Your browser doesn't support javascript.
Mostrar: 20 | 50 | 100
Resultados 1 - 2 de 2
Mais filtros

Base de dados
Intervalo de ano de publicação
Nat Commun ; 12(1): 4908, 2021 08 13.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-34389711


C9ORF72 hexanucleotide GGGGCC repeat expansion is the most common genetic cause of amyotrophic lateral sclerosis (ALS) and frontotemporal dementia (FTD). Repeat-containing RNA mediates toxicity through nuclear granules and dipeptide repeat (DPR) proteins produced by repeat-associated non-AUG translation. However, it remains unclear how the intron-localized repeats are exported and translated in the cytoplasm. We use single molecule imaging approach to examine the molecular identity and spatiotemporal dynamics of the repeat RNA. We demonstrate that the spliced intron with G-rich repeats is stabilized in a circular form due to defective lariat debranching. The spliced circular intron, instead of pre-mRNA, serves as the translation template. The NXF1-NXT1 pathway plays an important role in the nuclear export of the circular intron and modulates toxic DPR production. This study reveals an uncharacterized disease-causing RNA species mediated by repeat expansion and demonstrates the importance of RNA spatial localization to understand disease etiology.

Proteína C9orf72/genética , Núcleo Celular/metabolismo , Íntrons/genética , Biossíntese de Proteínas/genética , RNA/genética , Transporte Ativo do Núcleo Celular/genética , Esclerose Amiotrófica Lateral/genética , Esclerose Amiotrófica Lateral/metabolismo , Proteína C9orf72/metabolismo , Linhagem Celular Tumoral , Núcleo Celular/genética , Expansão das Repetições de DNA/genética , Dipeptídeos/genética , Dipeptídeos/metabolismo , Demência Frontotemporal/genética , Demência Frontotemporal/metabolismo , Predisposição Genética para Doença/genética , Células HEK293 , Humanos , Microscopia de Fluorescência , Proteínas de Transporte Nucleocitoplasmático/genética , Proteínas de Transporte Nucleocitoplasmático/metabolismo , RNA/metabolismo , Proteínas de Ligação a RNA/genética , Proteínas de Ligação a RNA/metabolismo , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , Transdução de Sinais/genética
Methods ; 162-163: 12-22, 2019 06 01.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-30905747


The central dogma of molecular biology reaches a crescendo at its final step: the translation of an mRNA into its corresponding protein product. This process is highly regulated both spatially and temporally, requiring techniques to interrogate the subcellular translational status of mRNAs in both living and fixed cells. Single-molecule imaging of nascent peptides (SINAPs) and related techniques allow us to study this fundamental process for single mRNAs in live cells. These techniques enable researchers to address previously intractable questions in the central dogma, such as the origin of stochastic translational control and the role of local translation in highly polarized cells. In this review, we present the methodology and the theoretical framework for conducting studies using SINAPs in both established cell lines and primary cultured neurons.

Microscopia Intravital/métodos , Neurônios/metabolismo , RNA Mensageiro/metabolismo , Imagem Individual de Molécula/métodos , Animais , Proteínas do Capsídeo/química , Proteínas do Capsídeo/genética , Proteínas do Capsídeo/metabolismo , Linhagem Celular Tumoral , Proteínas de Fluorescência Verde/química , Proteínas de Fluorescência Verde/genética , Proteínas de Fluorescência Verde/metabolismo , Hipocampo/citologia , Humanos , Levivirus/genética , Camundongos , Peptídeos/genética , Peptídeos/metabolismo , Proteínas de Plantas/química , Proteínas de Plantas/genética , Proteínas de Plantas/metabolismo , Cultura Primária de Células/métodos , Biossíntese de Proteínas , Proteínas Recombinantes de Fusão/química , Proteínas Recombinantes de Fusão/genética , Proteínas Recombinantes de Fusão/metabolismo , Anticorpos de Cadeia Única/química , Anticorpos de Cadeia Única/genética , Anticorpos de Cadeia Única/metabolismo , Ubiquitina-Proteína Ligases/química , Ubiquitina-Proteína Ligases/genética , Ubiquitina-Proteína Ligases/metabolismo