Expression in Saccharomyces boulardii of recombinant Toxin-coregulated pilus A subunit (TcpA) of Vibrio cholerae O1
Vaccimonitor (La Habana, Print)
; 29(3)sept.-dic. 2020. graf
Artigo
em Inglês
| CUMED, LILACS
| ID: biblio-1139857
Biblioteca responsável:
CU1.1
ABSTRACT
Cholera is endemic in over 50 countries with an estimated mortality of 100,000-120,000. Vaccination is considered the complementary key to prevent and control cholera; therefore, alternative vaccine preparations are needed. Toxin Co-regulated Pilus is part of the toxR virulence regulon, which is necessary for colonization in the intestinal mucosa. In order to express Vibrio cholerae TcpA protein in Saccharomyces boulardii, the expression plasmid pYES2 was constructed by inserting tcpA gene isolated from local Vibrio cholerae Eltor Inaba isolates. The new construct was transferred into Saccharomyces boulardii cells and the expression of tcpA gene was induced from the GAL1 promoter by adding galactose to the medium. The SDS-PAGE and Western blot analysis showed the presence of TcpA in yeast. These results showed that Saccharomyces boulardii is a promising host to express Vibrio cholerae toxin TcpA as the first step in attempt to produce an oral Vibrio cholerae vaccine(AU)
RESUMEN
El cólera es endémico en más de 50 países. Se estima una mortalidad entre 100.000 - 120.000 debido a esta enfermedad. La vacunación se considera una medida complementaria para prevenir y controlar el cólera, por lo tanto, se necesitan preparaciones vacunales alternativas a las existentes. El Pili corregulado con la toxina, es parte del regulón de virulencia toxR, y es necesario para la colonización en la mucosa intestinal. Para expresar la proteína tcpA de Vibrio cholerae en Saccharomyces boulardii, se construyó el plásmido de expresión pYES2 insertando el gen tcpA obtenido a partir de aislamientos locales de Vibrio cholerae El Tor Inaba. La nueva construcción se transfirió a las células de Saccharomyces boulardii y se indujo la expresión del gen tcpA a partir del promotor GAL1 mediante la adición de galactosa al medio. El análisis mediante SDS-PAGE y Western blot demostró la presencia de TcpA en levaduras. Los resultados demostraron que Saccharomyces boulardii es un hospedero prometedor para expresar el gen tcpA de Vibrio cholerae como el primer paso en el intento de producir una vacuna oral contra Vibrio cholerae(AU)
Texto completo:
Disponível
Coleções:
Bases de dados internacionais
Contexto em Saúde:
ODS3 - Saúde e Bem-Estar
/
Doenças Negligenciadas
/
ODS3 - Meta 3.3 Acabar com as doenças tropicais negligenciadas e combater as doenças transmissíveis
Problema de saúde:
Meta 3.3: Acabar com as doenças tropicais negligenciadas e combater as doenças transmissíveis
/
Cólera
/
Doenças Negligenciadas
/
Zoonoses
/
Cólera
Base de dados:
CUMED
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LILACS
Assunto principal:
Vacinas contra Cólera
/
Cólera
/
Infecções por Escherichia coli
/
Saccharomyces boulardii
Limite:
Feminino
/
Humanos
/
Masculino
Idioma:
Inglês
Revista:
Vaccimonitor (La Habana, Print)
Assunto da revista:
Biologia Molecular
/
Epidemiologia
/
Microbiologia
/
Vacinas
Ano de publicação:
2020
Tipo de documento:
Artigo
País de afiliação:
Iraque
Instituição/País de afiliação:
College of Biotechnology, Al-Nahrain University, Baghdad/IQ
/
Institute of Genetic Engineering and Biotechnology for Post Graduate study, Baghdad University/IQ
/
Ministery of Science and Technology/IQ