Comparação de expressão de proteínas estruturais do vírus Chikungunya (CHIKV) produzido em células de inseto

RESUMO

O vírus Chikungunya (CHIKV) pertence ao gênero Alphavirus da família Togaviridae e se espalhou pelos trópicos causando surtos em vários países da África, Ásia, Europa e América. A transmissão para humanos é promovida por mosquitos do gênero Aedes, abundantes no Brasil. A febre de Chikungunya manifesta-se primeiro como um estágio agudo de inflamação e doença febril, a qual pode evoluir para um estágio crônico de artrite. Com o crescimento urbano acelerado e a globalização, se vê a necessidade da realização de estudos para o controle e prevenção da infecção pelo CHIKV, uma vez que não existem vacinas ou antivirais contra este arbovírus. A abordagem deste trabalho compreende a adaptação celular de células recombinantes de inseto em meio de cultura livre de soro fetal bovino com intuito da expressão das proteínas imunogênicas do CHIKV. Foram avaliados os parâmetros cinéticos das células S2-CHIKV-Hy em dois diferentes meios de cultura e a expressão das proteínas de CHIKV. As células recombinantes foram cultivadas em 2 diferentes meios de cultura EX-CellTM 420 e SF900III. Para isso, as células cultivadas em SF900III foram adaptadas em meio EX-CellTM 420 , pelo aumento semanal de uma fração de 10 % do meio de cultura final, sendo adicionada ao meio de cultura SF900III, no qual as células estavam crescendo originalmente. Após a adaptação atingir 100% de meio EX-CellTM 420, as células foram inoculadas em 20 mL de meio e levadas a indução por CuSO4 e a cinética de crescimento celular foi monitorada diariamente pela análise do crescimento, no qual conclui-se que as células cresceram de maneira similar em ambos os meios utilizados. A análise de expressão das proteínas de CHIKV deverá ser realizada posteriormente.