Caracterização enzimática e variabilidade genética de isolados clínicos de Leishmania do Estado de Lara, Venezuela / Enzimatica caracterization and genetic variability of isolated leishmania in Lara State, Venezuela

RESUMO

A leishmaniose constitui um problema de saúde pública na Venezuela sendo que o Estado de Lara é o mais atingido. Estudos anteriores nesta área endêmica têm mostrado que várias espécies do gênero Leishmania podem circular simpatricamente. O objetivo geral deste estudo foi caracterizar cepas de Leishmania isoladas de casos clínicos de leishmanioses tegumentar americana (LTA) ou visceral (LV) do Estado de Lara, utilizando eletroforese de enzimas (MLEE). Além disso, a variabilidade genética foi avaliada através da polymerase chain reaction (PCR), comparando com os perfis das cepas referências sugeridas pela Organização da Saúde. Os resultados obtidos neste estudo, apesar do pequeno número de isolados analisados,confirmam que existe simpatria entre diferentes espécies de Leishmania, na área estudada, tendo sido detectado híbridos entre L. braziliensis e L. guyanensis e, pela primeira vez nesta área, L.colombiensis. A análise dos resultados por MLEE, permitiu discriminar entre as espécies e demonstraram uma diferença entre a cepa referência de L. colombiensis e os isolados do Estado de Lara, mas sem correlação com a forma clínica da doença, já que estes foram provenientes tanto de LTA como LV. Os dados da análise de IRT (RFLP-ITSrRNA) confirmaram a diferença entre a cepa de referência e os isolados de L. colombiensis. No entanto, o Ramdon Amplified Polimorphic DNA apresentou um maior poder discriminativo, no apenas diferenciando as espécies, mas também apresentando bandas específicas, relacionadas tanto com a espécie L. colombiensis como com a cepa do parasita associado a forma visceral da doença. Estas bandas podem ser importantes no diagnóstico diferencial, já que mostram a relação entre um marcador genético e a expressão clínica da doença. Vale ressaltar que L. chagasi têm sido considerada como agente etiológico de LV na Venezuela e que o principal vetor na área de procedência dos isolados de LV deste estudo é Lutzomyia longipalpis. Os dados presentes junto com relatos da literatura mostram que a espécie L. colombiensis apresenta uma distribuição geográfica relativamente ampla (Colômbia, Panamá e Venezuela) com características biológicas particulares (semelhantes a outras espécies) como a plasticidade apresentada pelo parasitas de infectar distintos vectores (Lu. gomezi, Lu.Hartmani e Lu.Panamensis) ou no comportamento clínico - patológico diverso (tropismo tegumentar e visceral) expressado nos casos humanos de que foram isolados as cepas estudadas.