Influencia del suero fetal bovino en el cultivo de fibroblastos gingivales / Influence of bovine fetal serum in the culture of gingival fibroblasts

RESUMEN

Introducción: Los fibroblastos gingivales (FGs) son células responsables del mantenimiento de la homeostasis, cicatrización y tolerancia inmunitaria del tejido conjuntivo gingival. Por sus características fisiológicas, los FGs pueden ser un candidato en la terapia celular. Sin embargo, la conservación de su fenotipo en cultivo celulares requiere de condiciones estrictamente definidas. Una de ellas es la concentración de Suero Fetal Bovino (SFB). Nuestro objetivo es evaluar el efecto concentración-dependiente de la suplementación de SFB en el medio de cultivo sobre el comportamiento, crecimiento, proliferación y supervivencia de los fibroblastos gingivales humanos. Materiales y métodos: FGs fueron cultivados con DMEM (Dulbecco's modification of Eagle médium) y concentraciones de 0%, 0.5% y 10% de SFB durante tres semanas. Análisis morfológico, de proliferación e inmunohistoquímicos fueron llevados a cabo en el presente trabajo. Se llevó a cabo un análisis factorial de varianza (ANOVA) por medio el software R Project. Los resultados fueron considerados significativos con un valor de p<0,05. Resultados y Discusión: Los FGs cultivados con 10% de SFB alcanzaron un desarrollo morfológico más notorio y en menor tiempo comparados con los FGs cultivados a 0.5% y 0% de SFB. La efectividad de la concentración del SFB 0,5% fue mucho más alta en relación a la concentración del SFB 10%. La inmunodetención de la actina, vimentina y fibronectina fueron más notorias en los FGs tratados con 10% y 0.5% de SFB. Este estudio concluye que los FGs humanos presentan una mejor capacidad de supervivencia, desarrollo y proliferación cuando son cultivados en presencia de SFB

ABSTRACT

Introduction: Gingival fibroblasts (FGs) are cells responsible for the maintenance of homeostasis, healing and immune tolerance of the gingival connective tissue. Due to their physiological characteristics, FGs can be a candidate in cell therapy. However, the conservation of their phenotype in cell culture requires strictly defined conditions. One of them is the concentration of Bovine Fetal Serum (FBS). Our aim is to evaluate the concentration-dependent effect of SFB supplementation in the culture medium on the behavior, growth, proliferation and survival of human gingival fibroblasts. Materials and methods: FGs were cultured with DMEM (Dulbecco's modification of Eagle medium) and concentrations of 0%, 0.5% and 10% of SFB for three weeks. Morphological, proliferation and immunohistochemical analyzes were carried out in the present work. A factorial analysis of variance (ANOVA) was carried out using the R Project software. The results were considered significant with a value of p <0.05. Results and discussion: The FGs grown with 10% FBS reached a more noticeable morphological development and in a shorter time compared to the FGs grown at 0.5% and 0% FBS. The effectiveness of the concentration of the SFB 0.5% was much higher in relation to the concentration of the SFB 10%. The immunodetention of actin, vimentin and fibronectin were more evident in the FGs treated with 10% and 0.5% FBS. This study concludes that human FGs have a better capacity for survival, development and proliferation when they are grown in the presence of FBS