Evaluation of antibody responses in american visceral leishmaniasis by ELISA and immunoblot

RESUMO

A leishmaniose visceral americana é uma doença importante entre crianças do nordeste do Brasil. Com o objetivo de caracterizar a resposta imune humoral durante o curso da doença, foram analisados soros de pacientes hospitalizados, pelos métodos ELISA e Western blot, usando-se preparaçöes de antígenos de Leishmania donovani chagasi. O teste de ELISA foi positivo (absorbância > 0,196), numa diluiçäo de 1 1024, em todos os pacientes no início da doença, diminuindo no decorrer do ano, para os níveis dos indivíduos controles. Apenas um dos 72 controles, que tinha um irmäo com leishmaniose visceral, apresentou positividade para o teste. "Immunoblots" de soros de pacientes apresentaram bandas múltiplas, sendo as mais freqüentes de aproximadamente 116 kDa, 70 kDa. Com menor freqüência foram observadas bandas de 93 kDa, 74 kDa, 62 kDa, 46 kDa e 32 kDa. As respostas, através de ELISA e dos padröes de separaçäo por "immunoblot", foram distintas na leishmaniose visceral e podem ser usadas para diferenciar pacientes com leishmaniose visceral daqueles com doenças de Chagas ou leishmaniose cutânea. As amostras sorológicas de pacientes acompanhados durante seis semanas após o tratamento näo apresentaram nenhuma banda nova. A eletroforese em gel de poliacrilamida-sulfato de dodecil de sódio (SDS-PAGE) das proteínas iodinadas da superfície do parasita mostrou uma banda principal e quatro menores, enquanto a eletroforese de proteínas biotiniladas do parasita mostrou um padräo semelhante aquele apresentado pelos soros dos pacientes. A leishmaniose visceral parece produzir um padräo de "immunoblot" característico que pode ser usado, juntamente com um método sensível tipo ELISA, no diagnóstico de leishmaniose visceral americana