Efectos del sistema endocannabinoide en el sistema respiratorio. Papel de los receptores TRPV1 en la fibrogénesis pulmonar / Endocannabinoid system effects on the respiratory system. The role of TRPV1 receptors in pulmonary fibrosis

RESUMEN

Objetivos: establecer un modelo murino de fibrosis pulmonar inducida por bleomicina, investigando el posible papel protector del sistema endocannabinoide (SE) frente a la fibrosis. Métodos: se emplearon ratones salvajes (C5BL/6 y Balb/c) así como la cepa TRPV1-/-. Tras una única dosis intratraqueal de bleomicina, se analizó la respuesta fibrótica mediante un análisis histológico, la determinación de la expresión de marcadores del proceso profibrótico, el estudio de la actividad mieloperoxidasa y del contenido en hidroxiprolina del pulmón, así como el análisis de la expresión génica de VIP, PACAP, IL-1β, IL-6, TNF-α e IL-11, y el estado de activación de las rutas MAPKs (fosfo-JNK, fosfo-ERK) de la ruta de NF-κB (p-IκBα), la ruta de β-catenina y del TGFβ (GSK-3B), la activación de SMAD (pSMAD2) y pSTAT3, a nivel proteico. Resultados: la fibrosis pulmonar inducida por bleomicina en los ratones de la cepa TRPV- /- fue más severa que en la cepa salvaje C5BL/6. El contenido en hidroxiprolina y la actividad mieloperoxidasa fue mayor en los ratones TRPV1-/-. Se detectó un incremento significativo en la expresión génica de citoquinas proinflamatorias (TNF-a, IL-1b, IL11 e IL-6), pero no de VIP o PACAP, en la cepa TRPV1-/-. A nivel proteico, la expresión de pIKBα, pSTAT3, pSMAD2 y pJNK, pero no la de pERK, se vio incrementada en los ratones TRPV1-/-. Conclusiones: el modelo murino de fibrosis pulmonar inducida por bleomicina sigue siendo clave para continuar profundizando los conocimientos acerca de la patogénesis de la FPI. La modulación del SE podría tener un papel protector frente a la fibrosis pulmonar

ABSTRACT

Objectives: to establish a murine model of bleomycin-induced pulmonary fibrosis, analysing the possible protective role of the Endocannabinoid System (ES) against fibrosis. Methods: wild C5BL/6 and Balb/c mice, as well as the genetically modified strain TRPV1- /- were used. After a single dose of intratracheal bleomycin, the fibrotic response was analysed though histologic studies, the assessment of proinflammatory markers, myeloperoxidase activity, hydroxyproline content, genetic expression of VIP, PACAP, IL-1 β, IL-6, TNF-α and IL-11, as well as MAPK route (phospho-JNK, phospho-ERK), NF-κB (p-IκBα), β-cathenin, TGF-β (GSK-3B), SMAD (p-SMAD2) and pSTAT3, at a protein level. Results: pulmonary fibrosis was more severe in TRPV1-/- mice compared to C5BL/6 mice. A significant increase in proinflammatory markers such as TNF-α, IL-1β, IL11 and IL-6, but not VIP or PACAP, was observed. pIKBα, pSTAT3, pSMAD2 and pJNK, but not pERK, were increased at a protein level in TRPV-/- mice. Conclusions: the murine model of bleomycin-induced lung fibrosis remains a keystone to pioneer current investigation in lung fibrosis. Modulation of the ES might have a protective role