Caracterização de modelo murino de granuloma não infeccioso em comparação à técnica de Shepard de infecção por M. leprae / Characterization of a murine model of non-infecious granuloma compared to the Shepard technique of M. leprae infection

RESUMO

Na hanseníase, o modelo de Shepard de inoculação por Mycobacterium leprae (M. leprae) em patas de camundongos vem sendo utilizado em diversos estudos sobre a resposta imune, avaliação de novas drogas e esquemas terapêuticos, além da dinâmica da infecção precoce e crônica. Para estudar o papel do microambiente granulomatoso na hanseníase, além de modelos animais convencionais ou imunocomprometidos, o desenvolvimento de modelos murinos de granuloma não infeccioso pode adicionar parâmetros patogênicos a serem comparados no desenvolvimento da doença. Preparações de nitrocelulose estão entre as formas de desenvolvimento de granulomas não imunogênicos em experimentação animal. O presente estudo investigou a formação de granulomas não infecciosos induzidos por partículas de nitrocelulose, em comparação a lesões induzidas por M. leprae. Grupos de camundongos nude e BALB/c, foram constituídos e inoculados, conforme a técnica de Shepard, com suspensão de M. leprae (ML), suspensão de nitrocelulose (NT), associação de M. leprae com nitrocelulose (ML/NT) e veículo controle (CTRL). Após 07, 14, 21 e 28 dias, amostras foram coletadas e analisadas histopatologicamente pelas colorações, HematoxilinaEosina e Fite-Faraco. Os grupos experimentais demonstraram a formação de granulomas em ambas os fenótipos murinos. Principalmente nos grupos NT e ML/NT, as lesões foram caracterizadas por infiltrado inflamatório mononuclear, predominantemente macrofágico, com presença de células epitelioides, eventuais macrófagos vacuolizados e ausência de células gigantes multinucleadas. As lesões induzidas exclusivamente por M. leprae pareceram menos exuberantes que àquelas observadas nos demais grupos, indicando que a nitrocelulose intensificou a resposta macrofágica nos espécimes avaliados e sugerindo que esse composto pode ser utilizado não só para o desenvolvimento de granulomas não imunogênicos, mas também na exacerbação da resposta imune em granulomas induzidos por agentes infecciosos, como M. leprae.

ABSTRACT

In leprosy, the Shepard model of inoculation by Mycobacterium leprae (M. leprae) in mouse footpad has been used in several studies on the immune response, evaluation of new drugs and therapeutic schemes, in addition to the dynamics of early and chronic infection. To study the role of the granulomatous microenvironment in leprosy, in addition to conventional or immunocompromised animal models, the development of murine models of non-infectious granuloma can add pathogenic parameters to be compared in the development of the disease. Nitrocellulose preparations are among the ways of developing non-immunogenic granulomas in animal experimentation. The present study investigated the formation of non-infectious granulomas induced by nitrocellulose particles, in comparison to lesions induced by M. leprae. Groups of athymic nude and BALB/c mice were set up and inoculated, according to Shepard technique, with M. leprae suspension (ML), nitrocellulose suspension (NT), M. leprae association with nitrocellulose (ML/NT) and control vehicle (CTRL). After 07, 14, 21 and 28 days, samples were collected and histopathologically analyzed by Hematoxylin-Eosin and FiteFaraco staining. The experimental groups demonstrated the formation of granulomas in both murine strains. Mainly in the NT and ML/NT groups, the lesions were characterized by mononuclear inflammatory infiltrate, predominantly macrophagic, with the presence of epithelioid cells, eventual vacuolated macrophages and absence of multinucleated giant cells. The lesions induced exclusively by M. leprae seemed less exuberant than those observed in the other groups, indicating that nitrocellulose intensified the macrophage response in the specimens evaluated, and suggesting that this compound can be used not only in the development of non-immunogenic granulomas, but also in exacerbation of the immune response in granulomas induced by infectious agents, such as M. leprae.