Actividad inmunomuduladora de especies cultivadas nativas de mesoamérica / Immunomodulating activity of cultivated species native to Mesoamerica

RESUMEN

En el presente estudio se evaluaron las propiedades inmunomoduladoras in vitro de dos especies cultivadas nativas de Mesoamérica, (P. alliacea y S. domingensis), conocida popularmente como apacín y zarzaparrilla respectivamente por medio de ensayos de linfoproliferación y ensayos hemolíticos que demostraron la regulación del sistema de complemento en sus dos vías, por medio de extractos etanólicos y acuosos de hoja y raíz de P. alliacea, hojas, fruto y rizoma de S. domingensis. Dichas plantas han sido empleadas como plantas medicinales, a las que se les atribuyen las características de ser antiinflamatorias, analgésicas, antipiréticas, entre otras. En la etapa inicial se realizó la recolección del material cultivado, procediendo a su percolación y rotaevaporación con etanol al 70 % para la obtención de los extractos etanólicos y para la obtención de extractos acuosos de las diferentes partes de las plantas fue a través de la infusión por sonificación y liofilización de los mismos, calculando su porcentaje de rendimiento. Dentro de este estudio, se realizó una metodología colorimétrica para demostrar la actividad moduladora de la linfoproliferación de los extractos de las diferentes partes de las plantas, así como el determinar la concentración efectiva mínima (CEM). La metodología colorimétrica empleada, se realizó mediante una separación inicial de los linfocitos, los cuales se agregaron a una microplaca, la cual contenía una concentración conocida de los diferentes extractos, que posteriormente se incubaron por cuatro días, para luego obtener las actividades por medio de absorbancia tomadas con la ayuda de un lector de ELISA. Se empleo el mitógeno Phaseolus vulgaris (PHA), como control positivo y se determino, junto con la CEM si la actividad que presenten los extractos es inhibitoria o estimulatoria. Los extractos que presentaron actividad lo hicieron de manera inhibitoria sobre la actividad linfocítica y se les determinó su CEM siendo extracto etanólico de rizoma de S. domingensis (CEM de 250 µg/ml) y extractos acuosos de hoja y raíz de P. alliacea (CEM de 500 y 250 µg/ml, respectivamente) y hoja y rizoma de S. domingensis (CEM de 250 y 500 µg/ml, respectivamente). Mientras que en los extractos etanólicos de hoja de P. alliacea, fruto y hoja de S. domingensis mostraron actividad únicamente en la concentración inicial de 1,000 µg/ml y los extractos sin actividad fueron extracto etanólico de raíz de P. alliacea y extracto acuosos del fruto de S. domingensis La evaluación sobre la actividad del sistema de complemento se efectuó mediante ensayos basados en la hemólisis de eritrocitos por el Complejo de Ataque a Membrana (CAM), el cual es generado al activarse el sistema de complemento; en este ensayo los eritrocitos actúan como células blanco y al ser activados se produce la lisis de eritrocitos, liberándose hemoglobina la cual es utilizada como parámetro para medir la actividad. Los resultados obtenidos en el ensayo del sistema de complemento mostraron que tanto para la vía clásica como para la vía alterna, la mayoría de los extractos tanto etanólicos como acuosos de hoja y raíz de P. alliacea, hoja y rizoma de S. domingensis presentaron un efecto inhibitorio de ambas vías, determinado por su CI50, por el contrario los extractos que no mostraron ninguna actividad fueron extractos etanólicos y acuosos de fruto en la vía clásica y alterna y extracto acuoso de hoja de S. domingensis en vía clásica. Esto se estableció con la determinación del CI50 considerando un límite de 15 µg/ml como punto significativo de corte para establecer la presencia o ausencia de la actividad sobre las vías clásicas y alternas del complemento. Puede decirse que los extractos evaluados son de gran interés por el efecto inhibidor sobre la linfoproliferación y sobre el sistema de complemento, además de representar material vegetal cultivado que se puede aprovechar de mejor manera generando mayor volumen para su utilización en la disminución de la estimulación del sistema inmune y aprovechamiento de manera sostenible.