Proteinase and gelatinolytic properties of a bat feces extract

ABSTRACT

It was previously demonstrated that a bat feces extract (BAT) was able to produce a specific IgG in animals, a specific IgE in respiratory atopic humans and a hypersensitivity pneumonitis in guinea pigs. As numerous allergens (such as house-dust mite, cockroaches and pollens) revealed a enzymatic activity measured by different assays we decided to study the proteinase and the gelatinolytic activities of the BAT. Several protease inhibitors such as E-64, TLCK, TPCK, PMSF, leupeptin, o-phenantroline and pepstatin-A were applied to establish the chemical properties of the enzymatic activity. These assays revealed a serine-trypsin-like proteolytic and gelatinolytic activities specially at pH 8,5. On the other hand, two bands of 21 and 40 kDa reacted with the human atopic sera suggesting a possible correlation between allergenicity and proteinase activity. Their role in the etiology of perennial rhinitis and asthma requires further investigations (AU)

RESUMEN

Habiendo demostrado previamente que las heces de los murciélagos (BAT) eran capaces de generar anticuerpos específicos IgG e IgE tanto en los animales como en los humanos atópicos con enfermedad respiratoria al igual que la producción de una típica neumonitis por hipersensibilidad en cobayos aerosolizados con BAT intentamos analizar si el o los antígenos responsables pertenecían al grupo de las proteasas tal como sucede con otros alergenos, como por ejemplo, los ácaros y los blátidos. Para ello el BAT fue estudiado por medio del SDS-PAGE, Western-blot y gelatinolisis con y sin el empleo de inhibidores específicos de las proteasas, tales como, el E-64, el TLCK, el TPCK, el PMSF, la leupeptina, la orto-fenantrolina y la pepstatina-A. Una vez comprobada la actividad proteásica y la gelatinolisis se destacó la presencia de 6 a 8 bandas entre los 21 y los 97 kDa con un patrón proteolítico con una mayor actividad a pH 8,5 y con una gelatinolisis altamente sensible al TLCK y al PMSF revelando su posible actividad de serina-simil-tripsina. Por los Western-blots se detectó que las bandas de 21 y de 40 kDa eran reactivas con los sueros humanos de atópicos respiratorios y la anti-IgE lo que lleva a correlacionar las actividades proteásica y gelatinolítica del BAT con su alergenicidad. Su papel en la etiopatogenia de la rinitis perenne y del asma bronquial como un alergeno ambiental más requiere de mayores investigaciones (AU)