Análise de diferentes primers utilizados na PCR visando ao diagnóstico da tuberculose no Estado do Amazonas / Analysis of different primers used in the PCR method: diagnosis of tuberculosis in the State of Amazonas, Brazil
J. bras. pneumol
; J. bras. pneumol;30(4): 343-349, jul.-ago. 2004. tab, graf
Article
in Pt
| LILACS
| ID: lil-383144
Responsible library:
BR674.1
RESUMO
INTRODUÇAO:
Há diferentes primers sendo testados para a detecção do DNA do Mycobacterium tuberculosis. A acuidade da reação em cadeia da polimerase (PCR) depende da existência da seqüência alvo no bacilo e de os testes serem realizados em cepas isoladas ou em amostras clínicas.OBJETIVO:
Verificar a presença das seqüências de DNA alvo mais relatadas na literatura para o diagnóstico da tuberculose em amostras clínicas usando como controle positivo as respectivas cepas de M. tuberculosis isoladas.MÉTODO:
Oitenta e uma amostras clínicas de pacientes com suspeita de tuberculose foram submetidas à baciloscopia e cultivo. A técnica de PCR foi realizada nas amostras clínicas e cepas isoladas com primers específicos para os seguintes alvos IS6110, 65 kDa, 38 kDa e MPB64.RESULTADOS:
Em 24 amostras com baciloscopia e cultivo negativos, a PCR também foi negativa com todos os primers testados. Em 19 amostras com baciloscopia positiva e nas cepas isoladas obteve-se 100 por cento de resultados positivos nas PCR, exceto nas PCR em amostras clínicas com os primers para a seqüência MPB64 (89,4 por cento). Em 38 amostras com baciloscopia negativa e cultivo positivo, as PCR tiveram resultados variáveis, sendo que os primers específicos que amplificam o fragmento de 123 pb da seqüência IS6110 foram os que forneceram os maiores percentuais de positividade (92,1 por cento), concordância diagnóstica (0,9143), co-positividade (94,7 por cento) e co-negatividade (100 por cento).CONCLUSAO:
As seqüências IS6110, 38 kDa, MPB64 e 65 kDa foram encontradas no genoma de todas as cepas de M. tuberculosis isoladas desses pacientes do Estado do Amazonas. O protocolo utilizado no processamento das amostras clínicas e os primers específicos utilizados para amplificação do fragmento de 123 pb da seqüência IS6110 demonstraram maior eficiência no diagnóstico da tuberculose pulmonar (paucibacilar) em comparação com a literatura.
Full text:
1
Collection:
01-internacional
Database:
LILACS
Main subject:
Tuberculosis, Pulmonary
/
DNA, Bacterial
/
DNA Primers
/
Mycobacterium tuberculosis
Type of study:
Diagnostic_studies
/
Guideline
Limits:
Humans
Country/Region as subject:
America do sul
/
Brasil
Language:
Pt
Journal:
J. bras. pneumol
Journal subject:
PNEUMOLOGIA
Year:
2004
Document type:
Article
/
Project document
Country of publication:
Brazil