E s t a n d a r i z a c i ó n d e n u e v o p r o t o c o l o Inmunohistoquímico para identificar Helicobacter pylori de biopsias gástricas y valoración frente a la tinción Hematoxilina-Eosina / Standardization of the new immunohistochemical protocol to identify Helicobacter pylori from gastric biopsies and contrast against Hematoxylin-Eosin staining

RESUMEN

Objetivo. Estandarizar un nuevo protocolo de inmunohistoquímica para identificar Helicobacter pylori, en biopsias gástricas. Material y Métodos: el trabajo se realizó en tres fases. La primera fase hace uso de anticuerpos policlonales de conejo Anti-H. pylori como anticuerpo primario para la marcación de dicha bacteria, además de un polímero EnVision FLEX/HRP para la marcación en biopsias gástricas. En la segunda se modificó el contraste de la inmunotinción con los colorantes Hematoxilina de Harris y Eosina Y, con la finalidad de apreciar con más claridad la citomorfología del tejido gástrico a examinar y a los posibles cambios histológicos pre malignos. Por último se procedió a valorar los resultados frente a la tinción Hematoxilina y Eosina (H&E). Resultados y Discusión: Demostramos que al realizar el nuevo protocolo de inmunohistoquímica facilita la identificación de H. pylori y a su vez permite evaluar los cambios citomorfológicos en las biopsias gástricas. El establecimiento de este protocolo permitirá estudiar adecuadamente la asociación de la infección por H. pylori y los cambios histológicos pre-malignos en el tejido gástrico.

ABSTRACT

Objetive. Standardize a new immunohistochemical protocol to identify Helicobacter pylori in gastric biopsies. Materials and Methods: the work was carried out in three phases. The first phase makes use of polyclonal rabbit Anti-H. pylori antibodies as a primary antibody for the labeling of said bacteria, in addition to an EnVision FLEX / HRP polymer for labeling in gastric biopsies. In the second, the immunostaining contrast was modified with the Harris Hematoxylin and Eosin Y dyes, in order to more clearly appreciate the cytomorphology of the gastric tissue to be examined and the possible pre-malignant histological changes. Finally, the results were evaluated against Hematoxylin and Eosin (H&E) staining. Results and Discussion: We s h o w t h a t b y c a r r y i n g o u t t h e n e w immunohistochemistry protocol, it facilitates the identification of H. pylori and, in turn, allows the evaluation of cytomorphological changes in gastric biopsies. The establishment of this protocol will allow an adequate study of the association of H. pylori infection and pre-malignant histological changes in gastric tissue.