Optimización de un método para la determinación de la peroxidación lipídica en suero humano / A optimized method for the analysis of the lipidic peroxidation in human serum

RESUMEN

Como consecuencia del metabolismo celular normal, se producen radicales libres que generalmente son eliminados por receptores endógenos pero también pueden interaccionar con los lípidos séricos y tisulares provocando su peroxidación. Dada la naturaleza inestable de los productos de la peroxidación lipídica resulta dificultoso determinar la magnitud de dicha peroxidación. Es, sin embargo, más accesible determinar los productos de su degradación metabólica, constituidos fundamentalmente por aldehídos de alta capacidad reactiva, siendo el más significativo el malondialdehído (MDA).Entre la variedad de métodos analíticos desarrollados para determinar el daño oxidativo de los lípidos, el más comúnmente utilizado se basa en la reacción del malondialdehído con el ácido 2-tiobarbitúrico (TBA) para formar aductos cromógenos y fluorescentes de MDA-TBA muy estables y que se pueden cuantificar por espectrofotometría de absorción visible o por fluorimetría. En el presente trabajo, para la determinación de lipoperóxidos en suero humano se ha empleado una técnica colorimétrica basada en la reacción del TBA descrita por ASAKAWA y MATSUSHITA. Para la optimización de esta técnica fueron cuidadosamente analizadas las condiciones de reacción establecidas por estos autores introduciéndose modificaciones que afectan principalmente al tiempo de reacción y al método de extracción de los lipoperóxidos (AU)