Análisis comparativo de la capacidad proliferativa del colesteatoma / Comparative analysis of the proliferative capacity of cholesteatomas

RESUMEN

Los colesteatomas de oído medio presentan frecuentemente un comportamiento invasivo asociado a una destrucción ósea. Los estímulos inflamatorios del tejido conjuntivo subyacente, así como mecanismos autocrinos podrían ser responsables de la disregulación de los queratinocitos del colesteatoma y de los patrones anormales de proliferación. El presente trabajo refleja los estudios realizados para determinar la capacidad proliferativa del colesteatoma humano de oído medio. Para ello se han llevado a cabo investigaciones comparativas entre la cinética de las células epiteliales del colesteatoma y de la piel del conducto auditivo extemo (CAE). Por una parte, se utilizó el anticuerpo monoclonal MIB-1, que reconoce, un antígeno celular de células en división, mediante la técnica inmunológica de la APAAP (alcalina-fosfatasa-anti-alcalina-fosfatasa). Las biopsias de piel de CAE (n = 7) revelaron un nivel MIB 1 (cociente de células MIB 1 positivas y el total de células) de 7,6% ± 2,2%. Las muestras de colesteatoma (n = 13) presentaron un nivel del 17,4% ± 8,9% y una heterogenicidad de áreas epiteliales proliferativas. Los conos epiteliales con crecimiento hacia el estroma subyacente mostraron una actividad mitótica alta. Estadísticamente, los resultados confirman un incremento altamente significativo de queratinocitos en el colesteatoma, presentando un nivel 2,3 veces más alto de expresión MIB-1 en comparación con los queratinocitos de la piel meatal. Por otra parte, se compararon 15 biopsias de piel de CAE con 7 muestras de colesteatoma en fase de infección y 8 sin infección, determinándose el PCNA, el antígeno de proliferación del núcleo celular, capaz de expresar células en fase de crecimiento, tanto en tejido normal como en tejido neoplásico. Aunque el número de células proliferativas variaba según la zona del colesteatoma, el número de células positivas al PCNA era superior en el epitelio colesteatomatoso en comparación con la piel normal de CAE. El rango en piel normal osciló entre 1 y 2,8 (media de 1,5), mientras que en el colesteatoma los valores se hallaban entre 2,5 y 15 (media 9,3), siendo la diferencia estadísticamente significativa (p < 0,001). Finalmente se determinaron las AgNOR (regiones nucleolares organizadoras argirofílicas), como expresión de una actividad proliferativa en 12 biopsias de CAE y en 19 colesteatomas adquiridos y 2 congénitos. Se contabilizaron una media de 3,71 puntos ('dots') AgNOR en los colesteatomas y 1,54 puntos en las biopsias de piel del CAE, demostrando los colesteatomas una proliferación mayor. El estudio histológico con tres marcadores diferentes capaces de expresar la proliferación celular objetiva la marcada hiperproliferación del colesteatoma humano en oído medio, con una disregulación de los queratinocitos, que explica su comportamiento clínico agresivo y destructor (AU)

ABSTRACT

Cholesteatomas of the middle ear are frequently aggressive and produce bone destruction. Stimulation of the surrounding inflammatory tissue and autocrine mechanisms could be responsible for the keratinocytic dysregulation of cholesteatomas, as well as for abnormal proliferation patterns. The proliferative capacity of human cholesteatoma of the middle ear was studied through the kinetics of the epithelial cells of cholesteatomas and external ear canal. The APAAP method was used to study the monoclonal antibody MIB-1, which recognizes an antigen of cells in the division phase. Biopsies taken from the outer ear canal (n = 7) revealed an MIB-1 level (the ratio of MIB-1 positive cells to all cells) of 7.6% ± 2.2%. Cholesteatoma samples (n = 13) showed an MIB-1 level of 17.4% ± 8.9%, and heterogeneity of the proliferative areas. Epithelial invaginations into the surrounding stroma were characterized by intense mitotic activity. The results confirmed a statistically significant increase in keratinocytes in the cholesteatomas, with an MIB-1 level 2.3 times higher than that of meatal keratinocytes. PCNA, a nuclear proliferation antigen which expresses the growth phase of cells in normal and tumoral tissue, was determined in 15 biopsies of meatal skin and 7 specimens of cholesteatoma in the phase of infection and 8 non-infection. Although the number of proliferative cells changed depending on the site of the cholesteatorna, the amount of PCNA-positive cells was significantly higher in the cholesteatoma (2.5-15, mean 9.3) than in normal skin (1-2.8, mean 1.5) (p < 0.001). Finally, AgNOR (argyrophyllic nucleolar organizer regions), which express proliferative activity, were determined in 12 specimens of meatal skin and in 19 acquired and 2 congenital cholesteatomas. A mean of 3.71 AgNOR dots were counted in the cholesteatomas and 1.54 dots in meatal skin specimens. The immunohistological study with three different markers expressing cellular proliferative capacity showed hyperproliferation associated with keratinocyte dysregulation in cholesteatoma samples, which could explain the clinically aggressive and destructive behavior of these lesions (AU)