Prevalence of Molecular Markers of Plasmodium Falciparum Resistance to Proguanil and Pyrimethamine in Children with Haemoglobin Phenotypes SS and AA in Benin City, Nigeria.

ABSTRACT

BACKGROUND: Chemoprophylaxis against Plasmodium falciparum (Pf) is advocated in children with sickle cell anaemia (SCA). Among them, antifolates proguanil and pyrimethamine had replaced initial chemoprophylactic drugs because of widespread resistance. In recent past, efficacy of these antifolates has also come under scrutiny due to increasing level of drug resistance. Specific point mutations on Plasmodium falciparum dihydrofolate reductase gene (pfdhfr) have been linked with resistance to proguanil and pyrimethamine and they can be used as markers in monitoring prevalence and level of resistance to the drugs. OBJECTIVES: To determine the prevalence of molecular markers of Plasmodium falciparum resistance to proguanil and pyrimethamine in children with SCA. METHODS: A total of 146 Plasmodium falciparum isolates (71 from children with SCA and 75 from those with Haemoglobin AA HbAA) were evaluated for point mutations and mutant haplotypes on the pfdhfr gene using nested polymerase chain reaction amplification followed by direct sequencing. RESULTS: The triple (S108N+N51I+C59N) mutant haplotype was present in 100.0% and 96.0% of samples from children with SCA and HbAA respectively. S108T, A16V and 1164L mutationswere not present in both groups. CONCLUSION: High prevalence of triple mutant haplotype mediates significant resistance to pyrimethamine and implies that pyrimethamine resistance is fixed in the study locale. However, the absence of pfdhfr S108T and A16V mutations, which indicate specific resistance to proguanil but not to pyrimethamine, suggests that proguanil is still useful even in the face of pyrimethamine resistance. The threat of proguanil resistance is however real due to high prevalence of the triple mutant pfdhfr haplotype.

CONTEXTE La chimioprophylaxie contre Plasmodium falciparum (Pf) est préconisée chez les enfants atteints de drépanocytose. (DCA). Parmi eux, les antifoliques proguanil et pyriméthamine ont remplacé les médicaments chimioprophylactiques initiaux en raison d'une résistance généralisée. Ces derniers temps, l'efficacité de ces antifoliques a également été remise en question en raison de l'augmentation de la résistance aux médicaments. Des mutations ponctuelles spécifiques sur le dihydrofolate de Plasmodium falciparum dihydrofolate réductase (pfdhfr) ont été associées à la résistance au proguanil et à l'antifongiqueet elles peuvent être comme marqueurs pour surveiller la prévalence et le niveau de la résistance à ces médicaments. OBJECTIFS Déterminer la prévalence des marqueurs moléculaires de la résistance de Plasmodium falciparum au proguanil et à la pyriméthamine chez les enfants atteints d'ACS. MÉTHODES Un total de 146 isolats de Plasmodium falciparum (71 falciparum (71 provenant d'enfants atteints d'ACS et 75 d'enfants présentant une hémoglobine AA HbAA) ont été évalués pour détecter des mutations ponctuelles et des haplotypes mutants sur le gène pfdhfr en utilisant une amplification en chaîne par réaction en chaîne par polymérase nichée suivie d'un séquençage direct. RÉSULTATS L'haplotype mutant triple (S108N+N51I+C59N) était présent chez 100,0 % et 96 % des patients.était présent dans 100,0 % et 96,0 % des échantillons provenant d'enfants atteints de SCA et HbAA respectivement. Les mutations S108T, A16V et 1164L n'étaient pas présentes dans les deux groupes. CONCLUSION: La prévalence élevée de l'haplotype triple mutant est à l'origine d'une résistance significative à la pyriméthamine et à l'HbA une résistance significative à la pyriméthamine et implique que la résistance à la pyriméthamine est fixe dans le groupe pyriméthamine et implique que la résistance à la pyriméthamine est fixe dans la région étudiée. Cependant, l'absence des mutations S108T et A16V de pfdhfr, qui indiquent une résistance une résistance spécifique au proguanil mais pas à la pyriméthamine, suggère que le proguanil reste utile même en cas de résistance à la pyriméthamine résistance à la pyriméthamine. La menace de la résistance au proguanil est cependant réelle en raison de la prévalence élevée de l'haplotype triple mutant pfdhfr haplotype.