Detecção de microrganismos em bráquetes metálicos in vivo, com ou sem utilização de agente antimicrobiano, pela técnica Checkerboard DNA-DNA Hybridization / Detection of microoganisms in metallic orthodontic brackets in vivo by the Checkerboard DNA-DNA hybridization after use or not of an antimicrobial agent

RESUMO

A presente Dissertação foi composta de dois estudos. O objetivo do primeiro estudo foi avaliar in vivo, por meio da técnica Checkerboard DNA-DNA Hybridization, a contaminação de bráquetes metálicos por 40 espécies diferentes de microrganismos pertencentes aos complexos amarelo, verde, laranja e vermelho, grupo dos Actinomyces e bactérias cariogênicas. Participaram do estudo 18 pacientes (11 a 29 anos), em tratamento ortodôntico, nos quais foram colados 2 bráquetes metálicos novos, em pré-molares diferentes. Decorridos 30 dias, os bráquetes foram removidos e processados pela técnica Checkerboard DNA-DNA Hybridization. Os resultados foram analisados por meio do teste não-paramétrico de Kruskal-Wallis e pós-teste de Dunn (=5%). De acordo com os resultados obtidos, a maioria dos microrganismos estava presente em 100% dos indivíduos. Dentre os microrganismos cariogênicos, S. mutans e S. sobrinus foram encontrados em maiores quantidades que L. acidophillus e L. casei (p<0,001). As bactérias periodontopatogênicas pertencentes ao complexo laranja foram evidenciadas em maiores quantidades do que as pertencentes ao complexo vermelho (p<0,0001). Dentre os demais microrganismos não associados com patologias específicas, a espécie observada em maior quantidade foi V. parvula (p<0,0001), pertencente ao complexo roxo. A quantidade dos microrganismos dos complexos amarelo, verde e do grupo dos Actinomyces foram semelhantes (p>0,05). O objetivo do segundo estudo foi avaliar, in vivo, por meio da técnica Checkerboard DNA-DNA Hybridization, a contaminação de bráquetes metálicos por espécies de microrganismos periodontopatogênicos dos complexos vermelho e laranja e a eficácia do gluconato de clorexidina a 0,12% (Periogard®), sob a forma de bochechos. Participaram do estudo 39 pacientes (11 a 33 anos), em tratamento ortodôntico, nos quais foram colados 2 bráquetes metálicos novos, em pré-molares diferentes. Os pacientes do grupo Controle fizeram 2 bochechos semanais com solução placebo, durante 30 dias e os pacientes do grupo Experimental fizeram bochechos com clorexidina, da mesma forma que o grupo Controle. Decorridos 30 dias, os bráquetes foram removidos e processados pela técnica Checkerboard DNA-DNA Hybridization. Os resultados foram analisados por meio dos testes não-paramétricos de Mann-Whitney, Kruskal-Wallis e o pós-teste de Dunn (= 5%). De acordo com os resultados obtidos observou-se quantidades menores no total de microrganismos após a realização dos bochechos com clorexidina (p<0,0068), assim como para os microrganismos do complexo laranja (p=0,03). Os resultados obtidos nos dois estudos permitiram concluir que os bráquetes metálicos encontram-se multicolonizados por diversas espécies bacterianas, e que a clorexidina, utilizada duas vezes por semana sob a forma de bochechos, foi eficaz na redução dos níveis de microrganismos periodontopatogênicos, durante o tratamento ortodôntico

ABSTRACT

The present Master's degree thesis was composed of two studies. The purpose of the first study was to evaluate in vivo by the Checkerboard DNA-DNA Hybridization technique the contamination of metallic orthodontic brackets by 40 microbial species of the yellow, green, orange and red complexes, Actinomyces group and cariogenic bacteria. Eighteen patients aged 11 to 29 years under orthodontic treatment were enrolled in this study and all subjects had 2 new metallic brackets bonded to different premolars in a randomized manner. After 30 days, the brackets were removed and processed for analysis by Checkerboard DNA-DNA Hybridization. The data were analyzed statistically by the non-parametric Kruskal-Wallis and Dunn's post tests (=5%). According to the obtained results, most evaluated microorganisms were present in 100% of the individuals. Among the cariogenic microorganisms, S. mutans and S. sobrinus were found in larger numbers than L. acidophillus and L. casei. (p<0.001). The periodontopathogenic bacteria of the orange complex were detected in larger numbers than the red complex bacteria (p<0.0001). Among the other microorganisms not associated with specific pathologies, V. parvula, belonging to the purple complex, was the most frequently detected specie (p<0.0001). The number of yellow and green complex bacteria and Actinomyces group microorganisms was similar (p>0.05). The purpose of the second study was to evaluate in vivo by the Checkerboard DNA-DNA Hybridization technique the contamination of metallic orthodontic brackets by 17 periodontopathogenic microorganisms of the red and orange complexes, and the efficacy of 0.12% chlorhexidine gluconate (Periogard®) mouthwashes against these microbial strains. Thirty-nine patients aged 11 to 33 years under orthodontic treatment were enrolled in this study and all subjects had 2 new metallic brackets bonded to different premolars in a randomized manner. The patients in the Control group were instructed to use a placebo mouthwash twice a week, while those in the Experimental group were instructed to use a chlorexidine oral rinse in the same way. After 30 days, the brackets were removed and processed for analysis by Checkerboard DNA-DNA Hybridization. The data were analyzed statistically by the non-parametric Mann-Whitney, Kruskal-Wallis and Dunn's post tests (=5%). According to the obtained results, smaller numbers of total microorganisms (p<0.0068) as well as orange complex bacteria (p=0.03) were observed after use of the chlorexidine mouthwash. Based on the findings of both studies, it may be concluded that the metallic brackets were multi-colonized by several bacterial species and that the use of chlorhexidine mouthwashes twice a week was effective in reducing the levels of periodontopathogenic microorganisms during the orthodontic treatment.