Characterization of glutamine synthetase from the ammonium-excreting strain HM053 of Azospirillum brasilense / Caracterização da glutamina sintetase da estipe excretora de amônio HM053 de Azospirillum brasilense
Braz. j. biol
; 82: e235927, 2022. tab, graf
Artículo
en Inglés
| LILACS, VETINDEX
| ID: biblio-1249226
Biblioteca responsable:
BR1.1
ABSTRACT
Glutamine synthetase (GS), encoded by glnA, catalyzes the conversion of L-glutamate and ammonium to L-glutamine. This ATP hydrolysis driven process is the main nitrogen assimilation pathway in the nitrogen-fixing bacterium Azospirillum brasilense. The A. brasilense strain HM053 has poor GS activity and leaks ammonium into the medium under nitrogen fixing conditions. In this work, the glnA genes of the wild type and HM053 strains were cloned into pET28a, sequenced and overexpressed in E. coli. The GS enzyme was purified by affinity chromatography and characterized. The GS of HM053 strain carries a P347L substitution, which results in low enzyme activity and rendered the enzyme insensitive to adenylylation by the adenilyltransferase GlnE.
RESUMO
A glutamina sintetase (GS), codificada por glnA, catalisa a conversão de L-glutamato e amônio em L-glutamina. Este processo dependente da hidrólise de ATP é a principal via de assimilação de nitrogênio na bactéria fixadora de nitrogênio Azospirillum brasilense. A estirpe HM053 de A. brasilense possui baixa atividade GS e excreta amônio no meio sob condições de fixação de nitrogênio. Neste trabalho, os genes glnA das estirpes do tipo selvagem e HM053 foram clonados em pET28a, sequenciados e superexpressos em E. coli. A enzima GS foi purificada por cromatografia de afinidade e caracterizada. A GS da estirpe HM053 possui uma substituição P347L que resulta em baixa atividade enzimática e torna a enzima insensível à adenililação pela adenililtransferase GlnE.
Asunto(s)
Texto completo:
Disponible
Contexto en salud:
Enfermedades Desatendidas
Problema de salud:
Enfermedades Desatendidas
/
Zoonosis
Base de datos:
LILACS
/
VETINDEX
Asunto principal:
Proteínas Bacterianas
/
Azospirillum brasilense
/
Compuestos de Amonio
/
Glutamato-Amoníaco Ligasa
País/Región como asunto:
America del Sur
/
Brasil
Idioma:
Inglés
Revista:
Braz. j. biol
Año:
2022
Tipo del documento:
Artículo
Institución/País de afiliación:
Universidade Federal do Paraná/BR