Desenvolvimento, in vitro, de blastômeros isolados e embriöes humanos, pós-biopsia, no período pré-implantaçäo / Development, in vitro, of isolated blastomeres and human embryos, pos biopsy, in preimplantation period

RESUMO

Embriöes humanos normalmente fertilizados foram biopsiados, em estágio de clivagem, no dia 3 após fertilizaçäo in vitro (estágio de 6 a 10 células). Vinte e oito embriöes tiveram 1 blastômero removido e 19 embriões, 2 blastômeros, que foram colocados em co-cultura com os embriöes biopsiados. Embriöes e blastômeros foram analisados diariamente para avaliaçäo do desenvolvimento morfológico até o dia 6, quando o número de células foi contado, através de marcaçäo nuclear. No total, 53 por cento dos embriões biopsiados (25/47), atingiram o estágio de blastocisto entre o dia 5 e o dia 6, e a proporçäo foi a mesma, independente do número de células removidas. O número total de células no estágio de blastocisto (56,2 ñ 3,0; 64,7 ñ 5,5) e o número de células do trofectoderma (45,4 ñ 3,5; 44,0 ñ 5,7) e do embrioblasto (14,0 ñ 1,2; 16,6 ñ 1,8) näo foram significantemente diferente nos embriões que tiveram 1 ou 2 células removidas, respectivamente. Setenta e dois por cento dos blastômeros dividiram-se pelo menos uma vez, no período de 3 dias em cultura, e 50 por cento dividiram-se mais de uma vez. O número total de células após 3 dias em cultura foi de 4,8 ñ 0,51 por blastômero quando uma célula foi removida, e 8,3 ñ 1,0 quando duas células foram removidas. Cinquenta e cinco por cento dos blastômeros cavitaram neste período. Dos blastômeros removidos de embriöes que se desenvolveram até o estágio de blastocisto, 92 por cento sofreram divisäo e 76 por cento cavitaçäo. Naqueles removidos de embriöes que näo se desenvolveram até o estágio de blastocisto, 50 por cento sofreram divisäo (p<0,002) e 32 por cento cavitaçäo (p<0,003). Oito por cento dos blastômeros do primeiro grupo e 41 por cento dos blastômeros do segundo, näo sofreram divisäo ou cavitaçäo (p<0,008). Concluindo, a remoçäo de 1 ou 2 blastômeros, pela técnica de biopsia de embriöes humanos em estágio de 8 células, näo afeta adversamente o desenvolvimento embrionário, sendo que näo existe diferença em se remover 1 ou 2 células; blastômeros isolados, biopsiados de embriöes humanos em estágio de 8 células, possuem a capacidade de proliferar, formar cavidade e diferenciar em células do trofectoderma, in vitro, quando mantidos em co-cultura com os embriöes de origem e; blastômeros de um mesmo embriäo possuem um desenvolvimento sincrônico e equivalente, mesmo quando isolados e cultivados externamente ao embriäo de origem...