Expression of the protein serum amyloid A in response to Aspergillus fumigatus in murine models of allergic airway inflammation / Expresión de la proteína amiloide A sérica como respuesta a Aspergillus fumigatus en modelos murinos de inflamación alérgica de las vías respiratorias

ABSTRACT

Background. Serum amyloid A (SAA) is an acute phase protein that is elevated in blood during inflammation. The role of this protein in allergic diseases of airways remains unclear. Aims. The objective of this study was to evaluate the SAA in blood, lung and bronchial cells in a murine model of bronchial hypersensitivity to Aspergillus fumigatus. Methods. To achieve this purpose, different groups of 5-month-old mice were housed in cages containing hay bedding that was contaminated with A. fumigatus and were kept in an isolation room for 16 days to allow for the induction of allergic airway inflammation. Subsequently, the mice were then exposed once again to Aspergillus spores at 0, 2, 8, 24 and 72 h, and they were bled to acquire serum and sacrificed to obtain bronchoalveolar lavage fluid (BALF) or lung tissues for analysis. SAA levels were measured in lung, serum and BALF by dot blot assay and RT-PCR (reverse transcription polymerase chain reaction). Results. The results indicated that SAA protein levels increased in both serum and lung within 2–24 h after mice were exposed to Aspergillus spores. Moreover, the SAA mRNA expression levels in the lungs and BALF cells demonstrated the same trend that was observed for the protein levels through the dot blot assay; in particular, SAA mRNA levels increased within the first hour after mice were exposed to A. fumigatus. Conclusions. In this allergic airway model, we conclude that A. fumigatus can induce an acute inflammatory response in the airways through the stimulation of the SAA protein, increasing its levels in serum, lung tissue and BALF samples during the early hours of exposure of mice that have been sensitised for this fungus (AU)

RESUMEN

Antecedentes. La proteína amiloide A sérica (AAS) es un reactante de fase aguda cuyos valores sanguíneos aumentan durante los procesos inflamatorios agudos. Todavía no se ha dilucidado el papel que desempeña en las enfermedades alérgicas de las vías respiratorias. Objetivos. El objetivo del presente estudio fue examinar los valores de AAS en sangre, tejido pulmonar y células bronquiales en un modelo murino de hipersensibilidad bronquial frente a Aspergillus fumigatus. Métodos. Diferentes grupos de ratones de 5 meses de vida fueron alojados en jaulas cuyos lechos de paja estaban contaminados por A. fumigatus y se mantuvieron en una sala de aislamiento durante 16 días para permitir la inducción de inflamación alérgica de las vías respiratorias. Tras este período de inducción, a las 0, 2, 8, 24 y 72 h los animales se expusieron de nuevo a esporas de Aspergillus. En cada tiempo de reexposición se obtuvieron muestras sanguíneas de los animales y, acto seguido, fueron sacrificados para obtener líquido de lavado broncoalveolar y muestras de tejido pulmonar. La concentración de AAS se analizó mediante técnica de hibridación del ADN (Southern) y reacción en cadena de la polimerasa-retrotranscriptasa en muestras de suero, tejido pulmonar y células de líquido de lavado broncoalveolar. Resultados. Los resultados del presente estudio demuestran que, al cabo de 2-24 h de la exposición a A. fumigatus aumentaron los valores de proteína AAS en muestras de suero y tejido pulmonar. Además, en células de líquido de lavado broncoalveolar y muestras de tejido pulmonar los niveles de expresión de ARNm de AAS demostraron la misma tendencia, y, en particular, aumentaron al cabo de la primera hora de exposición a las esporas de A. fumigatus. Conclusiones. En este modelo murino de alergia de las vías respiratorias, concluimos que A. fumigatus puede inducir una respuesta inflamatoria aguda de las vías respiratorias a través de la estimulación de la proteína AAS, aumentando su concentración sérica en muestras de tejido pulmonar y de líquido de lavado broncoalveolar durante las primeras horas de exposición de ratones sensibilizados frente a este hongo (AU)