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Biosensor amperométrico para la medida de galactosa compuesto por microgeles de poliacrilamida / Amperometric biosensor based on polyacrylamide microgels for galactose determination
Hervás-Pérez, Juan Pablo; Sánchez-Paniagua López, Marta; López-Cabarcos, Enrique; López-Ruiz, Beatriz.
Afiliação
  • Hervás-Pérez, Juan Pablo; Universidad Complutense de Madrid. Madrid. España
  • Sánchez-Paniagua López, Marta; Universidad Complutense de Madrid. Madrid. España
  • López-Cabarcos, Enrique; Universidad Complutense de Madrid. Madrid. España
  • López-Ruiz, Beatriz; Universidad Complutense de Madrid. Madrid. España
An. R. Acad. Farm ; 72(3): 443-461, jul. 2006. ilus, tab
Artigo em Es | IBECS | ID: ibc-049531
Biblioteca responsável: ES1.1
Localização: ES1.1 - BNCS
RESUMEN
La galactosemia es uno de los errores innatos del metabolismo más frecuentes. Su presentación clínica en niños no tratados puede ser severa, a veces mortal; su diagnóstico es relativamente simple y su tratamiento es muy sencillo y efectivo. Esto ha hecho que en los últimos años se hayan propuesto nuevos diseños de biosensores para la determinación de galactosa basados en galactosa oxidasa. El objetivo del trabajo consistió en la inmovilización de galactosa oxidasa (GlOx) en micropartículas de poliacrilamida (PAA), sintetizadas a partir del método de emulsión concentrada, y su utilización como material biológico de un nuevo biosensor amperométrico para la determinación de galactosa. Para preparar los biosensores de galactosa se depositaron las micropartículas con galactosa oxidasa sobre la superficie de un electrodo de platino y se cubrieron con una membrana de diálisis. Las micropartículas se caracterizaron mediante un analizador de partículas Galai Cis-1, microscopía electrónica de barrido, difracción de rayos X y calorimetría de barrido diferencial. La temperatura de transición vítrea (Tg) de los microgeles de poliacrilamida disminuyó al encapsular en su interior galactosa oxidasa. Se estudió la influencia de distintos factores, tales como grado de reticulación, pH y temperatura en la respuesta del biosensor. Las condiciones óptimas se corresponden a un grado de reticulación del 7%, 40º C y pH 7,0. El sistema de inmovilización propuesto apenas modifica la actividad enzimática, pero parece proteger a la enzima aumentando el intervalo de temperatura en el que es activa
ABSTRACT
Galactosemia is one of the natural errors of the metabolism more frequent, its clinical representation in children not treated can be severe, sometimes mortal; its diagnostic is relatively simple and its treatment is very easy and effective. Hence, in last years new biosensors design for galactose determination based on galactose oxidase has been proposed. The aim of this work consists of the immobilization of galactose oxidase (GlOx) in polyacrylamide microparticles, using the concentrated emulsion method, and their use as biological material of a new amperometric biosensor for galactose determination. For preparing the galactose biosensors, microparticles with galactose oxidase were deposited on the surface of a platinum electrode and covered with a dialysis membrane. Microparticles were characterized by a Galai Cis-1 particle analyzer system, scanning electron microscopy, X-rays diffraction and differential scanning calorimetry. The presence of galactose oxidase decreases the transition temperature (Tg) of the polyacrylamide microgels. The influence of several experimental factors, such as crosslinking content, pH and temperature, on the biosensor response was investigated. The optimal performance of the biosensor takes place for a cross-linking of 7.0%, 40ºC and pH 7.0. The proposed immobilization system almost does not modify the enzyme activity, but seems to protect to the enzyme because an increase of the temperature range in which the enzyme is active is observed
Assuntos
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Coleções: Bases de dados nacionais / Espanha Base de dados: IBECS Assunto principal: Microscopia Eletrônica de Varredura / Técnicas Biossensoriais / Eletroforese em Gel Bidimensional / Acrilamida / Galactose / Galactosemias / Indicadores e Reagentes Idioma: Espanhol Revista: An. R. Acad. Farm Ano de publicação: 2006 Tipo de documento: Artigo Instituição/País de afiliação: Universidad Complutense de Madrid/España
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Coleções: Bases de dados nacionais / Espanha Base de dados: IBECS Assunto principal: Microscopia Eletrônica de Varredura / Técnicas Biossensoriais / Eletroforese em Gel Bidimensional / Acrilamida / Galactose / Galactosemias / Indicadores e Reagentes Idioma: Espanhol Revista: An. R. Acad. Farm Ano de publicação: 2006 Tipo de documento: Artigo Instituição/País de afiliação: Universidad Complutense de Madrid/España
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