Diagnóstico molecular de inmunodeficiencias primarias / Molecular diagnosis of primary immunodeficiencies

RESUMEN

El conocimiento de los defectos moleculares responsables de algunas inmunodeficiencias primarias (IDP) tiene indudables ventajas para establecer un diagnóstico seguro de la enfermedad, lo que nos permitirá no sólo establecer un pronóstico, sino también instaurar el tratamiento más adecuado. Una vez realizado el diagnóstico molecular algunos de estos enfermos podrán beneficiarse de la terapia génica. Pero aparte del diagnóstico de la enfermedad, vemos cómo las técnicas de biología molecular nos facilitan el poder establecer la condición de portadoras con la mayor fiabilidad y, cuando la historia familiar lo sugiera y el defecto en la familia ya sea conocido, podremos hacer el diagnóstico prenatal que permitirá establecer el tratamiento lo más precozmente posible.Utilizando la técnica de polimorfismos en la conformación de la cadena sencilla (SSCP) seguida de secuenciación directa, hemos encontrado 22 mutaciones diferentes en otros tantos enfermos de familias no relacionadas y con fenotipo compatible con agammaglobulinemia ligada al cromosoma X (ALX).Catorce de estas mutaciones son nuevas, no descritas previamente y las otras 8 ya están recogidas en la base de datos (http//www.uta.fi/imt/bioinfo/Btkbase).El análisis de portadora se llevó a cabo en todas las madres y sólo en uno de los enfermos la mutación fue de novo. El estudio del gen de la Btk nos permitió el diagnóstico diferencial con el síndrome variable común de inmunodeficiencia (SVCID) en algunos pacientes que cursan con ausencia o muy bajo número de linfocitos B, así como con formas de agammaglobulinemia autosómica recesiva.Utilizando la misma tecnología, hemos podido encontrar mutaciones en el gen del CD40 ligando (CD40L), en tres familias en las que alguno de sus miembros tenía un fenotipo clínico y analítico compatible con el síndrome de hiper-IgM ligado al cromosoma X (HIM-X). El diagnóstico molecular nos ha sido de gran utilidad a la hora de establecer la condición de portadoras en estas familias así como para hacer el diagnóstico diferencial, en los afectos, con el SVCID.Sólo así se ha podido dar el consejo genético adecuado (AU)

ABSTRACT

Knowledge of the molecular defects responsible for some primary immunodeficiency diseases (PIDs) offers undoubted advantages in establishing a reliable diagnosis. Such knowledge would allow us not only to establish a prognosis but also to instigate the most appropriate therapy. After molecular diagnosis, some patients could benefit from gene therapy. However, apart from the diagnosis of the disease, molecular biological techniques also enable more reliable identification of carriers and, when suggested by the family history and when the familial defect is already known, prenatal diagnosis will also be possible, thus establishing the earliest possible treatment. Using the single-stranded conformational polymorphism technique followed by direct sequencing, we found 22 different mutations in 22 patients from unrelated families and with a phenotype compatible with x-linked agammaglobulinemia. Fourteen of these are new, previously undescribed mutations and the remaining eight are already included in the data base (http//www.uta.fi/imt/bioinfo/Btkbase). Analysis of the female carrier was performed in all the mothers and the mutation was de novo in only one patient. Study of the BtK gene enabled differential diagnosis with common variable immunodeficiency disease in some patients who showed absent or very low lymphocyte B counts as well as forms of autosomal recessive agammaglobulinemia. Using the same techniques, we were able to identify mutations in the CD40 ligand gene in three families in which one of the members had clinical and biological phenotype compatible with X-linked hyper-IgM. Molecular diagnosis was very useful in identifying carriers in these families as well as in making the differential diagnosis among patients with common variable immunodeficiency disease. Purely on this were we able to provide appropriate genetic counseling (AU)