RESUMO
T regulatory (Treg) cells have a major role in the maintenance of immune tolerance against self and foreign antigens through the control of harmful inflammation. Treg cells exert immunosuppressive function by several mechanisms, which can be distinguished as contact dependent or independent. Recently, the secretion of extracellular vesicles (EVs) by Treg cells has been reported as a novel suppressive mechanism capable of modulating immunity in a cell-contact independent and targeted manner, which has been identified in different pathologic scenarios. EVs are cell-derived membranous structures involved in physiologic and pathologic processes through protein, lipid, and genetic material exchange, which allow intercellular communication. In this review, we revise and discuss current knowledge on Treg cells-mediated immune tolerance giving special attention to the production and release of EVs. Multiple studies support that Treg cells-derived EVs represent a refined intercellular exchange device with the capacity of modulating immune responses, thus creating a tolerogenic microenvironment in a cell-free manner. The mechanisms proposed encompass miRNAs-induced gene silencing, the action of surface proteins and the transmission of enzymes. These observations gain relevance by the fact that Treg cells are susceptible to converting into effector T cells after exposition to inflammatory environments. Yet, in contrast to their cells of origin, EVs are unlikely to be modified under inflammatory conditions, highlighting the advantage of their use. Moreover, we speculate in the possibility that Treg cells may contribute to infectious tolerance via vesicle secretion, intervening with CD4+ T cells differentiation and/or stability.
Assuntos
Vesículas Extracelulares/imunologia , Tolerância Imunológica/imunologia , Linfócitos T Reguladores/imunologia , Animais , Subpopulações de Linfócitos B/imunologia , Microambiente Celular , Fatores de Transcrição Forkhead/fisiologia , Inativação Gênica , Humanos , Proteínas de Checkpoint Imunológico/fisiologia , Tolerância Imunológica/genética , Imunoterapia , Inflamação/imunologia , Linfocinas/metabolismo , Camundongos , MicroRNAs/genética , Modelos Imunológicos , Receptores Imunológicos/fisiologiaRESUMO
Liver cirrhosis is associated with increased morbidity and mortality with important health and social consequences; however, an effective treatment has not been found yet. Previous reports have shown some beneficial effects of stevioside (SVT) in different diseases, but the ability of SVT to inhibit liver cirrhosis has not been reported. Therefore, we studied the potential of this diterpenoid to inhibit liver cirrhosis induced by thioacetamide, a model that shares many similarities with the human disease, and investigated the possible underlying molecular mechanism using in vivo and in vitro approaches. Cirrhosis was induced in male Wistar rats by chronic thioacetamide administration (200 mg/kg) intraperitoneally three times per week. Rats received saline or SVT (20 mg/kg) two times daily intraperitoneally. In addition, co-cultures were incubated with either lipopolysaccharide or ethanol. Liver fibrosis, hepatic stellate cells activation, metalloproteinases activity, canonical and non-canonical Smads pathway and expression of several profibrogenic genes were evaluated. Thioacetamide activated hepatic stellate cells and distorted the liver parenchyma with the presence of abundant thick bands of collagen. In addition, thioacetamide up-regulated the protein expression of α-smooth muscle actin, transforming growth factor-ß1, metalloproteinases-9,-2 and -13 and overstimulate the canonical and non-canonical Smad pathways. SVT administration inhibited all of these changes. In vitro, SVT inhibited the up-regulation of several genes implicated in cirrhosis when cells were exposed to lipopolysaccharides or ethanol. We conclude that SVT inhibited liver damage by blocking hepatic stellate cells activation, down-regulating canonical and non-canonical profibrotic Smad pathways.
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Diterpenos do Tipo Caurano/farmacologia , Fibrose/tratamento farmacológico , Fibrose/metabolismo , Glucosídeos/farmacologia , Cirrose Hepática/tratamento farmacológico , Proteínas Smad/metabolismo , Actinas/metabolismo , Animais , Linhagem Celular , Colágeno Tipo I/metabolismo , Colagenases , Nucleotídeos de Desoxicitosina , Regulação para Baixo , Fibrose/induzido quimicamente , Células Estreladas do Fígado/efeitos dos fármacos , Humanos , Fígado/metabolismo , Fígado/patologia , Cirrose Hepática/induzido quimicamente , Linfocinas/metabolismo , Sistema de Sinalização das MAP Quinases/efeitos dos fármacos , Masculino , Fator de Crescimento Derivado de Plaquetas/metabolismo , Proteínas Proto-Oncogênicas c-myc/metabolismo , Ratos , Ratos Wistar , Transdução de Sinais/efeitos dos fármacos , Tioacetamida/toxicidade , Fator de Crescimento Transformador beta1/metabolismo , Regulação para CimaRESUMO
Innate lymphoid cells (ILCs) are lymphocytes lacking antigen recognition receptors and become activated in response to cytokines and through microbe-associated molecular pattern (MAMP) receptors. ILCs are found mainly in mucosal tissues and participate in the immune response against infections and in chronic inflammatory conditions. ILCs are divided in ILC-1, ILC-2 and ILC-3, and these cells have analogue functions to those of immune adaptive response lymphocytes Th1, Th2 and Th17. ILC-1 express T-bet, produce IFNγ, protect against infections with intracellular microorganisms and are related to inflammatory bowel disease immunopathology. ILC-2 express GATA3, produce IL-4, IL-5, IL-13 and amphiregulin, protect against parasitic infections and are related to allergy and obesity immunopathology. ILC-3 express ROR(γt), produce IL-17 and IL-22, protect against fungal infections and contribute to tolerance to intestinal microbiota and intestinal repair. They are related to inflammatory bowel disease and psoriasis immunopathology. In general terms, ILCs maintain homeostasis and coadjuvate in the protection against infections.
Las células linfoides innatas (ILC) son linfocitos que carecen de receptores de reconocimiento de antígenos y se activan en respuesta a citocinas y a través de receptores de patrones moleculares asociados a microorganismos (MAMP). Las ILC se localizan preferentemente en las mucosas, y participan en la respuesta inmune contra infecciones y en enfermedades inflamatorias crónicas. Las ILC se dividen en ILC-1, ILC-2 e ILC-3, y estas células tienen funciones análogas a las de los linfocitos Th1, Th2 y Th17 de la respuesta inmune adaptativa. Las ILC-1 expresan T-bet, producen IFNγ, protegen contra infecciones con microorganismos intracelulares y están relacionados con la inmunopatología de la enfermedad inflamatoria intestinal. Las ILC-2 expresan GATA3, producen IL-4, IL-5, IL-13 y anfirregulina, protegen contra infecciones parasitarias y se relacionan con la inmunopatología de la alergia y la obesidad. Las ILC-3 expresan RORγt, producen IL-17 e IL-22, protegen contra infecciones con hongos y participan en la tolerancia a la microbiota intestinal y en la reparación intestinal. Se relacionan con la inmunopatología de la enfermedad inflamatoria intestinal y la psoriasis. En términos generales, las ILC mantienen la homeostasis y coadyuvan en la protección contra las infecciones.
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Imunidade Inata/imunologia , Subpopulações de Linfócitos/imunologia , Doenças Cardiovasculares/imunologia , Humanos , Hipersensibilidade Imediata/imunologia , Imunidade nas Mucosas , Infecções/imunologia , Inflamação , Subpopulações de Linfócitos/classificação , Linfocinas/fisiologia , Neoplasias/imunologia , Obesidade/imunologiaRESUMO
Introducción. El caseinato de sodio, una sal de la caseína utilizada como agente proinflamatorio en ratones, es capaz de inducir granulopoyesis en vivo e incrementar la producción de citocinas esenciales en dicho evento.Objetivo. Evaluar si el caseinato de sodio es capaz de inducir un efecto biológico en células de origen linfoide y la producción de citocinas involucradas con este linaje.Materiales y métodos: Se utilizaron ratones hembra BALB/c de 8 a 12 semanas de edad. Los animales se inyectaron cuatro veces, con intervalos de 48 horas, por vía intraperitoneal con 1 ml de caseinato de sodio (10 % de SFB p/v). La población de linfocitos B y la incorporación de bromodesoxiuridina (BrdU) se analizaron mediante citometría de flujo. La detección de la interleucina 7 se evaluó mediante la técnica de ELISA.Resultados. Tras la inyección por vía intraperitoneal, el número de linfocitos B 220+ provenientes del bazo de ratones tratados con caseinato de sodio aumentó comparados con los que solo recibieron el vehículo como tratamiento (89,01±1,03 Vs. 75,66±2,08), así como la incorporación de BrdU en células B220+ (38,59±4,48 Vs. 11,82±1,04). Se evidenció, asimismo, el incremento en la concentración de la interleucina 7 (IL-7) en el suero de los ratones tratados con caseinato de sodio, comparados con los que solo recibieron el vehículo (62,1±17,5 Vs. 26,9±4,4 pg/ml).Conclusión. El caseinato de sodio fue capaz de aumentar el número de linfocitos B en bazo de ratones, así como inducir la producción de IL-7, citocina clave para la linfopoyesis B.
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Linfócitos B/efeitos dos fármacos , Caseínas/farmacologia , Linfopoese/efeitos dos fármacos , Animais , Medula Óssea/efeitos dos fármacos , Caseínas/administração & dosagem , Caseínas/toxicidade , Divisão Celular , Feminino , Injeções Intraperitoneais , Interleucina-7/biossíntese , Interleucina-7/sangue , Interleucina-7/genética , Contagem de Linfócitos , Linfocinas/biossíntese , Linfocinas/genética , Camundongos , Camundongos Endogâmicos BALB C , Baço/citologia , Baço/efeitos dos fármacos , Regulação para Cima/efeitos dos fármacosRESUMO
Os neutrófilos são o tipo leucocitário mais abundante em circulação, constituem a primeira linha de reconhecimento e defesa contra agentes infecciosos no tecido, tradicionalmente iniciam uma inflamação aguda e são responsáveis por uma resposta imune pró-inflamatória eficaz. Recentemente essas células vêm sendo descritas como complexas e com uma vasta capacidade de desempenhar funções especializadas, interagem com macrófagos, células dendríticas, e linfócitos TCD4+. É importante reconsiderar sua importância como célula efetora na imunidade adaptativa e as novas perspectivas sobre as funções imunorregulatórias nas reações imunológicas normais e patológicas. Nesta revisão, nosso foco é mostrar os aspectos clássicos e discutir o novo neutrófilo, expondo o que tem sido descrito na literatura recentemente.
Neutrophils are the most abundant leukocyte in blood and represent the first line recognition and defense against infectious agents in tissues, traditionally begin an acute inflammation and are responsible by an effective proinflammatory reaction. Recently these cells have been described with a large capacity to perform specialized functions like interaction with macrophages, dendritic cells and CD4 + T lymphocytes. It is important to reconsider its importance as effector cells in adaptive immunity and new perspectives on the immunoregulatory functions in normal and pathological immune responses. In this review, the focus is to show the classic aspects and discuss the "new neutrophils", exposing what has been described in literature recently
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Linfocinas , Imunidade Adaptativa , Neutrófilos/imunologia , NoxasRESUMO
Age-related macular degeneration (AMD) causes visual impairment in the elderly. In non-neovascular AMD, studies involving human subjects have suggested potential involvement of aberrant lipid metabolism. However, there have been no reports on gene expression patterns in animal models of non-neovascular AMD with abnormal lipid metabolism such as apolipoprotein E knockout and human apolipoprotein E2 transgenic mice. Transcriptome analysis was performed using retinal pigment epithelium cells of apoE knockout and apolipoprotein E2 mice using microarray analysis. C57BL/6, Rxrb, Pparbp, Vldlr, and Edf1, which are primarily related to lipid metabolism, were upregulated, while Tgfbr1 and Pdgfb, which are related to pathologic angiogenesis in AMD, were downregulated in both types of mice. Apolipoprotein E knockout and apolipoprotein E2 mice showed characteristic gene expression patterns in the transcriptome analysis of primary retinal pigment epithelium cells. These results suggest that specific genes associated with lipid metabolism and angiogenesis are involved in the pathogenesis and progression of AMD.
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Apolipoproteína E2/genética , Células Epiteliais/metabolismo , Epitélio Pigmentado da Retina/citologia , Transcriptoma , Idoso , Animais , Apolipoproteínas E/genética , Proteínas de Ligação a Calmodulina/genética , Proteínas de Ligação a Calmodulina/metabolismo , Proteínas de Ligação a DNA/genética , Proteínas de Ligação a DNA/metabolismo , Modelos Animais de Doenças , Regulação para Baixo , Humanos , Metabolismo dos Lipídeos , Linfocinas/genética , Linfocinas/metabolismo , Degeneração Macular/genética , Camundongos , Camundongos Endogâmicos C57BL , Camundongos Knockout , Camundongos Transgênicos , Análise em Microsséries , PPAR beta/genética , PPAR beta/metabolismo , Fator de Crescimento Derivado de Plaquetas/genética , Fator de Crescimento Derivado de Plaquetas/metabolismo , Proteínas Serina-Treonina Quinases/genética , Proteínas Serina-Treonina Quinases/metabolismo , Receptor do Fator de Crescimento Transformador beta Tipo I , Receptores de LDL/genética , Receptores de LDL/metabolismo , Receptores de Fatores de Crescimento Transformadores beta/genética , Receptores de Fatores de Crescimento Transformadores beta/metabolismo , Regulação para CimaRESUMO
Objective Identify nurses’ emancipatory practices in primary care, to contribute to the improvement of health care. Method A case study type social research of qualitative nature, in which nurses of a primary health care service unit in São Paulo were interviewed. Results The home visit was identified as a nursing practice possible to be expanded in order to identify social determinants of health, triggering emancipatory practices in the service. This expansion occurred because the design of health care labour intended by the service team changed its focus from the traditional object of health services, the disease. Conclusion First, it is advocated that social policies lead projects with the purpose of improving health needs. On the other hand, the daily labour needs to provide opportunities for reflection and discussion of healthcare projects, leading workers to propose labour-processes targeted to both the social determinants of health and people’s illness. .
Objetivo Identificar las prácticas emancipadoras de enfermeras en Unidad de Salud Familiar fueron el objeto de este estudio. Método La investigación social cualitativa tipo estúdio de caso. Fueron entrevistados enfermeros de una Unidad de Salud Familiar en Sao Paulo. Resultados Se identificó que la Visita Domiciliaria ha ampliado su alcance y identificado determinantes del proceso salud-enfermedad, lo que provocó en la Unidad de Salud Familiar prácticas emancipadoras. Esta expansión se produjo debido a que el diseño de la atención en propósito por la USF amplió el tradicional objeto de los servicios de salud. Conclusión Se aboga que las directrices de las políticas sociales basen proyectos que tengan como fin el mejoramiento de las necesidades de salud y que el trabajo diario proporcione la reflexión y discusión de los proyectos de atención, para proponer prácticas que enfoquen en los determinantes del proceso salud-enfermedad, tanto cuanto en sus resultados - la enfermedad en el cuerpo individual. .
Objetivo Identificar as práticas emancipatórias de enfermeiros da Atenção Primária, com a finalidade de contribuir para o aprimoramento do cuidado em saúde. Método Pesquisa social de natureza qualitativa, do tipo estudo de caso. Foram entrevistados os enfermeiros de uma Unidade de Saúde da Família em São Paulo. Resultados Identificou-se que a visita domiciliária, prática protocolar, ampliou seu escopo e identificou determinantes do processo saúde-doença, desencadeando na Unidade de Saúde da Família práticas emancipatórias. Essa ampliação ocorreu porque o projeto de cuidado intencionalizado ampliou o objeto tradicional dos serviços de saúde. Conclusão Advoga-se que as diretrizes das políticas sociais ancorem projetos que tomem como finalidade o aprimoramento das necessidades de saúde e que o cotidiano do trabalho proporcione reflexão e discussão dos projetos de cuidado, para intencionalizar práticas que incidam nos determinantes do processo saúde-doença, tanto quanto nos resultados - a doença expressa no corpo individual. .
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Humanos , Receptores Proteína Tirosina Quinases/genética , Receptores de Fatores de Crescimento/genética , Neoplasias Gástricas/genética , Comunicação Celular , Divisão Celular/efeitos dos fármacos , Linhagem Celular , Meios de Cultivo Condicionados , Fatores de Crescimento Endotelial/metabolismo , Endotélio Vascular/metabolismo , Endotélio Vascular/patologia , Expressão Gênica , Linfocinas/metabolismo , Neovascularização Patológica , Oligodesoxirribonucleotídeos Antissenso/genética , Oligodesoxirribonucleotídeos Antissenso/farmacologia , RNA Mensageiro/genética , RNA Neoplásico/genética , Receptores de Fatores de Crescimento do Endotélio Vascular , Neoplasias Gástricas/irrigação sanguínea , Neoplasias Gástricas/patologia , Células Tumorais Cultivadas , Fator A de Crescimento do Endotélio Vascular , Fatores de Crescimento do Endotélio VascularRESUMO
Objective To analyze the practices of primary care focused on the harmful consumption of drugs. Method This is a qualitative study, developed with a dialectical-critical approach. Data collection was carried out through semi-structured interviews with 10 employees of a basic health unit (UBS). Results The demands are not accepted, and if they go beyond the barriers shaped by the historical absence of health care practices for drug users and moralistic and preconceived ideologies, they are not reinterpreted as health needs; practices that meet these demands and go beyond the barriers are poor; the functionalist approach, which explains drug use as a disease and considers drug users as deviants, supports the few existing practices. Conclusion primary health care is mistakenly focused on addiction; it lacks structural elements of the production process in health and internal dynamics of the working processes that would foster the development of collective practices. .
Objetivo El estudio tiene como objetivo analizar las prácticas de atención primaria dirigidos a lo consumo prejudicial de drogas. Método Se trata de un estudio cualitativo, desarrollado en la perspectiva dialéctica crítica. La recolección de datos se realizó a través de entrevistas semiestructuradas con 10 empleados de una Unidad Básica de Salud. Resultados Muestran que: las demandas no son aceptadas, y si van más allá de las barreras - formadas por la ausencia histórica de la práctica de la atención de salud para los consumidores de drogas y las ideologías morales y preconcebidas -, no son reinterpretados como necesidades de salud; las prácticas que satisfagan esas demandas son pobres; detrás de estas escasas prácticas, está la perspectiva funcionalista, que considera el uso de drogas como una enfermedad y los usuarios de drogas como desviados; los trabajadores valoran la formación clínica y culpan a los usuarios por los problemas que enfrentan. Conclusión Se pode concluir que la atención primaria: es equívoca hacia el objeto de la dependencia; carece de los elementos estructurales del proceso de producción en la salud y las dinámicas internas de los procesos de trabajo que fomenten el desarrollo de las prácticas colectivas. .
Objetivo Analisar as práticas de atenção básica voltadas ao consumo prejudicial de drogas. Método Estudo qualitativo, desenvolvido na perspectiva dialético-crítica. A coleta de dados foi realizada através de entrevistas semiestruturadas com 10 trabalhadores de uma Unidade Básica de Saúde (UBS). Resultados As demandas não são acolhidas e, quando ultrapassam as barreiras - conformadas pela ausência histórica de práticas de atenção à saúde ao usuário de drogas e por ideologias moralistas e preconceituosas -, não são reinterpretadas como necessidades de saúde; as práticas que atendem essas demandas são precárias; a perspectiva funcionalista, que compreende o consumo de drogas como doença e considera usuários de drogas como desviantes, embasa as escassas práticas existentes. Conclusão A atenção básica encontra-se equivocamente voltada para a dependência; carece de elementos estruturais do processo de produção em saúde e da dinamicidade interna aos processos de trabalho, que favoreceriam o desenvolvimento de práticas coletivas. .
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Adulto , Idoso , Feminino , Humanos , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Fatores de Crescimento Endotelial/metabolismo , Linfocinas/metabolismo , Óxido Nítrico Sintase/metabolismo , Neoplasias Gástricas/irrigação sanguínea , Neoplasias Gástricas/metabolismo , Imuno-Histoquímica , Microcirculação/patologia , Estadiamento de Neoplasias , Neovascularização Patológica , Óxido Nítrico Sintase Tipo II , Prognóstico , Neoplasias Gástricas/patologia , Fator A de Crescimento do Endotélio Vascular , Fatores de Crescimento do Endotélio VascularRESUMO
Glioblastoma (GBM), the most frequent and aggressive brain tumor, is characterized by marked angiogenesis directly related to invasiveness and poor prognosis. Hypoxia is considered to be an important stimulus for angiogenesis by inducing hypoxia-inducible factor 1-alpha (HIF-1α) overexpression that activates platelet-derived growth factor (PDGF) and VEGF. The aim of this study is to analyze the expression of PDGF-C, VEGF in endothelial and tumor cells of GBM and their relation to HIF-1α expression. Two hundred and eight GBM cases were studied by tissue microarray immunohistochemical preparation. Expression of HIF-1α, VEGF and PDGF-C was observed in 184 (88.5%), 131 (63%) and 160 (76.9%) tumor cases, respectively. The numbers of vessels were quantified by CD34, PDGF-C, VEGF and CD105 staining, and were in median 20, 16, 5 and 6, respectively. The GBMs that showed positive or negative expression for HIF-1α showed a median vascular density of 30 and 14, respectively, for CD34 (P < 0.015). Positive expression for HIF-1α was correlated with VEGF and PDGF-C expression in tumors (P < 0.001). There was a significant correlation between VEGF and PDGF-C expression in the cytoplasm of GBM tumor cells (P < 0.0001). We showed that VEGF expression in tumor cells was correlated with its expression in blood vessels (P < 0.0001). Endothelial cells with PDGF-C and VEGF positive expression were also positive for CD105 and their nuclei for Ki-67, confirming the neoangiogenic and proliferative influence of VEGF and PDGF-C. VEGF nuclear staining in tumor cells (P = 0.002) as well as nuclear staining for HIF-1α and VEGF (P = 0.005) correlated with survival. In summary, our present findings of the concomitant upregulation of PDGF-C with VEGF in GBM tumor cells and vessels further reinforce the benefit of using combined anti-angiogenic approaches to potentially improve the therapeutic response for GBM.
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Neoplasias Encefálicas/irrigação sanguínea , Neoplasias Encefálicas/metabolismo , Glioblastoma/irrigação sanguínea , Glioblastoma/metabolismo , Linfocinas/metabolismo , Neovascularização Patológica/metabolismo , Fator de Crescimento Derivado de Plaquetas/metabolismo , Fator A de Crescimento do Endotélio Vascular/metabolismo , Adolescente , Adulto , Idoso , Antígenos CD/metabolismo , Neoplasias Encefálicas/mortalidade , Endoglina , Células Endoteliais/metabolismo , Feminino , Glioblastoma/mortalidade , Humanos , Subunidade alfa do Fator 1 Induzível por Hipóxia/metabolismo , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Receptores de Superfície Celular/metabolismo , Análise de Sobrevida , Adulto JovemRESUMO
The rationale of this study was to use several immunological assays to investigate the reactivity of immunoglobulin binding protein (IBP) to immunoglobulins from various avian and mammalian species. The IBP studied were Staphylococcal protein A (SpA), Streptococcal protein G (SpG), Peptostreptococcal protein L (SpL) and recombinant protein LA (SpLA). The various immunological techniques used were double immunodiffusion (Ouchterlony technique) that tested positive high protein reactivities, direct and competitive enzyme-linked immunosorbent assays (ELISAs) that tested moderate and low positive protein binding capacities, respectively. In addition to sandwich ELISAs, immunoblot analyses and Ig-purification by SpA-affinity chromatography, which were sensitive tests and helpful in the screening and confirmatory tests were also used. The Ouchterlony technique showed that compared to the other proteins, SpLA had the highest range of reactivity with animal sera and purified immunoglobulins while SpL was least reactive. With the direct ELISA, SpL reacted with the raccoon sera, rabbit IgG and with IgY from bantam hens and pigeons. While with the direct ELISA, SpA reacted with sera from skunk, coyote, raccoon, mule, donkey and human. The sandwich ELISA revealed high reactivity of both SpG and SpLA with mammalian sera titres ranging from 1:32 (raccoon serum) to 1:1024 (mule and donkey sera). These results suggest that IBP can be used for the detection of immunoglobulin using various immunological assays and this is important for the diagnosis of infectious diseases in animal and bird populations studied and in the purification of immunoglobulins.
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Cromatografia de Afinidade/métodos , Doenças Transmissíveis/diagnóstico , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática/métodos , Imunoglobulinas/imunologia , Linfocinas/imunologia , Animais , Bactérias/classificação , Bactérias/imunologia , Proteínas de Bactérias/classificação , Proteínas de Bactérias/imunologia , Aves , Doenças Transmissíveis/imunologia , Humanos , Mamíferos , Ligação Proteica/imunologia , Coelhos , Proteínas Recombinantes/imunologiaRESUMO
Candida albicans causes opportunistic systemic infections with high mortality (30%-50%). Despite significant nephrotoxicity, amphotericin (AmB) is still used for the treatment of this serious fungal infection. Therefore, alternative treatments are urgently needed. Dialyzable leukocyte extracts have been used successfully to treat patients with mucocutaneous candidiasis, but their effectiveness in systemic candidiasis has not been evaluated. In this study, low-dose AmB (0.1 mg/kg) plus 10 pg of murine dialyzable spleen extracts (mDSE) were tested in a systemic candidiasis mouse model. Survival, tissue fungal burden, kidney damage, kidney cytokines, and serum levels of IL-6 and hepcidin were evaluated. Our results showed that the combined treatment of low-dose AmB plus mDSE improved survival and reduced kidney fungal burden and histopathology; these effects correlated with increased kidney concentration of IFN- γ and TGF- ß 1, decreased levels of TNF- α , IL-6, and IL-10, as well as high levels of systemic IL-6 and hepcidin. Low-dose AmB and mDSE synergized to clear the infectious agent and reduced tissue damage, confirming the efficacy of a low dose of AmB, which might decrease the risk of drug toxicity. Further studies are necessary to explore these findings and its implications in future therapeutic approaches.
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Anfotericina B/administração & dosagem , Antifúngicos/administração & dosagem , Candidíase/tratamento farmacológico , Linfocinas/administração & dosagem , Baço/metabolismo , Animais , Candidíase/mortalidade , Candidíase/patologia , Citocinas/biossíntese , Modelos Animais de Doenças , Feminino , Hepcidinas/biossíntese , Interleucina-6/biossíntese , Rim/metabolismo , Rim/microbiologia , CamundongosRESUMO
Proteoliposomes purified from the Outer Membrane of Neisseria meningitidis B, have been successfully used as core for adjuvants and vaccine formulations. We have tried to increase their structural definition and to conserve their efficacy and stability avoiding the addition of the aluminum hydroxide to the final formulation. Liposomal particle systems were prepared from components of defined molecular structure, such as a Neisseria meningitidis B protein complex, extracted and purified without forming vesicle structures. Liposomes were prepared from a mixture of dioleoyl phosphatidyl serine and cholesterol, using the classical dehydration-rehydration method. Transmission Electron Microscopy (TEM) was used to characterize the liposomes. BALB/c mice were used for animal testing procedures. Analysis of specific IgG response, serum bactericidal activity as well as DTH reaction was carried out. Isolation and purification of mRNA and real-time PCR, was performed to determine the dominating Th lymphokine pattern. The new antimeningococcal formulation without aluminum hydroxide prepared with components of defined molecular structure assembled itself into Neoproteoliposomes (NPL) ranging from 50 to 70 nm in diameter. The extraction and purification of selected membrane proteins to provide the antigen for this new formulation (PD-Tp), as well as the NPL-formulation favors a Th1 response pattern, suggested by the higher percentages of DTH, increased expression of proinflamatory lymphokine mRNAs when administered by intramuscular and intranasal routes. It stimulates a systemic bactericidal antibody response against Neisseria meningitidis B and immunologic memory similar to the Cuban VA-MENGOC-BC vaccine, even at lower dosages and is less reactogenic at the injection site in comparison with the formulation with aluminum hydroxide. This new adjuvant formulation could be applicable to the development of new and improved vaccines against meningococcal disease, and eventually as modulators of the immune response against other diseases.
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Adjuvantes Imunológicos , Infecções Meningocócicas/imunologia , Infecções Meningocócicas/prevenção & controle , Vacinas Meningocócicas/imunologia , Neisseria meningitidis Sorogrupo B/imunologia , Proteolipídeos/imunologia , Células Th1/imunologia , Adjuvantes Imunológicos/administração & dosagem , Hidróxido de Alumínio , Animais , Anticorpos Antibacterianos/imunologia , Antígenos de Bactérias/imunologia , Proteínas da Membrana Bacteriana Externa/imunologia , Hipersensibilidade Tardia/imunologia , Imunoglobulina G/imunologia , Linfocinas/biossíntese , Linfocinas/imunologia , Vacinas Meningocócicas/administração & dosagem , Camundongos , Camundongos Endogâmicos BALB C , Proteolipídeos/administração & dosagem , RNA Mensageiro/análiseRESUMO
The B subunit of Escherichia coli heat-labile enterotoxin (LTB) acts as efficient mucosal carrier for conjugated antigens. We expressed two heterologous proteins using E. coli as a host: a hybrid consisting of LTB and the A, B and C domain of synapsin (LTBABC) and the separated ABC peptide of this synaptic protein. Refolded LTBABC and LTB bound to the GM1 receptor and internalized into CHO-K1(GM1+) cells. LTBABC showed enhanced solubility and cell binding ability respect to the former hybrid LTBSC. Several oral doses of LTBABC were administered to rats with experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) from induction to the acute stage of the disease. This treatment decreased disease severity, delayed type hypersensitivity reaction and lymph node cell proliferation stimulated by myelin basic protein. Amelioration of EAE was also associated with modulation of the Th1/Th2 cytokine ratio, increased TGF-ß secretion in mesenteric lymph nodes as well as expansion of CD4(+)CD25(+)Foxp3(+) regulatory T cell population. These results indicate that the fusion protein LTBABC is suitable for further exploration of its therapeutic effect on EAE development.
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Toxinas Bacterianas/uso terapêutico , Encefalomielite Autoimune Experimental/tratamento farmacológico , Enterotoxinas/uso terapêutico , Proteínas de Escherichia coli/uso terapêutico , Sinapsinas/uso terapêutico , Animais , Toxinas Bacterianas/química , Toxinas Bacterianas/genética , Células CHO/efeitos dos fármacos , Células CHO/metabolismo , Bovinos , Cricetinae , Avaliação Pré-Clínica de Medicamentos , Endocitose , Enterotoxinas/química , Enterotoxinas/genética , Proteínas de Escherichia coli/química , Proteínas de Escherichia coli/genética , Feminino , Gangliosídeo G(M1)/metabolismo , Ativação Linfocitária/efeitos dos fármacos , Linfocinas/metabolismo , Masculino , Proteína Básica da Mielina/imunologia , Proteína Básica da Mielina/toxicidade , Fragmentos de Peptídeos/química , Fragmentos de Peptídeos/uso terapêutico , Desnaturação Proteica , Dobramento de Proteína , Estrutura Terciária de Proteína , Distribuição Aleatória , Ratos , Ratos Wistar , Proteínas Recombinantes de Fusão/química , Proteínas Recombinantes de Fusão/uso terapêutico , Método Simples-Cego , Relação Estrutura-Atividade , Sinapsinas/química , Sinapsinas/genética , Linfócitos T Reguladores/efeitos dos fármacos , Linfócitos T Reguladores/imunologiaRESUMO
A live system to release heterologous antigens using an attenuated Salmonella strain was developed. We transformed Salmonella typhimurium LVR03 (S. LVR03) with a recombinant pTECH2 vector encoding 0, 1, 2, and 4 tandem copies of an imunogenic peptide of bovine herpes virus-1 (BoHV-1) glycoprotein D (gD). The system used yielded peptides fused to the non-toxic C fragment of the tetanus toxin (TetC), which has been shown to have adjuvant properties. Inoculation of BALB/c mice with the transformed Salmonella strains gave rise to a mild self-limited infection, with primary replication of bacteria occurring in Peyer's patches, even when the bacteria was administered intranasally. Humoral and cellular immune responses directed against the BoHV-1 antigens were evaluated after oral or intranasal administration of the recombinant bacteria. The results showed that the S. LVR03-dimer vaccine induced specific humoral (IgG in serum and IgG(1) and IgA in saliva), and cellular immune responses (lymphoproliferation and lymphokine secretion), against not only the selected peptide and whole gD, but also against BoHV-1, when administered intranasally. This is the first time Salmonella has been used as an expression vector to induce immunity against BoHV-1. This work demonstrates the feasibility of using this antigen-release system and encourages future experimentation with a bovine experimental model.
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Infecções por Herpesviridae/prevenção & controle , Herpesvirus Bovino 1/imunologia , Peptídeos/imunologia , Sequências de Repetição em Tandem/genética , Proteínas Virais/imunologia , Animais , Anticorpos Antivirais/sangue , Bovinos , Linhagem Celular , Vetores Genéticos , Infecções por Herpesviridae/imunologia , Infecções por Herpesviridae/virologia , Herpesvirus Bovino 1/metabolismo , Ativação Linfocitária , Linfocinas/metabolismo , Camundongos , Camundongos Endogâmicos BALB C , Peptídeos/genética , Peptídeos/metabolismo , Salmonella typhimurium/genética , Salmonella typhimurium/imunologia , Salmonella typhimurium/metabolismo , Proteínas Virais/genética , Proteínas Virais/metabolismo , Vacinas Virais/administração & dosagem , Vacinas Virais/genética , Vacinas Virais/imunologia , Vacinas Virais/metabolismoAssuntos
Humanos , Asma/imunologia , Fenômenos Fisiológicos Respiratórios/imunologia , Hipersensibilidade a Drogas/etiologia , /imunologia , Linfocinas/imunologia , Propranolol/efeitos adversos , Sons Respiratórios/etiologia , Broncoconstritores/efeitos adversos , Sistema Imunitário , Inflamação/etiologiaRESUMO
O presente relato de caso tem como finalidade chamar a atenção de doença grave que frequentemente é confundida com septicemia, no entanto o mecanismo etiológico é decorrente de defeitos genéticos ou associados à resposta imunológica exagerada, decorrente de ação citotóxica de linfócitos T CD8 e histiócitos, acarretando proliferação clonal e ativação de células natural killer (NK). Uma tempestade de linfocinas acontece e como consequência é iniciada uma incontrolável hemofagocitose de todos os elementos sanguíneos, terminando pela infecção secundária do organismo por ausência de destruição de patógenos. A maioria dos casos termina pela morte do paciente; no entanto, relatamos nesse caso a possibilidade de incluirmos a plasmaferese como forma de retirar as linfocinas circulantes, razão do estímulo à destruição celular. O tratamento concomitante com alta dose de imunoglobulina endovenosa também foi realizado
The purpose of the present case report is to call attention to a serious disease that is often mistaken with septicemia, although its etiological mechanism results from genetic defects or is associated with an immune over-reaction, resulting from cytotoxic action of CD8 T lymphocytes and histiocytes, causing clonal proliferation and activation of natural killer (NK) cells. There occurs a storm of lymphokines and, as a consequence, an uncontrollable hemophagocytosis of all blood elements, which leads to secondary infection of the organism because of absence of pathogens destruction. Although most of the cases end up in death, in this case we report the possibility of including plasmapheresis as a way to remove the circulating lymphokines, the reason for stimulation of cell destruction. Co-treatment with high dose of intravenous immunoglobulin was performed too
Assuntos
Linfo-Histiocitose Hemofagocítica , Imunoglobulinas Intravenosas/uso terapêutico , Linfocinas/efeitos adversos , Linfocinas/intoxicação , PlasmafereseRESUMO
The bacillus Calmette-Guérin (BCG) is regarded as the most successful immunotherapy against superficial bladder carcinoma recurrences to date. BCG intravesical therapy for superficial bladder cancer has shown its efficacy and advantage over classical therapeutic strategies. This efficacy is based on complex and long lasting immune activation. The initial step is the binding of mycobacteria to the urothelial lining, which depends on the interaction of a fibronectin attachment protein on the bacteria surface with fibronectin in the bladder wall. Granulocytes and other immunocompetent mononuclear cells became attracted to the bladder wall and a cascade of proinflammatory cytokines sustains the immune response. In the bladder wall a largely TH1 based cytokine milieu and granuloma-like cellular foci are established. Within this scenario, the most important effector mechanisms might be the direct antitumor activity of interferons and the cytotoxic activity of NK cells. Current treatment consists of an induction phase of 6 weeks and a maintenance dose schedule of 3 weeks every three months up to 36. The majority of patients present adverse events related to dose administration due to bladder inflammatory response and on only a few occasions, there are mayor complications like granulomatous prostatitis. Among all the neoplasms only in superficial bladder cancer the BCG is proved to be effective.
Assuntos
Adjuvantes Imunológicos/uso terapêutico , Vacina BCG/uso terapêutico , Carcinoma de Células de Transição/tratamento farmacológico , Neoplasias da Bexiga Urinária/tratamento farmacológico , Adjuvantes Imunológicos/efeitos adversos , Administração Intravesical , Vacina BCG/efeitos adversos , Aderência Bacteriana , Carcinoma de Células de Transição/imunologia , Cistite/etiologia , Citotoxicidade Imunológica , Feminino , Humanos , Células Matadoras Naturais/imunologia , Linfócitos do Interstício Tumoral/imunologia , Linfocinas/metabolismo , Masculino , Modelos Imunológicos , Mycobacterium bovis , Recidiva Local de Neoplasia/prevenção & controle , Recidiva Local de Neoplasia/terapia , Prostatite/etiologia , Células Th1/metabolismo , Neoplasias da Bexiga Urinária/imunologiaRESUMO
The bacillus Calmette-Guérin (BCG) is regarded as the most successful immunotherapy against superficial bladder carcinoma recurrences to date. BCG intravesical therapy for superficial bladder cancer has shown its efficacy and advantage over classical therapeutic strategies. This efficacy is based on complex and long lasting immune activation. The initial step is the binding of mycobacteria to the urothelial lining, which depends on the interaction of a fibronectin attachment protein on the bacteria surface with fibronectin in the bladder wall. Granulocytes and other immunocompetent mononuclear cells became attracted to the bladder wall and a cascade of proinflammatory cytokines sustains the immune response. In the bladder wall a largely TH1 based cytokine milieu and granuloma-like cellular foci are established. Within this scenario, the most important effector mechanisms might be the direct antitumor activity of interferons and the cytotoxic activity of NK cells. Current treatment consists of an induction phase of 6 weeks and a maintenance dose schedule of 3 weeks every three months up to 36. The majority of patients present adverse events related to dose administration due to bladder inflammatory response and on only a few ocassions, there are mayor complications like granulomatous prostatitis. Among all the neoplasms only in superficial bladder cancer the BCG is proved to be effective.
El bacilo de Calmette-Guérin (BCG) es considerado como la inmunoterapia más exitosa en contra del carcinoma de vejiga superficial recidivante hasta la fecha. La terapia intravesical con el BCG para el cáncer superficial de vejiga ha mostrado su eficacia y ventaja sobre otras estrategias terapéuticas; esta eficacia está basada en una compleja y larga duración de la activación inmunológica. El paso inicial es la unión de la micobacteria al urotelio, la cual depende de la interacción con la fibronectina de la bacteria con la fibronectina del urotelio. Los granulocitos y otras células mononucleares inmunocompetentes son atraídos hacia la pared vesical, así activando una cascada inmunológica a través de secreción de diversas citocinas, quienes estimulan a las células asesinas naturales (NK) activadas por el BCG, las cuales son capaces de diferenciar células neoplásicas y del epitelio urinario normal. En la pared vesical se encuentra un medio ambiente de citocinas principalmente del tipo TH1 y se forman focos celulares similares a granulomas. Dentro de este escenario los mecanismos efectores más importantes parecen ser la actividad antitumoral directa de los interferones y la actividad citotóxicas de las células NK. El tratamiento actual consiste en la administración intravesical del bacilo en una primera fase de inducción de seis semanas y posteriormente dosis de mantenimiento cada tres meses hasta los 36 meses. La mayoría de los pacientes presentan efectos adversos locales secundarios a la reacción inflamatoria y en un porcentaje muy pequeño se presentan complicaciones mayores como prostatitis y orquiepididimitis granulomatosa. De entre todas estas neoplasias sólo en el cáncer superficial de vejiga se han demostrado resultados satisfactorios con el empleo del BCG.
Assuntos
Feminino , Humanos , Masculino , Adjuvantes Imunológicos/uso terapêutico , Vacina BCG/uso terapêutico , Carcinoma de Células de Transição/tratamento farmacológico , Neoplasias da Bexiga Urinária/tratamento farmacológico , Administração Intravesical , Adjuvantes Imunológicos/efeitos adversos , Aderência Bacteriana , Vacina BCG/efeitos adversos , Citotoxicidade Imunológica , Carcinoma de Células de Transição/imunologia , Cistite/etiologia , Células Matadoras Naturais/imunologia , Linfócitos do Interstício Tumoral/imunologia , Linfocinas , Modelos Imunológicos , Mycobacterium bovis , Recidiva Local de Neoplasia/prevenção & controle , Recidiva Local de Neoplasia/terapia , Prostatite/etiologia , Células Th1 , Neoplasias da Bexiga Urinária/imunologiaRESUMO
A imunidade celular do hospedeiro e quem determina a evoluçao e o quadro clinico do paciente, tanto na hanseniase como na infecçao pelo virus da imunodeficiencia adquirida (HIV). O virus HIV, assim como o Micobacterium leprae (M. leprae) sao antigenos intracelulares que estimulam a resposta imune celular e o perfil Th1. Os linfocitos T (LT) reconhecem esses antigenos quando apresentados juntamente com as moleculas do complexo HLA na superficie da celula apresentadora de antigeno (APC), desencadeando a resposta imune especifica. Muitos estudos tem sido realizados na tentativa de associar o complexo HLA com as diversas patologias. Na hanseniase, o complexo HLA tem sido amplamente estudado, na tentativa de elucidar os mecanismos que levam ao direcionamento da forma clinica, uma vez que estes alelos atuam de forma direta na resposta imune atraves da apresentaçao do peptideo antigenico para celula T. Estudos realizados com os alelos HLA de classe I apresentaram resultados controversos enquanto que a maioria das pesquisas de classe II, os resultados sao mais concordantes revelando associaçoes positivas dos alelos HLA-DR2 e HLA-DR3, com a forma tuberculoide (HT) e do alelo HLA-DQ1, com a forma virchoviana (HV). No HIV os alelos HLA parecem estar mais fortemente associados a deterioraçao imunologica que com a manifestaçao clinica da doença. Varios estudos associam consistentemente os alelos de classe I, HLA-B35 e HLA-Cw4 com a aceleraçao da progressao para a aids enquanto os alelos HLA-A1, HLA-B8, HLA-B27, HLA-Cw7 e os de classe II, HLA-DR3 e HLA-DQ2 estao associados a progressao lenta...