Objetivos: Analizar el grado de alteración de la competencia inmunológica en pacientes con TEC severo, determinado por los niveles plasmáticos de las citokinas IL-10, IL-6 y TNF-O y el nivel de expresión de HLA-DR de los monocitos sanguíneos CD14+. Pacientes y métodos: Se incorporaron 15 pacientes ingresados con TEC severo (GCS 8). Ninguno de los pacientes había recibido corticoides ni catecolaminas. Trece voluntarios normales se utilizaron como controles...(AU)


Assuntos
Humanos , Masculino , Adulto , Feminino , Adolescente , Pessoa de Meia-Idade , Infecção Hospitalar/etiologia , Síndromes de Imunodeficiência/etiologia , Hospedeiro Imunocomprometido/imunologia , Genes MHC da Classe II/imunologia , Imunocompetência , Interleucina-10/diagnóstico , Interleucina-10/sangue , Interleucina-6/diagnóstico , Interleucina-6/sangue , Fator de Necrose Tumoral alfa/diagnóstico , Interleucinas/diagnóstico , Interleucinas/sangue , Antígenos HLA-DR/diagnóstico , Antígenos HLA-DR/sangue , Monócitos , Infecção Hospitalar/complicações , Pneumonia , Apresentação de Antígeno/imunologia , Imunidade Celular , Síndromes de Imunodeficiência/fisiopatologia , Expressão Gênica
5.
Med. intensiva ; 20(1): 13-18, 2003. ilus, tab
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-383754

RESUMO

Introducción: Los pacientes que sobreviven a la injuria inicial por trauma severo presentan con elevada frecuencia complicaciones infecciosas, sépticas y disfunción multiorgánica. El traumatismo de cráneo (TEC) parece ser un factor de riesgo independiente en relación con la aparición de esas complicaciones. Los mecanismos causales estarían relacionados a una parálisis de la inmunidad celular inducida por el TEC. Objetivos: Analizar el grado de alteración de la competencia inmunológica en pacientes con TEC severo, determinado por los niveles plasmáticos de las citokinas IL-10, IL-6 y TNF-Ó y el nivel de expresión de HLA-DR de los monocitos sanguíneos CD14+. Pacientes y métodos: Se incorporaron 15 pacientes ingresados con TEC severo (GCS ¾ 8). Ninguno de los pacientes había recibido corticoides ni catecolaminas. Trece voluntarios normales se utilizaron como controles...


Assuntos
Humanos , Masculino , Adulto , Feminino , Adolescente , Pessoa de Meia-Idade , Genes MHC da Classe II , Hospedeiro Imunocomprometido/imunologia , Infecção Hospitalar/etiologia , Síndromes de Imunodeficiência/etiologia , Antígenos HLA-DR/sangue , Antígenos HLA-DR , Expressão Gênica , Imunidade Celular , Imunocompetência , Infecção Hospitalar/complicações , Interleucina-10 , Interleucina-6 , Interleucinas , Monócitos , Pneumonia , Apresentação de Antígeno/imunologia , Síndromes de Imunodeficiência/fisiopatologia , Fator de Necrose Tumoral alfa
6.
Crit Care Med ; 30(2): 349-54, 2002 Feb.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-11889308

RESUMO

OBJECTIVE: To determine the plasma concentrations of lipopolysaccharide, tumor necrosis factor-alpha, interleukin-1 beta, and interleukin-6 in a homogeneous group of septic patients and to evaluate the effect of antibiotic treatment, imipenem or ceftazidime, on the release of lipopolysaccharide and cytokines. DESIGN: Prospective, randomized study. SETTING: Sixteen-bed multidisciplinary intensive care unit. PATIENTS: Twenty-four septic patients with documented Gram-negative nosocomial pneumonia. Controls were 20 patients admitted without sepsis and 20 healthy volunteers. INTERVENTIONS: Septic patients were randomized between imipenem and ceftazidime. Blood samples were collected before (0 hrs) and after (4 and 12 hrs) antibiotic treatment. Concentrations of lipopolysaccharide were measured by using the limulus assay, and cytokine concentrations were measured by enzyme-linked immunosorbent assay. Statistical analyses were performed by Kruskal-Wallis test, Mann-Whitney U test, and Student's t-test. MEASUREMENTS AND MAIN RESULTS: The mean age was 48.5 +/- 19.5. The mean Acute Physiology and Chronic Health Evaluation II score was 18.4 +/- 4.5. Overall mortality rate was 45.4%. All septic patients showed significant higher concentrations of lipopolysaccharide (p <.001), tumor necrosis factor-alpha (p <.04), and interleukin-6 (p <.001) than the controls, but interleukin-1 beta was never detected. We did not find statistically significant changes in lipopolysaccharide or cytokine plasma concentrations over time within any of the two arms of the study (ceftazidime vs. imipenem). There were no statistically significant differences in lipopolysaccharide and interleukin-6 plasma concentrations between the two antibiotic treatments. Although tumor necrosis factor-alpha plasma concentrations were significantly higher in the group treated with ceftazidime compared with the group treated with imipenem at the baseline and 4 hrs later, these differences were not statistically significant after 12 hrs of initiation of both treatments. CONCLUSIONS: Patients with Gram-negative nosocomial pneumonia have high plasma concentrations of lipopolysaccharide, interleukin-6, and tumor necrosis factor-alpha, but the antibiotic therapy evaluated did not significantly modify these concentrations.


Assuntos
Antibacterianos/farmacologia , Infecção Hospitalar/tratamento farmacológico , Citocinas/efeitos dos fármacos , Infecções por Bactérias Gram-Negativas/tratamento farmacológico , Lipopolissacarídeos/sangue , Pneumonia Bacteriana/tratamento farmacológico , Ceftazidima/farmacologia , Cefalosporinas/farmacologia , Infecção Hospitalar/imunologia , Citocinas/sangue , Feminino , Infecções por Bactérias Gram-Negativas/imunologia , Humanos , Imipenem/farmacologia , Interleucina-1/metabolismo , Interleucina-6/metabolismo , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Pneumonia Bacteriana/imunologia , Estudos Prospectivos , Sepse/tratamento farmacológico , Sepse/imunologia , Estatísticas não Paramétricas , Tienamicinas/farmacologia , Fator de Necrose Tumoral alfa/efeitos dos fármacos , Fator de Necrose Tumoral alfa/metabolismo
7.
Medicina (B.Aires) ; 61(5,pt.1): 573-6, 2001. graf
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-299681

RESUMO

Los pacientes que sobreviven a la injuria inicial de un trauma severo presentan con elevada frecuencia complicaciones infecciosas, sépticas y disfunción multiorgánica. Los mecanismos causales estarían relacionados a una alteración de la inmunidad celular inducida por el trauma y mediada en parte por la a expresión de citokinas antinflamatorias. Se evaluaron los niveles plasmáticos de la citokina antinflamatoria IL-10 y de la citokina proinflamatoria TNF-a en 15 pacientes ingresados con traumatismo encefalocraneano (TEC) severo predominante. Ninguno de los pacientes había recibido corticoides ni catecolaminas; 13 voluntarios normales se utilizaron como controles. Al ingreso los niveles plasmáticos de IL-10 fueron significativamente mayores en los pacientes que en los controles: 41.8 (17.3-265.4) pg/mL vs. 2.2 (1.4-2.7) pg/mL, p<0.001 (test de Mann-Withney). Los niveles de IL-10 no fueron diferentes entre la primera (menos de 6 horas post-trauma) y la segunda muestra (4 horas después) (test de Wilcoxon). Los niveles plasmáticos de TNF-a fueron semejantes en los pacientes respecto a los controles. Estos resultados muestran que los pacientes con TEC severo desarrollan precozmente una respuesta con elevación significativa de los niveles plasmáticos de IL-10 y que podría explicar, por lo menos en parte, la situación de inmunodepresión inducida por el TEC.


Assuntos
Humanos , Adulto , Lesões Encefálicas , Mediadores da Inflamação , Interleucina-10 , Lesões Encefálicas , Incidência , Mediadores da Inflamação , Interleucina-10 , Pneumonia Bacteriana , Estudos Prospectivos , Fatores de Tempo , Fator de Necrose Tumoral alfa , Ventiladores Mecânicos
8.
Medicina [B.Aires] ; 61(5,pt.1): 573-6, 2001. gra
Artigo em Espanhol | BINACIS | ID: bin-9262

RESUMO

Los pacientes que sobreviven a la injuria inicial de un trauma severo presentan con elevada frecuencia complicaciones infecciosas, sépticas y disfunción multiorgánica. Los mecanismos causales estarían relacionados a una alteración de la inmunidad celular inducida por el trauma y mediada en parte por la a expresión de citokinas antinflamatorias. Se evaluaron los niveles plasmáticos de la citokina antinflamatoria IL-10 y de la citokina proinflamatoria TNF-a en 15 pacientes ingresados con traumatismo encefalocraneano (TEC) severo predominante. Ninguno de los pacientes había recibido corticoides ni catecolaminas; 13 voluntarios normales se utilizaron como controles. Al ingreso los niveles plasmáticos de IL-10 fueron significativamente mayores en los pacientes que en los controles: 41.8 (17.3-265.4) pg/mL vs. 2.2 (1.4-2.7) pg/mL, p<0.001 (test de Mann-Withney). Los niveles de IL-10 no fueron diferentes entre la primera (menos de 6 horas post-trauma) y la segunda muestra (4 horas después) (test de Wilcoxon). Los niveles plasmáticos de TNF-a fueron semejantes en los pacientes respecto a los controles. Estos resultados muestran que los pacientes con TEC severo desarrollan precozmente una respuesta con elevación significativa de los niveles plasmáticos de IL-10 y que podría explicar, por lo menos en parte, la situación de inmunodepresión inducida por el TEC. (AU)


Assuntos
Humanos , Adulto , Interleucina-10/metabolismo , Mediadores da Inflamação/metabolismo , Lesões Encefálicas Traumáticas/metabolismo , Interleucina-10/sangue , Interleucina-10/metabolismo , Mediadores da Inflamação/sangue , Lesões Encefálicas Traumáticas/imunologia , Fator de Necrose Tumoral alfa/análise , Pneumonia Bacteriana/etiologia , Pneumonia Bacteriana/epidemiologia , Ventiladores Mecânicos/microbiologia , Incidência , Estudos Prospectivos , Fatores de Tempo
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