Avaliação in vitro dos efeitos do risedronato associado à cobalamina sobre células osteoblásticas / In vitro evaluation of effects associated with cobalamin risedronate on osteoblastic

RESUMO

O aumento da população idosa mundial e da incidência de osteoporose tem ocasionado um grande número de pessoas sendo submetidas a tratamentos com bisfosfonatos, bem como o uso do risedronato. O complexo B tem sido utilizado na prevenção de osteopenia e osteoporose por provocar aumento na densidade mineral óssea. Este estudo avaliou a ação do risedronato e da cobalamina, seus efeitos quando associados, e as diferenças nos resultados em ambas as administrações medicamentosas sobre células osteoblásticas. Células MC3T3 foram cultivadas em meio -MEM e -MEM suplementado com fatores mineralizantes, ácido ascórbico e ?-glicerofosfato dissódico, e tratadas com as drogas avaliadas risedronato, cobalamina, e risedronato associado à cobalamina na concentração de 10-3M. A proliferação celular e formação de nódulos de cálcio e fosfato foram avaliados após 24 horas, 48 horas, 72 horas, 5 dias e 7 dias, sendo as formações de cálcio e fosfato avaliadas através dos métodos de vermelho de Alizarina e von Kossa, respectivamente. Os resultados revelaram que o risedronato, a cobalamina e a associação de ambos não provocou alterações nas células osteoblásticas tanto em seu crescimento como na formação dos nódulos de cálcio e fosfato. O teste ANOVA mostrou que houve diferença entre os tempos e meios analisados (P< 0,05). O teste de Tukey comprovou a diferença entre os tempos de 24 horas, para os demais tempos em relação às células viáveis e não viáveis, demonstrando que quanto maior o tempo maior o crescimento celular. Entre os meios, o -MEM obteve maior curva de crescimento na proliferação celular. As culturas mantiveram-se estáveis na adição das drogas analisadas, na avaliação da curva de crescimento, e na formação dos nódulos minerais, quando comparadas ao grupo controle. Concluiu-se que a utilização do risedronato, da cobalamina e associação de ambas em cultura de células osteoblásticas, não causam alterações no crescimento e formação de nódulos de cálcio e fosfato

ABSTRACT

The increase on world’s elderly population and on the incidency of osteoporosis have caused a great number of people submitting to the bisphosphonate treatment, such as the risedronate. The B complex has been used on osteopenia and osteoporosis prevention by increasing the mineral bone density. This study evaluated the action of risenodrate and cobalamina, and this effects when associated, when administrated on osteoblastics cells. The MC3T3 cells were cultured in -MEM medium and also osteogenic medium -MEM ascorbic acid - β-glicerophosphate dissodium, and supplemented with risedronate, cobalamina, and risedronate associated to the cobalamina on the proportion of 10-3 M. The cell proliferation and nodules formation were evaluated on 24 hours, 48 hours, 72 hours, 5 days and 7 days. The calcium and phosphate formations were evaluated Alizarina and von Kossa methods, respectively. The results showed that both the risedronate, cobalamin plus their association did not cause alterations on the osteoblastics cells neither on their growth nor on the calcium and phosphate nods. The ANOVA test showed that a difference ocurred among the time and the mediums analysed (P< 0,05). The Tukey test proved a difference among the 24 hours period to the other time periods regarding the relation of viable and non-viable cells, showing that the bigger the time period is, the bigger are the cells growth. Regarding to the medium, the -MEM had the highest growth curve in cell proliferation. The cultures kept estable receveing the addition of the analysed drugs when compared to the control group, on the growth curve evaluation, and mineral nodules formation. The conclusion reached was that using the risedronate, the cobalamin, and both drugs associated on the osteoblastics cells cultures do not cause alterations on its growth and on the calcium and phosphate nodules formation