Caracterización de las mutaciones en el gen rpoß asociadas a la resistencia a rifampicina en pacientes con tuberculosis pulmonar / Description of gene rpoß mutations associated with rifampicin resistance in patients with pulmonary tuberculosis

RESUMEN

Antecedentes la resistencia a rifampicina en M. tuberculosis involucra mutaciones en el gen rpoß que codifica a la subunidad ß de la ARN polimerasa. Objetivo: Identificar las mutaciones del gen rpoß, en cepas de M. tuberculosis asosciadas con resistencia a rifampicina aisladas de la Subregión de Salud Lima Norte, Perú. Materiales y métodos: Se cultivó en Lowestein - Jenseen 73 muestras de esputo de pacientes con tuberculosis pulmonar. A 62, con más de 10 colonias por tubo, se les comprobó susceptibilidad a isoniazida, rifampicina, estreptomicina y etambutol. Se realizó la extracción de ADN por PCR, clonación en el vector pGEM-T, transformación, selección de clonas recombinantes y secuenciamiento del ADN plasmídico para la determinación de los polimorfismos del gen rpoß. Resultados: 52 (83,9 por ciento) cepas fueron resistentes a rifampicina (Rif) y 10 (16,1 por ciento) susceptibles (Rif). Se encontró alteraciones en el gen rpoß en 51 de 52 cepas Rif. Se identificaron 20 mutaciones. Las mutaciones más frecuentes fueron encontradas en los codones Ser-531 (62,7 por ciento), His-526 (15,7 por ciento), Asp-516 (11,8 por ciento) y Gln-513 (5,9 por ciento). No se observó mutación alguna en las 10 cepas Rif. 94,2 por ciento de nuestras cepas Rif fueron también resistentes a isoniazida. Conclusiones: Se encontraron mutaciones en el gen rpoß de casi todas las cepas Rif; asimismo, casi todas las cepas Rif fueron también resistentes a isoniazida.