Susceptibility of cariogenic microorganisms to phytoconstituents / Susceptibilidade de microrganismos cariogênicos a fitoconstituintes

ABSTRACT

Abstract This study aimed to evaluate the in vitro antibacterial activity of the phytochemicals thymol, linalool, and citronellol against Streptococcus mutans, Streptococcus salivarius and Streptococcus oralis. Disk diffusion screening on solid medium and measurement of the diameter of the bacterial growth inhibition halos was the technique utilized. The Minimum Inhibitory Concentration (MIC) of the substances was determined using serial substance dilutions and microdilution technique in Brain Heart Infusion culture medium. After incubation for 24 hours in an oven at 37 °C, plate reading was completed and confirmed by visual method using 2,3,5 triphenyl tetrazolium chloride dye. The Minimum Bactericidal Concentration (MBC) was determined from MIC subcultures. Assays were performed in triplicate, and chlorhexidine was used as a positive control. The diameters in mm of the growth inhibition halos ranged between 7.3 and 10.7 for S. mutans, 7.3 and 10.0 for S. oralis, and 8.2 and 9.8 for S. salivarius. The MIC and MBC values obtained converged, ranging from maximum values in the presence of Linalool (1,250.0 mg/mL, 2,500.0 mg/mL and 2,500.0 mg/mL, respectively, for S. mutans, S. oralis, and S. salivarius); and minimum values with Thymol (312.5 μg/ml, 156.2 μg/mL and 156.2 μg/ml, respectively for S. mutans, S. oralis, and S. salivarius). All the tested phytochemicals displayed antibacterial activity, thus representing substances with potential applications in preventing tooth decay.

RESUMO

Resumo Este estudo objetivou avaliar a atividade antibacteriana in vitro dos fitoquímicos timol, linalol e citronelol sobre Streptococcus mutans, Streptococcus salivaris e Streptococcus oralis. Utilizou-se a técnica de discos de difusão em meio sólido e medição do diâmetro dos halos de inibição. A concentração inibitória mínima (CIM) das substâncias foi determinada utilizando diluições em série das substâncias e técnica de microdiluição em meio de cultura de Brain Heart Infusion. Após incubação durante 24 horas em estufa a 37 °C, a leitura da placa foi confirmada pelo método visual usando o corante 2,3,5 trifenil cloreto de tetrazólio. A concentração bactericida mínima (CBM) foi determinada a partir de subculturas de MIC. Os ensaios foram realizados em triplicata, e clorexidina foi usada como um controle positivo. Os diâmetros dos halos de inibição do crescimento variaram entre 7,3 e 10,7 por S. mutans, 7,3 e 10,0 por S. oralis, e 8,2 e 9,8 para S. salivaris. Os valores de CIM e CBM obtidos variaram de valores máximos na presença de linalol (1.250,0 mg/mL, 2.500.0 mg/mL e 2.500.0 mg/mL, respectivamente, para o S. mutans, S oralis e S. salivaris); a valores mínimos com timol (312,5 μg/ml, 156,2 μg/mL e 156,2 μg/ml, respectivamente para S. mutans, S. oralis e S. salivaris). Todos os fitoquímicos testados apresentaram atividade antibacteriana, representando, assim, substâncias com potencial de aplicações na prevenção da cárie dentária.