Ten years of Taylorella equigenitalis ring trial results comparing culture and polymerase chain reaction.

ABSTRACT

Taylorella equigenitalis, the cause of contagious equine metritis (CEM), can be detected by culture but in recent years polymerase chain reaction (PCR) has also been used. In 2008, the World Organisation for Animal Health (OIE) Reference Laboratory for CEM in the United Kingdom set up a ring trial for laboratories to assess their ability to identify T. equigenitalis in laboratory-prepared samples because the identification of T. equigenitalis in the laboratory was recognised to be difficult. Freeze-dried culture suspensions in various combinations of any of T. equigenitalis, Taylorella asinigenitalis, other typical equine contaminant organisms, or no organism were used. All laboratories provided culture results and some also gave PCR results. The results reported here cover the ten years since inception and look at the ability to identify T. equigenitalis under ideal laboratory conditions, a necessity to be able to detect its presence in equine genital samples. The detection rate was very high by both methods. The accuracy was not significantly different between the culture and PCR methods for pure T. equigenitalis samples. For T. equigenitalis mixed with contaminants, culture missed about 2% (p = 0.02) compared with PCR, which was over 99% accurate. Difficulty in differentiating T. asinigenitalis from T. equigenitalis was apparent in a number of laboratories for both culture and PCR in 2008 but was less evident in 2016. It was also noted that culture results from laboratories that also tested by PCR had around 4% higher detection rates (p < 0.05) of T. equigenitalis than those that only used culture.

La détection de Taylorella equigenitalis, l'agent causal de la métrite contagieuse équine, peut être réalisée par culture, mais aussi, depuis quelques années, par amplification en chaîne par polymérase (PCR). En 2008, le Laboratoire de référence de l'Organisation mondiale de la santé animale (OIE) pour cette maladie au Royaume-Uni a conçu une série d'essais comparatifs inter-laboratoires visant à évaluer la capacité des laboratoires à identifier des échantillons préparés de T. equigenitalis, compte tenu de la difficulté avérée de cette identification au laboratoire. Les essais ont porté sur des cultures lyophilisées en suspension contenant, dans diverses combinaisons, T. equigenitalis, Taylorella asinigenitalis, d'autres micro-organismes pathogènes des équidés, ou aucun agent pathogène. Tous les laboratoires participants ont communiqué les résultats des mises en culture et certains ont également transmis les résultats obtenus par PCR. Les résultats rapportés par les auteurs couvrent les dix années écoulées depuis le lancement des essais et visent à déterminer la capacité à identifier T. equigenitalis dans des conditions de laboratoire idéales, exigence essentielle pour pouvoir détecter la présence de cette bactérie à partir de prélèvements génitaux d'équidés. Le taux de détection s'est révélé très élevé pour chacune des deux méthodes. Il n'a pas été observé de variation significative entre l'exactitude de la mise en culture et celle de la PCR lorsque les prélèvements ne contenaient que T. equigenitalis. S'agissant de suspensions où T. equigenitalis était mélangée à d'autres agents pathogènes, les résultats font état d'environ 2 % (p = 0,02) d'échecs de l'identification par culture, tandis que l'exactitude de la PCR était de 99 %. En 2008, plusieurs laboratoires ont manifestement eu des difficultés à différencier T. asinigenitalis de T. equigenitalis aussi bien en culture que par PCR, mais cette difficulté était moins perceptible en 2016. Il a également été constaté que les identifications après culture effectuées par les laboratoires qui testaient aussi par PCR se traduisaient par un taux de détection de T. equigenitalis supérieur d'environ 4 % (p < 0,05) par rapport aux laboratoires qui ne pratiquaient que la mise en culture.

RESUMEN

Taylorella equigenitalis, patógeno causante de la metritis contagiosa equina, puede ser detectado por cultivo, pero en los últimos años también se viene utilizando la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR). En 2008, ante la sabida dificultad que presenta la identificación en laboratorio de T. equigenitalis, el Laboratorio de Referencia de la Organización Mundial de Sanidad Animal (OIE), para esta enfermedad sito en el Reino Unido, puso en marcha una serie de pruebas de competencia para evaluar la aptitud de diferentes laboratorios para detectar la presencia de T. equigenitalis en muestras preparadas en laboratorio, empleando al efecto suspensiones de cultivo liofilizado con diversas combinaciones en las que estaban presentes T. equigenitalis, Taylorella asinigenitalis, otros patógenos equinos típicos o ningún microorganismo en absoluto. Todos los laboratorios comunicaron los resultados de las técnicas de cultivo y algunos de ellos también proporcionaron los resultados obtenidos por PCR. Los resultados aquí expuestos cubren los diez años transcurridos desde el inicio de las pruebas y dan cuenta de la capacidad para identificar a T. equigenitalis en condiciones de laboratorio idóneas, elemento imprescindible para poder detectar su presencia en muestras genitales equinas. Con ambos métodos se obtenía una tasa de detección muy elevada, sin que hubiera una diferencia de exactitud significativa entre el cultivo y la PCR en el caso de muestras puras de T. equigenitalis. Cuando este microorganismo estaba mezclado con contaminantes, «escapaban¼ al método de cultivo alrededor de un 2% (p = 0,02) de las muestras, frente a la exactitud del 99% que deparaban las técnicas de PCR. Los resultados obtenidos por una serie de laboratorios en 2008 ponían de manifiesto una evidente dificultad para distinguir entre T. asinigenitalis y T. equigenitalis, ya fuera por cultivo o por PCR, dificultad que resultaba menos obvia en 2016. También se observó que las tasas de detección en cultivo de T. equigenitalis obtenidas por laboratorios que también analizaban las muestras por PCR eran alrededor de un 4% superiores (p < 0,05) a las de laboratorios que empleaban únicamente el método de cultivo.