Your browser doesn't support javascript.
loading
Mostrar: 20 | 50 | 100
Resultados 1 - 20 de 3.474
Filtrar
1.
Int J Mol Sci ; 22(11)2021 May 30.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-34070839

RESUMO

BACKGROUND: Ovarian clear cell carcinoma (OCCC) is resistant to platinum chemotherapy and is characterized by poor prognosis. Today, the use of poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) inhibitor, which is based on synthetic lethality strategy and characterized by cancer selectivity, is widely used for new types of molecular-targeted treatment of relapsed platinum-sensitive ovarian cancer. However, it is less effective against OCCC. METHODS: We conducted siRNA screening to identify synthetic lethal candidates for the ARID1A mutation; as a result, we identified Cyclin-E1 (CCNE1) as a potential target that affects cell viability. To further clarify the effects of CCNE1, human OCCC cell lines, namely TOV-21G and KOC7c (ARID1A mutant lines), and RMG-I and ES2 (ARID1A wild type lines) were transfected with siRNA targeting CCNE1 or a control vector. RESULTS: Loss of CCNE1 reduced proliferation of the TOV-21G and KOC7c cells but not of the RMG-I and ES2 cells. Furthermore, in vivo interference of CCNE1 effectively inhibited tumor cell proliferation in a xenograft mouse model. CONCLUSION: This study showed for the first time that CCNE1 is a synthetic lethal target gene to ARID1A-mutated OCCC. Targeting this gene may represent a putative, novel, anticancer strategy in OCCC treatment.


Assuntos
Adenocarcinoma de Células Claras/genética , Ciclina E/genética , Proteínas de Ligação a DNA/genética , Proteínas Oncogênicas/genética , Neoplasias Ovarianas/genética , Mutações Sintéticas Letais , Fatores de Transcrição/genética , Adenocarcinoma de Células Claras/metabolismo , Adenocarcinoma de Células Claras/patologia , Animais , Antineoplásicos/farmacologia , Apoptose/efeitos dos fármacos , Apoptose/genética , Ciclo Celular/efeitos dos fármacos , Ciclo Celular/genética , Linhagem Celular Tumoral , Proliferação de Células/efeitos dos fármacos , Cisplatino/farmacologia , Ciclina E/antagonistas & inibidores , Ciclina E/metabolismo , Proteínas de Ligação a DNA/antagonistas & inibidores , Proteínas de Ligação a DNA/metabolismo , Feminino , Regulação Neoplásica da Expressão Gênica , Humanos , Camundongos , Camundongos Nus , Terapia de Alvo Molecular , Proteínas Oncogênicas/antagonistas & inibidores , Proteínas Oncogênicas/metabolismo , Neoplasias Ovarianas/metabolismo , Neoplasias Ovarianas/patologia , RNA Interferente Pequeno/genética , RNA Interferente Pequeno/metabolismo , Fatores de Transcrição/antagonistas & inibidores , Fatores de Transcrição/metabolismo , Carga Tumoral/efeitos dos fármacos , Ensaios Antitumorais Modelo de Xenoenxerto
2.
Int J Mol Sci ; 22(9)2021 Apr 29.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-33947138

RESUMO

Ovarian clear cell carcinoma (OCCC) is a rare but chemorefractory tumor. About 50% of all OCCC patients have inactivating mutations of ARID1A, a member of the SWI/SNF chromatin-remodeling complex. Members of the SWI/SNF remodeling have emerged as regulators of the energetic metabolism of mammalian cells; however, the role of ARID1A as a modulator of the mitochondrial metabolism in OCCCs is yet to be defined. Here, we show that ARID1A loss results in increased mitochondrial metabolism and renders ARID1A-mutated cells increasingly and selectively dependent on it. The increase in mitochondrial activity following ARID1A loss is associated with increase in c-Myc expression and increased mitochondrial number and reduction of their size consistent with a higher mitochondrial cristae/outer membrane ratio. Significantly, preclinical testing of the complex I mitochondrial inhibitor IACS-010759 showed it extends overall survival in a preclinical model of ARID1A-mutated OCCC. These findings provide for the targeting mitochondrial activity in ARID1A-mutated OCCCs.


Assuntos
Adenocarcinoma de Células Claras/tratamento farmacológico , Antineoplásicos/uso terapêutico , Proteínas de Ligação a DNA/antagonistas & inibidores , Mitocôndrias/efeitos dos fármacos , Proteínas de Neoplasias/antagonistas & inibidores , Neoplasias Ovarianas/tratamento farmacológico , Oxidiazóis/uso terapêutico , Piperidinas/uso terapêutico , Fatores de Transcrição/antagonistas & inibidores , Adenocarcinoma de Células Claras/metabolismo , Adenocarcinoma de Células Claras/patologia , Animais , Antineoplásicos/farmacologia , Linhagem Celular Tumoral , Proteínas de Ligação a DNA/deficiência , Proteínas de Ligação a DNA/genética , Complexo I de Transporte de Elétrons/antagonistas & inibidores , Feminino , Regulação Neoplásica da Expressão Gênica/efeitos dos fármacos , Técnicas de Silenciamento de Genes , Humanos , Potencial da Membrana Mitocondrial/efeitos dos fármacos , Camundongos , Camundongos Nus , Mitocôndrias/metabolismo , Proteínas de Neoplasias/biossíntese , Proteínas de Neoplasias/genética , Neoplasias Ovarianas/metabolismo , Neoplasias Ovarianas/patologia , Oxidiazóis/farmacologia , Fosforilação Oxidativa/efeitos dos fármacos , Consumo de Oxigênio/efeitos dos fármacos , Piperidinas/farmacologia , Interferência de RNA , RNA Interferente Pequeno/genética , RNA Interferente Pequeno/farmacologia , Distribuição Aleatória , Esferoides Celulares , Fatores de Transcrição/deficiência , Fatores de Transcrição/genética , Ensaios Antitumorais Modelo de Xenoenxerto
3.
Cell ; 184(8): 2167-2182.e22, 2021 04 15.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-33811809

RESUMO

Cardiac injury and dysfunction occur in COVID-19 patients and increase the risk of mortality. Causes are ill defined but could be through direct cardiac infection and/or inflammation-induced dysfunction. To identify mechanisms and cardio-protective drugs, we use a state-of-the-art pipeline combining human cardiac organoids with phosphoproteomics and single nuclei RNA sequencing. We identify an inflammatory "cytokine-storm", a cocktail of interferon gamma, interleukin 1ß, and poly(I:C), induced diastolic dysfunction. Bromodomain-containing protein 4 is activated along with a viral response that is consistent in both human cardiac organoids (hCOs) and hearts of SARS-CoV-2-infected K18-hACE2 mice. Bromodomain and extraterminal family inhibitors (BETi) recover dysfunction in hCOs and completely prevent cardiac dysfunction and death in a mouse cytokine-storm model. Additionally, BETi decreases transcription of genes in the viral response, decreases ACE2 expression, and reduces SARS-CoV-2 infection of cardiomyocytes. Together, BETi, including the Food and Drug Administration (FDA) breakthrough designated drug, apabetalone, are promising candidates to prevent COVID-19 mediated cardiac damage.


Assuntos
COVID-19/complicações , Cardiotônicos/uso terapêutico , Proteínas de Ciclo Celular/antagonistas & inibidores , Cardiopatias/tratamento farmacológico , Quinazolinonas/uso terapêutico , Fatores de Transcrição/antagonistas & inibidores , Enzima de Conversão de Angiotensina 2/metabolismo , Animais , COVID-19/tratamento farmacológico , Proteínas de Ciclo Celular/metabolismo , Linhagem Celular , Citocinas/metabolismo , Feminino , Cardiopatias/etiologia , Células-Tronco Embrionárias Humanas , Humanos , Inflamação/complicações , Inflamação/tratamento farmacológico , Camundongos , Camundongos Endogâmicos C57BL , Fatores de Transcrição/metabolismo
4.
J Med Chem ; 64(9): 5787-5801, 2021 05 13.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-33872011

RESUMO

The use of epigenetic bromodomain inhibitors as anticancer therapeutics has transitioned from targeting bromodomain extraterminal domain (BET) proteins into targeting non-BET bromodomains. The two most relevant non-BET bromodomain oncology targets are cyclic AMP response element-binding protein (CBP) and E1A binding protein P300 (EP300). To explore the growing CBP/EP300 interest, we developed a highly efficient two-step synthetic route for dimethylisoxazole-attached imidazo[1,2-a]pyridine scaffold-containing inhibitors. Our efficient two-step reactions enabled high-throughput synthesis of compounds designed by molecular modeling, which together with structure-activity relationship (SAR) studies facilitated an overarching understanding of selective targeting of CBP/EP300 over non-BET bromodomains. This led to the identification of a new potent and selective CBP/EP300 bromodomain inhibitor, UMB298 (compound 23, CBP IC50 72 nM and bromodomain 4, BRD4 IC50 5193 nM). The SAR we established is in good agreement with literature-reported CBP inhibitors, such as CBP30, and demonstrates the advantage of utilizing our two-step approach for inhibitor development of other bromodomains.


Assuntos
Proteína de Ligação ao Elemento de Resposta ao AMP Cíclico/antagonistas & inibidores , Proteína p300 Associada a E1A/antagonistas & inibidores , Isoxazóis/química , Piridinas/química , Sítios de Ligação , Proteínas de Ciclo Celular/antagonistas & inibidores , Proteínas de Ciclo Celular/metabolismo , Linhagem Celular Tumoral , Sobrevivência Celular/efeitos dos fármacos , Cristalografia por Raios X , Proteína de Ligação ao Elemento de Resposta ao AMP Cíclico/metabolismo , Proteína p300 Associada a E1A/metabolismo , Humanos , Simulação de Acoplamento Molecular , Piridinas/metabolismo , Piridinas/farmacologia , Relação Estrutura-Atividade , Fatores de Transcrição/antagonistas & inibidores , Fatores de Transcrição/metabolismo
5.
J Med Chem ; 64(9): 5886-5904, 2021 05 13.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-33902288

RESUMO

The ß-catenin/B-cell lymphoma 9 (BCL9) protein-protein interaction (PPI) is a potential target for the suppression of hyperactive Wnt/ß-catenin signaling that is vigorously involved in cancer initiation and development. Herein, we describe the medicinal chemistry optimization of a screening hit to yield novel small-molecule inhibitors of the ß-catenin/BCL9 interaction. The best compound 30 can disrupt the ß-catenin/BCL9 interaction with a Ki of 3.6 µM in AlphaScreen competitive inhibition assays. Cell-based experiments revealed that 30 selectively disrupted the ß-catenin/BCL9 PPI, while leaving the ß-catenin/E-cadherin PPI unaffected, dose-dependently suppressed Wnt signaling transactivation, downregulated oncogenic Wnt target gene expression, and on-target selectively inhibited the growth of cancer cells harboring aberrant Wnt signaling. This compound with a new chemotype can serve as a lead compound for further optimization of inhibitors for ß-catenin/BCL9 PPI.


Assuntos
Desenho de Fármacos , Piperidinas/química , Bibliotecas de Moléculas Pequenas/química , Fatores de Transcrição/metabolismo , beta Catenina/metabolismo , Sítios de Ligação , Caderinas/antagonistas & inibidores , Caderinas/metabolismo , Linhagem Celular Tumoral , Sobrevivência Celular/efeitos dos fármacos , Regulação para Baixo , Humanos , Simulação de Acoplamento Molecular , Piperidinas/metabolismo , Piperidinas/farmacologia , Mapas de Interação de Proteínas/efeitos dos fármacos , Bibliotecas de Moléculas Pequenas/metabolismo , Bibliotecas de Moléculas Pequenas/farmacologia , Relação Estrutura-Atividade , Fatores de Transcrição/antagonistas & inibidores , Via de Sinalização Wnt/efeitos dos fármacos , beta Catenina/antagonistas & inibidores
6.
Molecules ; 26(6)2021 Mar 17.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-33802888

RESUMO

Epigenetic regulation is known to play a key role in progression of anti-cancer therapeutics. Lysine acetylation is an important mechanism in controlling gene expression. There has been increasing interest in bromodomain owing to its ability to modulate transcription of various genes as an epigenetic 'reader.' Herein, we report the design, synthesis, and X-ray studies of novel aristoyagonine (benzo[6,7]oxepino[4,3,2-cd]isoindol-2(1H)-one) derivatives and investigate their inhibitory effect against Brd4 bromodomain. Five compounds 8ab, 8bc, 8bd, 8be, and 8bf have been discovered with high binding affinity over the Brd4 protein. Co-crystal structures of these five inhibitors with human Brd4 bromodomain demonstrated that it has a key binding mode occupying the hydrophobic pocket, which is known to be the acetylated lysine binding site. These novel Brd4 bromodomain inhibitors demonstrated impressive inhibitory activity and mode of action for the treatment of cancer diseases.


Assuntos
Proteínas de Ciclo Celular/antagonistas & inibidores , Proteínas de Ciclo Celular/química , Inibidores Enzimáticos/química , Isoquinolinas/química , Fatores de Transcrição/antagonistas & inibidores , Fatores de Transcrição/química , Acetilação , Sítios de Ligação/genética , Proteínas de Ciclo Celular/genética , Proteínas de Ciclo Celular/metabolismo , Linhagem Celular , Cristalografia por Raios X , Humanos , Concentração Inibidora 50 , Isoquinolinas/síntese química , Lisina/química , Lisina/metabolismo , Ligação Proteica , Domínios Proteicos/genética , Relação Estrutura-Atividade , Fatores de Transcrição/genética , Fatores de Transcrição/metabolismo
7.
Molecules ; 26(8)2021 Apr 11.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-33920352

RESUMO

The pathological finding of amyloid-ß (Aß) aggregates is thought to be a leading cause of untreated Alzheimer's disease (AD). In this study, we isolated 2-butoxytetrahydrofuran (2-BTHF), a small cyclic ether, from Holothuria scabra and demonstrated its therapeutic potential against AD through the attenuation of Aß aggregation in a transgenic Caenorhabditis elegans model. Our results revealed that amongst the five H. scabra isolated compounds, 2-BTHF was shown to be the most effective in suppressing worm paralysis caused by Aß toxicity and in expressing strong neuroprotection in CL4176 and CL2355 strains, respectively. An immunoblot analysis showed that CL4176 and CL2006 treated with 2-BTHF showed no effect on the level of Aß monomers but significantly reduced the toxic oligomeric form and the amount of 1,4-bis(3-carboxy-hydroxy-phenylethenyl)-benzene (X-34)-positive fibril deposits. This concurrently occurred with a reduction of reactive oxygen species (ROS) in the treated CL4176 worms. Mechanistically, heat shock factor 1 (HSF-1) (at residues histidine 63 (HIS63) and glutamine 72 (GLN72)) was shown to be 2-BTHF's potential target that might contribute to an increased expression of autophagy-related genes required for the breakdown of the Aß aggregate, thus attenuating its toxicity. In conclusion, 2-BTHF from H. scabra could protect C. elegans from Aß toxicity by suppressing its aggregation via an HSF-1-regulated autophagic pathway and has been implicated as a potential drug for AD.


Assuntos
Doença de Alzheimer/tratamento farmacológico , Peptídeos beta-Amiloides/antagonistas & inibidores , Furanos/farmacologia , Holothuria/química , Fármacos Neuroprotetores/farmacologia , Paralisia/prevenção & controle , Doença de Alzheimer/genética , Doença de Alzheimer/metabolismo , Doença de Alzheimer/patologia , Peptídeos beta-Amiloides/genética , Peptídeos beta-Amiloides/metabolismo , Animais , Animais Geneticamente Modificados , Proteínas Relacionadas à Autofagia/genética , Proteínas Relacionadas à Autofagia/metabolismo , Sítios de Ligação , Caenorhabditis elegans/efeitos dos fármacos , Caenorhabditis elegans/genética , Caenorhabditis elegans/metabolismo , Proteínas de Caenorhabditis elegans/antagonistas & inibidores , Proteínas de Caenorhabditis elegans/genética , Proteínas de Caenorhabditis elegans/metabolismo , Modelos Animais de Doenças , Furanos/química , Furanos/isolamento & purificação , Regulação da Expressão Gênica , Humanos , Simulação de Acoplamento Molecular , Fármacos Neuroprotetores/química , Fármacos Neuroprotetores/isolamento & purificação , Paralisia/genética , Paralisia/metabolismo , Paralisia/patologia , Agregados Proteicos/efeitos dos fármacos , Ligação Proteica , Conformação Proteica em alfa-Hélice , Conformação Proteica em Folha beta , Domínios e Motivos de Interação entre Proteínas , Espécies Reativas de Oxigênio/antagonistas & inibidores , Espécies Reativas de Oxigênio/metabolismo , Fatores de Transcrição/antagonistas & inibidores , Fatores de Transcrição/genética , Fatores de Transcrição/metabolismo
8.
Front Immunol ; 12: 609319, 2021.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-33679744

RESUMO

Endotoxemia is a severe inflammation response induced by infection especially bacterial endotoxin translocation, which severely increases mortality in combination with acute colon injury. Bromodomain-containing protein 4 (BRD4) is an important Bromo and Extra-Terminal (BET) protein to participate in inflammatory responses. However, it is still unknown about the specific connection between BRD4 and inflammation-related pyroptosis in endotoxemia colon. Here, through evaluating the mucous morphology and the expression of tight junction proteins such as occludin and ZO1, we found the upregulation of BRD4 in damaged colon with poor tight junction in an endotoxemia mouse model induced by lipopolysaccharides (LPS). Firstly, the BRD4 inhibitor JQ1 was used to effectively protect colon tight junction in endotoxemia. As detected, high levels of pro-inflammation cytokines IL6, IL1ß and IL18 in endotoxemia colon were reversed by JQ1 pretreatment. In addition, JQ1 injection reduced endotoxemia-induced elevation of the phosphorylated NF κB and NLRP3/ASC/caspase 1 inflammasome complex in colon injury. Furthermore, activated pyroptosis markers gasdermins in endotoxemia colon were also blocked by JQ1 pretreatment. Together, our data indicate that BRD4 plays a critical role in regulating pyroptosis-related colon injury induced by LPS, and JQ1 as a BRD4 inhibitors can effectively protect colon from endotoxemia-induced inflammation injury.


Assuntos
Azepinas/farmacologia , Colite/metabolismo , Proteínas Nucleares/antagonistas & inibidores , Piroptose/efeitos dos fármacos , Fatores de Transcrição/antagonistas & inibidores , Triazóis/farmacologia , Animais , Biomarcadores , Colite/tratamento farmacológico , Colite/etiologia , Colite/patologia , Modelos Animais de Doenças , Endotoxemia/complicações , Endotoxemia/etiologia , Imuno-Histoquímica , Inflamassomos/metabolismo , Mucosa Intestinal/efeitos dos fármacos , Mucosa Intestinal/metabolismo , Mucosa Intestinal/patologia , Lipopolissacarídeos/efeitos adversos , Masculino , Camundongos , Fosforilação , Junções Íntimas/metabolismo
9.
J Med Chem ; 64(6): 3249-3281, 2021 03 25.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-33662213

RESUMO

A number of reports have recently been published describing the discovery and optimization of bromo and extraterminal inhibitors which are selective for the second bromodomain (BD2); these include our own work toward GSK046 (3) and GSK620 (5). This paper describes our approach to mitigating the genotoxicity risk of GSK046 by replacement of the acetamide functionality with a heterocyclic ring. This was followed by a template-hopping and hybridization approach, guided by structure-based drug design, to incorporate learnings from other BD2-selective series, optimize the vector for the amide region, and explore the ZA cleft, leading to the identification of potent, selective, and bioavailable compounds 28 (GSK452), 39 (GSK737), and 36 (GSK217).


Assuntos
Proteínas de Ciclo Celular/antagonistas & inibidores , Domínios Proteicos/efeitos dos fármacos , Bibliotecas de Moléculas Pequenas/química , Bibliotecas de Moléculas Pequenas/farmacologia , Fatores de Transcrição/antagonistas & inibidores , Proteínas de Ciclo Celular/química , Proteínas de Ciclo Celular/metabolismo , Desenho de Fármacos , Descoberta de Drogas , Humanos , Fatores de Transcrição/química , Fatores de Transcrição/metabolismo
10.
Cell Prolif ; 54(4): e13016, 2021 Apr.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-33660290

RESUMO

OBJECTIVES: Mouse incisor mesenchymal stem cells (MSCs) have self-renewal ability and osteo/odontogenic differentiation potential. However, the mechanism controlling the continuous self-renewal and osteo/odontogenic differentiation of mouse incisor MSCs remains unclear. Special AT-rich sequence-binding protein 2 (SATB2) positively regulates craniofacial patterning, bone development and regeneration, whereas SATB2 deletion or mutation leads to craniomaxillofacial dysplasia and delayed tooth and root development, similar to bone morphogenetic protein (BMP) loss-of-function phenotypes. However, the detailed mechanism underlying the SATB2 role in odontogenic MSCs is poorly understood. The aim of this study was to investigate whether SATB2 can regulate self-renewal and osteo/odontogenic differentiation of odontogenic MSCs. MATERIALS AND METHODS: Satb2 expression was detected in the rapidly renewing mouse incisor mesenchyme by immunofluorescence staining, quantitative RT-PCR and Western blot analysis. Ad-Satb2 and Ad-siSatb2 were constructed to evaluate the effect of Satb2 on odontogenic MSCs self-renewal and osteo/odontogenic differentiation properties and the potential role of Satb2 with the osteogenic factor bone morphogenetic protein 9 (Bmp9) in vitro and in vivo. RESULTS: Satb2 was found to be expressed in mesenchymal cells and pre-odontoblasts/odontoblasts. We further discovered that Satb2 effectively enhances mouse incisor MSCs self-renewal. Satb2 acted synergistically with the potent osteogenic factor Bmp9 in inducing osteo/odontogenic differentiation of mouse incisor MSCs in vitro and in vivo. CONCLUSIONS: Satb2 promotes self-renewal and osteo/odontogenic differentiation of mouse incisor MSCs. Thus, Satb2 can cooperate with Bmp9 as a new efficacious bio-factor for osteogenic regeneration and tooth engineering.


Assuntos
Diferenciação Celular , Fator 2 de Diferenciação de Crescimento/metabolismo , Proteínas de Ligação à Região de Interação com a Matriz/metabolismo , Células-Tronco Mesenquimais/citologia , Odontoblastos/citologia , Fatores de Transcrição/metabolismo , Adenoviridae/genética , Animais , Regeneração Óssea , Adesão Celular , Linhagem Celular , Proliferação de Células , Autorrenovação Celular , Vetores Genéticos/genética , Vetores Genéticos/metabolismo , Fator 2 de Diferenciação de Crescimento/genética , Hidrogéis/química , Incisivo/citologia , Proteínas de Ligação à Região de Interação com a Matriz/antagonistas & inibidores , Proteínas de Ligação à Região de Interação com a Matriz/genética , Células-Tronco Mesenquimais/metabolismo , Camundongos , Camundongos Endogâmicos C57BL , Odontoblastos/metabolismo , Interferência de RNA , RNA Interferente Pequeno/metabolismo , Tecidos Suporte/química , Fatores de Transcrição/antagonistas & inibidores , Fatores de Transcrição/genética
11.
Biomed Pharmacother ; 137: 111346, 2021 May.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-33556876

RESUMO

Abnormal T helper 17 (Th17) responses promote inflammation and cause inflammatory diseases. Natural components that modulate Th17 functions can be effective for the amelioration of inflammatory diseases. Procyanidin B2 3,3''-di-O-gallate (PCB2DG) contained in grape seeds markedly suppressed interleukin (IL)-17 production from spleen cells but not CD4+ T cells. The aim of this study was to elucidate the mechanisms by which PCB2DG suppresses IL-17. Our results showed that PCB2DG suppressed the production of IL-17, tumor necrosis factor (TNF)-α, IL-1ß, and IL-6 with the suppression of transcription factors expression. In addition, we revealed that TNF-α and IL-1ß were required to induce IL-17 production in this experimental condition, and PCB2DG suppressed these cytokines from dendritic cells (DCs). Furthermore, CD4-DC co-culture experiments showed that the production of IL-17, TNF-α, and IL-1ß was markedly inhibited in co-cultures of PCB2DG-pretreated CD4+ T cells and DCs. These results suggested that PCB2DG first modulated TNF-α production by CD4+ T cells and then suppressed IL-1ß secretion from DCs, resulting in decreased IL-17 production. Thus, PCB2DG can control the cytokine network associated with Th17 cells, providing a novel mechanism underlying the immunosuppressive effects of polyphenols.


Assuntos
Biflavonoides/farmacologia , Linfócitos T CD4-Positivos/efeitos dos fármacos , Catequina/farmacologia , Citocinas/biossíntese , Células Dendríticas/efeitos dos fármacos , Imunossupressores/farmacologia , Interleucina-17/biossíntese , Proantocianidinas/farmacologia , Baço/efeitos dos fármacos , Animais , Linfócitos T CD4-Positivos/metabolismo , Células Cultivadas , Células Dendríticas/metabolismo , Interleucina-17/antagonistas & inibidores , Camundongos Endogâmicos C57BL , Baço/metabolismo , Células Th17/efeitos dos fármacos , Fatores de Transcrição/antagonistas & inibidores
12.
Nat Genet ; 53(3): 279-287, 2021 03.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-33558757

RESUMO

Chromatin accessibility is a hallmark of regulatory regions, entails transcription factor (TF) binding and requires nucleosomal reorganization. However, it remains unclear how dynamic this process is. In the present study, we use small-molecule inhibition of the catalytic subunit of the mouse SWI/SNF remodeler complex to show that accessibility and reduced nucleosome presence at TF-binding sites rely on persistent activity of nucleosome remodelers. Within minutes of remodeler inhibition, accessibility and TF binding decrease. Although this is irrespective of TF function, we show that the activating TF OCT4 (POU5F1) exhibits a faster response than the repressive TF REST. Accessibility, nucleosome depletion and gene expression are rapidly restored on inhibitor removal, suggesting that accessible chromatin is regenerated continuously and in a largely cell-autonomous fashion. We postulate that TF binding to chromatin and remodeler-mediated nucleosomal removal do not represent a stable situation, but instead accessible chromatin reflects an average of a dynamic process under continued renewal.


Assuntos
Cromatina/metabolismo , Complexos Multiproteicos/metabolismo , Fatores de Transcrição/metabolismo , ATPases Associadas a Diversas Atividades Celulares/genética , ATPases Associadas a Diversas Atividades Celulares/metabolismo , Adenosina Trifosfatases/genética , Adenosina Trifosfatases/metabolismo , Animais , Sítios de Ligação , Linhagem Celular/efeitos dos fármacos , Cromatina/genética , Montagem e Desmontagem da Cromatina/efeitos dos fármacos , Montagem e Desmontagem da Cromatina/fisiologia , Proteínas Cromossômicas não Histona/genética , Proteínas Cromossômicas não Histona/metabolismo , DNA Helicases/antagonistas & inibidores , DNA Helicases/metabolismo , Proteínas de Ligação a DNA/genética , Proteínas de Ligação a DNA/metabolismo , Regulação da Expressão Gênica/efeitos dos fármacos , Histonas/genética , Histonas/metabolismo , Camundongos , Células-Tronco Embrionárias Murinas/citologia , Células-Tronco Embrionárias Murinas/efeitos dos fármacos , Complexos Multiproteicos/efeitos dos fármacos , Complexos Multiproteicos/genética , Proteínas Nucleares/antagonistas & inibidores , Proteínas Nucleares/metabolismo , Fator 3 de Transcrição de Octâmero/genética , Fator 3 de Transcrição de Octâmero/metabolismo , Receptores de Estrogênio/genética , Receptores de Estrogênio/metabolismo , Proteínas Repressoras/genética , Proteínas Repressoras/metabolismo , Bibliotecas de Moléculas Pequenas/farmacologia , Fatores de Transcrição/antagonistas & inibidores , Fatores de Transcrição/genética
13.
J Med Chem ; 64(5): 2534-2575, 2021 03 11.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-33596065

RESUMO

The biological and medicinal impacts of proteolysis-targeting chimeras (PROTACs) and related chimeric molecules that effect intracellular degradation of target proteins via ubiquitin ligase-mediated ubiquitination continue to grow. However, these chimeric entities are relatively large compounds that often possess molecular characteristics, which may compromise oral bioavailability, solubility, and/or in vivo pharmacokinetic properties. We therefore explored the conjugation of such molecules to monoclonal antibodies using technologies originally developed for cytotoxic payloads so as to provide alternate delivery options for these novel agents. In this report, we describe the first phase of our systematic development of antibody-drug conjugates (ADCs) derived from bromodomain-containing protein 4 (BRD4)-targeting chimeric degrader entities. We demonstrate the antigen-dependent delivery of the degrader payloads to PC3-S1 prostate cancer cells along with related impacts on MYC transcription and intracellular BRD4 levels. These experiments culminate with the identification of one degrader conjugate, which exhibits antigen-dependent antiproliferation effects in LNCaP prostate cancer cells.


Assuntos
Proteínas de Ciclo Celular/antagonistas & inibidores , Dipeptídeos/farmacologia , Compostos Heterocíclicos com 3 Anéis/farmacologia , Imunoconjugados/farmacologia , Proteólise/efeitos dos fármacos , Fatores de Transcrição/antagonistas & inibidores , Anticorpos Monoclonais/imunologia , Antígenos de Neoplasias/imunologia , Proteínas de Ciclo Celular/metabolismo , Proliferação de Células/efeitos dos fármacos , Dipeptídeos/síntese química , Dipeptídeos/farmacocinética , Compostos Heterocíclicos com 3 Anéis/síntese química , Compostos Heterocíclicos com 3 Anéis/farmacocinética , Humanos , Imunoconjugados/química , Imunoconjugados/imunologia , Oxirredutases/imunologia , Células PC-3 , Fatores de Transcrição/metabolismo , Proteína Supressora de Tumor Von Hippel-Lindau/metabolismo
14.
J Med Chem ; 64(5): 2576-2607, 2021 03 11.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-33596073

RESUMO

Heterobifunctional compounds that direct the ubiquitination of intracellular proteins in a targeted manner via co-opted ubiquitin ligases have enormous potential to transform the field of medicinal chemistry. These chimeric molecules, often termed proteolysis-targeting chimeras (PROTACs) in the chemical literature, enable the controlled degradation of specific proteins via their direction to the cellular proteasome. In this report, we describe the second phase of our research focused on exploring antibody-drug conjugates (ADCs), which incorporate BRD4-targeting chimeric degrader entities. We employ a new BRD4-binding fragment in the construction of the chimeric ADC payloads that is significantly more potent than the corresponding entity utilized in our initial studies. The resulting BRD4-degrader antibody conjugates exhibit potent and antigen-dependent BRD4 degradation and antiproliferation activities in cell-based experiments. Multiple ADCs bearing chimeric BRD4-degrader payloads also exhibit strong, antigen-dependent antitumor efficacy in mouse xenograft assessments that employ several different tumor models.


Assuntos
Antineoplásicos/uso terapêutico , Proteínas de Ciclo Celular/antagonistas & inibidores , Proliferação de Células/efeitos dos fármacos , Imunoconjugados/uso terapêutico , Neoplasias/tratamento farmacológico , Proteólise/efeitos dos fármacos , Fatores de Transcrição/antagonistas & inibidores , Animais , Anticorpos Monoclonais/imunologia , Anticorpos Monoclonais/farmacocinética , Anticorpos Monoclonais/uso terapêutico , Antígenos de Neoplasias/imunologia , Antineoplásicos/síntese química , Antineoplásicos/farmacocinética , Proteínas de Ciclo Celular/metabolismo , Linhagem Celular Tumoral , Dipeptídeos/síntese química , Dipeptídeos/farmacocinética , Dipeptídeos/uso terapêutico , Feminino , Compostos Heterocíclicos com 3 Anéis/síntese química , Compostos Heterocíclicos com 3 Anéis/farmacocinética , Compostos Heterocíclicos com 3 Anéis/uso terapêutico , Humanos , Imunoconjugados/imunologia , Imunoconjugados/farmacocinética , Camundongos SCID , Oxirredutases/imunologia , Fatores de Transcrição/metabolismo , Proteína Supressora de Tumor Von Hippel-Lindau/metabolismo , Ensaios Antitumorais Modelo de Xenoenxerto
15.
J Med Chem ; 64(5): 2419-2435, 2021 03 11.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-33616410

RESUMO

Bromodomain and extraterminal (BET) proteins bind acetylated lysine residues in histones and nonhistone proteins via tandem bromodomains and regulate chromatin dynamics, cellular processes, and disease procession. Thus targeting BET proteins is a promising strategy for treating various diseases, especially malignant tumors and chronic inflammation. Many pan-BET small-molecule inhibitors have been described, and some of them are in clinical evaluation. Nevertheless, the limited clinical efficacy of the current BET inhibitors is also evident and has inspired the development of new technologies to improve their clinical outcomes and minimize unwanted side effects. In this Review, we summarize the latest protein characteristics and biological functions of BRD4 as an example of BET proteins, analyze the clinical development status and preclinical resistance mechanisms, and discuss recent advances in BRD4-selective inhibitors, dual-target BET inhibitors, proteolysis targeting chimera degraders, and protein-protein interaction inhibitors.


Assuntos
Compostos Orgânicos/uso terapêutico , Fatores de Transcrição/antagonistas & inibidores , Sequência de Aminoácidos , Animais , Linhagem Celular Tumoral , Ensaios Clínicos como Assunto , Descoberta de Drogas , Humanos , Compostos Orgânicos/metabolismo , Compostos Orgânicos/farmacologia , Ligação Proteica/efeitos dos fármacos , Domínios Proteicos , Multimerização Proteica/efeitos dos fármacos , Proteólise/efeitos dos fármacos , Fatores de Transcrição/química , Fatores de Transcrição/metabolismo
16.
J Enzyme Inhib Med Chem ; 36(1): 593-604, 2021 Dec.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-33557648

RESUMO

Colorectal cancer (CRC) is a common malignant tumour of human digestive tract. The high mortality rate of CRC is closely related to the limitations of existing treatments. Thus, there is an urgent need to search for new anti-CRC agents. In this work, twenty novel coumarin-dithiocarbamate derivatives (IDs) were designed, synthesized and evaluated in vitro. The results suggest that the most active compound ID-11 effectively inhibited the proliferation of CRC cell lines while shown little impact on normal colon epithelial cells. Mechanism studies revealed that ID-11 displayed bromodomain-containing protein 4 inhibitory activity, and induced G2/M phase arrest, apoptosis as well as decreased the expression levels of the key genes such as c-Myc and Bcl-2 in CRC cell lines. Moreover, the ADMET properties prediction results shown that ID-11 possess well metabolic characteristics without obvious toxicities. Our data demonstrated that compound ID-11 may be a promising anti-CRC agent and deserved for further development.


Assuntos
Antineoplásicos/farmacologia , Neoplasias Colorretais/tratamento farmacológico , Cumarínicos/farmacologia , Desenho de Fármacos , Tiocarbamatos/farmacologia , Antineoplásicos/síntese química , Antineoplásicos/química , Apoptose/efeitos dos fármacos , Proteínas de Ciclo Celular/antagonistas & inibidores , Proteínas de Ciclo Celular/metabolismo , Proliferação de Células/efeitos dos fármacos , Sobrevivência Celular/efeitos dos fármacos , Células Cultivadas , Neoplasias Colorretais/metabolismo , Neoplasias Colorretais/patologia , Cumarínicos/química , Relação Dose-Resposta a Droga , Ensaios de Seleção de Medicamentos Antitumorais , Humanos , Simulação de Acoplamento Molecular , Estrutura Molecular , Relação Estrutura-Atividade , Tiocarbamatos/química , Fatores de Transcrição/antagonistas & inibidores , Fatores de Transcrição/metabolismo
17.
Biochem Biophys Res Commun ; 545: 125-131, 2021 03 19.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-33548625

RESUMO

Bromodomain and PHD finger containing transcription factor (BPTF) is a multidomain protein that regulates the transcription of chromatin and is related to many cancers. Herein, we report the screening-based discovery of Cpd1, a compound with micromolar affinity to the BPTF bromodomain. Through structure-guided optimization, we synthesized a variety of new inhibitors. Among these compounds, Cpd8 and Cpd10 were highly potent and selective inhibitors, with KD values of 428 nM and 655 nM in ITC assays, respectively. The high activity was explained by the cocrystal structure of Cpd8 in complex with the BPTF bromodomain protein. Cpd8 and Cpd10 were able to stabilize the BPTF bromodomain protein in cells in a cellular thermal shift assay (CETSA). Cpd8 downregulated c-MYC expression in A549 cells. All experiments prove that these two compounds are potential BPTF inhibitors.


Assuntos
Proteínas do Tecido Nervoso/antagonistas & inibidores , Fatores de Transcrição/antagonistas & inibidores , Células A549 , Antígenos Nucleares/química , Antígenos Nucleares/genética , Calorimetria , Cristalografia por Raios X , Desenho de Fármacos , Descoberta de Drogas , Avaliação Pré-Clínica de Medicamentos , Fluorometria , Regulação da Expressão Gênica/efeitos dos fármacos , Genes myc , Células HEK293 , Humanos , Modelos Moleculares , Proteínas do Tecido Nervoso/química , Proteínas do Tecido Nervoso/genética , Fragmentos de Peptídeos/antagonistas & inibidores , Fragmentos de Peptídeos/química , Fragmentos de Peptídeos/genética , Domínios Proteicos , Estabilidade Proteica/efeitos dos fármacos , RNA Mensageiro/genética , RNA Mensageiro/metabolismo , Proteínas Recombinantes/química , Proteínas Recombinantes/efeitos dos fármacos , Proteínas Recombinantes/genética , Relação Estrutura-Atividade , Fatores de Transcrição/química , Fatores de Transcrição/genética
18.
Nat Commun ; 12(1): 241, 2021 01 11.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-33431824

RESUMO

Acute myeloid leukemia (AML) is a typically lethal molecularly heterogeneous disease, with few broad-spectrum therapeutic targets. Unusually, most AML retain wild-type TP53, encoding the pro-apoptotic tumor suppressor p53. MDM2 inhibitors (MDM2i), which activate wild-type p53, and BET inhibitors (BETi), targeting the BET-family co-activator BRD4, both show encouraging pre-clinical activity, but limited clinical activity as single agents. Here, we report enhanced toxicity of combined MDM2i and BETi towards AML cell lines, primary human blasts and mouse models, resulting from BETi's ability to evict an unexpected repressive form of BRD4 from p53 target genes, and hence potentiate MDM2i-induced p53 activation. These results indicate that wild-type TP53 and a transcriptional repressor function of BRD4 together represent a potential broad-spectrum synthetic therapeutic vulnerability for AML.


Assuntos
Protocolos de Quimioterapia Combinada Antineoplásica/uso terapêutico , Proteínas de Ciclo Celular/metabolismo , Leucemia Mieloide Aguda/tratamento farmacológico , Terapia de Alvo Molecular , Fatores de Transcrição/metabolismo , Proteína Supressora de Tumor p53/metabolismo , Animais , Protocolos de Quimioterapia Combinada Antineoplásica/farmacologia , Crise Blástica/patologia , Proteínas de Ciclo Celular/antagonistas & inibidores , Linhagem Celular Tumoral , Modelos Animais de Doenças , Regulação Leucêmica da Expressão Gênica/efeitos dos fármacos , Humanos , Peptídeos e Proteínas de Sinalização Intracelular/metabolismo , Leucemia Mieloide Aguda/genética , Camundongos , Proteínas Serina-Treonina Quinases/antagonistas & inibidores , Proteínas Serina-Treonina Quinases/metabolismo , Proteínas Proto-Oncogênicas c-mdm2/antagonistas & inibidores , Proteínas Proto-Oncogênicas c-mdm2/metabolismo , RNA Mensageiro/genética , RNA Mensageiro/metabolismo , Fatores de Transcrição/antagonistas & inibidores
19.
Nat Chem Biol ; 17(3): 280-290, 2021 03.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-33462494

RESUMO

Although most acute skin wounds heal rapidly, non-healing skin ulcers represent an increasing and substantial unmet medical need that urgently requires effective therapeutics. Keratinocytes resurface wounds to re-establish the epidermal barrier by transitioning to an activated, migratory state, but this ability is lost in dysfunctional chronic wounds. Small-molecule regulators of keratinocyte plasticity with the potential to reverse keratinocyte malfunction in situ could offer a novel therapeutic approach in skin wound healing. Utilizing high-throughput phenotypic screening of primary keratinocytes, we identify such small molecules, including bromodomain and extra-terminal domain (BET) protein family inhibitors (BETi). BETi induce a sustained activated, migratory state in keratinocytes in vitro, increase activation markers in human epidermis ex vivo and enhance skin wound healing in vivo. Our findings suggest potential clinical utility of BETi in promoting keratinocyte re-epithelialization of skin wounds. Importantly, this novel property of BETi is exclusively observed after transient low-dose exposure, revealing new potential for this compound class.


Assuntos
Proteínas de Ciclo Celular/genética , Epiderme/efeitos dos fármacos , Reepitelização/efeitos dos fármacos , Úlcera Cutânea/tratamento farmacológico , Bibliotecas de Moléculas Pequenas/farmacologia , Fatores de Transcrição/genética , Ferimentos não Penetrantes/tratamento farmacológico , Animais , Proteínas de Ciclo Celular/antagonistas & inibidores , Proteínas de Ciclo Celular/metabolismo , Modelos Animais de Doenças , Epiderme/metabolismo , Epiderme/patologia , Transferência Ressonante de Energia de Fluorescência , Regulação da Expressão Gênica , Ensaios de Triagem em Larga Escala , Humanos , Queratinócitos/efeitos dos fármacos , Queratinócitos/metabolismo , Queratinócitos/patologia , Masculino , Camundongos , Camundongos Endogâmicos C57BL , Cultura Primária de Células , Isoformas de Proteínas/antagonistas & inibidores , Isoformas de Proteínas/genética , Isoformas de Proteínas/metabolismo , Precursores de Proteínas/antagonistas & inibidores , Precursores de Proteínas/genética , Precursores de Proteínas/metabolismo , Reepitelização/genética , Úlcera Cutânea/genética , Úlcera Cutânea/metabolismo , Úlcera Cutânea/patologia , Bibliotecas de Moléculas Pequenas/química , Relação Estrutura-Atividade , Fatores de Transcrição/antagonistas & inibidores , Fatores de Transcrição/metabolismo , Transcrição Genética , Ferimentos não Penetrantes/genética , Ferimentos não Penetrantes/metabolismo , Ferimentos não Penetrantes/patologia
20.
Cancer Res ; 81(6): 1528-1539, 2021 03 15.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-33509942

RESUMO

EGFR is frequently amplified, mutated, and overexpressed in malignant gliomas. Yet the EGFR-targeted therapies have thus far produced only marginal clinical responses, and the underlying mechanism remains poorly understood. Using an inducible oncogenic EGFR-driven glioma mouse model system, our current study reveals that a small population of glioma cells can evade therapy-initiated apoptosis and potentiate relapse development by adopting a mesenchymal-like phenotypic state that no longer depends on oncogenic EGFR signaling. Transcriptome analyses of proximal and distal treatment responses identified TGFß/YAP/Slug signaling cascade activation as a major regulatory mechanism that promotes therapy-induced glioma mesenchymal lineage transdifferentiation. Following anti-EGFR treatment, TGFß secreted from stressed glioma cells acted to promote YAP nuclear translocation that stimulated upregulation of the pro-mesenchymal transcriptional factor SLUG and subsequent glioma lineage transdifferentiation toward a stable therapy-refractory state. Blockade of this adaptive response through suppression of TGFß-mediated YAP activation significantly delayed anti-EGFR relapse and prolonged animal survival. Together, our findings shed new insight into EGFR-targeted therapy resistance and suggest that combinatorial therapies of targeting both EGFR and mechanisms underlying glioma lineage transdifferentiation could ultimately lead to deeper and more durable responses. SIGNIFICANCE: This study demonstrates that molecular reprogramming and lineage transdifferentiation underlie anti-EGFR therapy resistance and are clinically relevant to the development of new combinatorial targeting strategies against malignant gliomas with aberrant EGFR signaling.


Assuntos
Protocolos de Quimioterapia Combinada Antineoplásica/farmacologia , Neoplasias Encefálicas/tratamento farmacológico , Transdiferenciação Celular/efeitos dos fármacos , Glioma/tratamento farmacológico , Recidiva Local de Neoplasia/epidemiologia , Proteínas Adaptadoras de Transdução de Sinal/antagonistas & inibidores , Proteínas Adaptadoras de Transdução de Sinal/metabolismo , Animais , Protocolos de Quimioterapia Combinada Antineoplásica/uso terapêutico , Apoptose/efeitos dos fármacos , Apoptose/genética , Neoplasias Encefálicas/genética , Neoplasias Encefálicas/patologia , Linhagem Celular Tumoral , Proliferação de Células/efeitos dos fármacos , Proliferação de Células/genética , Transdiferenciação Celular/genética , Conjuntos de Dados como Assunto , Modelos Animais de Doenças , Resistencia a Medicamentos Antineoplásicos/efeitos dos fármacos , Resistencia a Medicamentos Antineoplásicos/genética , Receptores ErbB/antagonistas & inibidores , Receptores ErbB/genética , Cloridrato de Erlotinib/farmacologia , Cloridrato de Erlotinib/uso terapêutico , Feminino , Regulação Neoplásica da Expressão Gênica/efeitos dos fármacos , Glioma/genética , Glioma/mortalidade , Glioma/patologia , Proteínas de Homeodomínio/genética , Humanos , Masculino , Camundongos , Camundongos Knockout , Recidiva Local de Neoplasia/genética , Recidiva Local de Neoplasia/prevenção & controle , Prognóstico , Intervalo Livre de Progressão , RNA-Seq , Transdução de Sinais/efeitos dos fármacos , Transdução de Sinais/genética , Fatores de Transcrição/antagonistas & inibidores , Fatores de Transcrição/metabolismo , Fator de Crescimento Transformador beta1/antagonistas & inibidores , Fator de Crescimento Transformador beta1/metabolismo , Ensaios Antitumorais Modelo de Xenoenxerto
SELEÇÃO DE REFERÊNCIAS
DETALHE DA PESQUISA
...