Isolation and characterization of stem cells derived by human dental pulp from harvest based in rotary and manual techniques used in endodontic therapy / Isolamento e caracterização de células tronco da polpa dentária humana obtidas em instrumentação mecanizada e manual durante tratamento endodôntico

ABSTRACT

Objective: The aim of this study was to evaluate the impact on the isolation and characterization of stem cells from pulp tissues obtained through rotary instrumentation techniques compared to the manual technique. Material and Methods: Thirty permanent teeth were included, 15 of which were instrumented with rotational technique (Protaper SX) and other 15 with manual technique. Cells obtained were characterized by flow cytometry and proliferation was evaluated by the MTT assay. The plasticity was evaluated for adipogenic, osteogenic and odontogenic differentiations. Results: Cells isolated from the pulp of permanent teeth, by manual techniques, presented fibroblast morphology and were able to differentiate successfully. All lineages expressed CD29, CD73, CD90, CD105, CD146, CD166 and were negative for CD31, CD34 and CD45. MTT assay showing significantly increased proliferation of hDPSCs in 5 and 7 days of the culture. Conclusions: The present study demonstrated that manual instrumentation technique is one of the best candidates to harvest dental pulp tissue as the dental stem cell source due to ability effective expanded with less tissue invasion. The technique of rotational instrumentation proved to be very harmful to the tissues of the dental pulp, and we can't obtain cells using this technique. (AU)

RESUMO

Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar o impacto no isolamento e caracterização de células-tronco de tecidos pulpares obtidos por meio de técnicas de instrumentação rotatória em comparação à técnica manual. Material e Métodos: Trinta dentes permanentes foram incluídos, 15 dos quais foram instrumentados com técnica mecanizada (Protaper SX) e outros 15 com técnica manual. As células obtidas foram caracterizadas por citometria de fluxo e a proliferação foi avaliada pelo ensaio MTT. A plasticidade foi avaliada quanto às diferenciações adipogênica, osteogênica e odontogênica. Resultados: células isoladas da polpa de dentes permanentes, por técnicas manuais, apresentaram morfologia de fibroblastos e foram capazes de se diferenciar com sucesso. Todas as linhagens expressaram CD29, CD73, CD90, CD105, CD146, CD166 e foram negativas para CD31, CD34 e CD45. O teste de MTT mostrou proliferação significativamente aumentada de hDPSCs em 5 e 7 dias da cultura. Conclusões: O presente estudo demonstrou que a técnica de instrumentação manual é um dos melhores candidatos para a colheita de tecido pulpar como fonte de células tronco dentárias devido à boa capacidade de proliferação celular com menor invasão tecidual. A técnica de instrumentação rotatória provou ser muito prejudicial para os tecidos da polpa dentária, e não possibilitou obter células. (AU)