Mapeamento de bandas de Trans-splicing in vitro com extratos nucleares de Tryopanosoma cruzi / Band mapping of in vitro trans-splicing reaction using Trypanosoma cruzi nuclear extracts
Rev. ciênc. farm
; 22(2): 295-306, 2001. ilus, graf
Artigo
em Português
| LILACS
| ID: lil-314690
Biblioteca responsável:
BR33.1
RESUMO
A maturaçäo dos pré-mRNAs em tripanosomatídeos ocorre por meio de um mecanismo denominado trans-splicing, que envolve a excisäo dos íntrons e a uniäo dos éxonsde dois transcritos independentes. Um transcrito curto , splice leader (SL) RNA, é trans-spliceado a pré-mRNAs aceptores, originando o RNA maduro. O objetivo deste trabalho foi padronizar as condiçöes necessárias que favoreçam essa reaçäo in vitro, empregando, para este fim, extratos nucleares de formas epimastigotas de T. cruzi e pré-mRNA de alfa-tubulina de tripanosoma africano. Nas condiçöes experimentais para a reaçäo de trans-splicing, em que se utilizou extrato nuclear de cepa Bolíviae o pré-mRNA a-tubulina (aceptor) marcado radioativamente, na ausência do pré-mRNA SL exógeno, foi obtida uma banda acima do pré-mRNA de alfa-tubulina (possível produto), sugerindo que esta reagiu com o SL presente no extrato nuclear. A banda foi processada, mas näo se detectou a sequência do produto esperado(SL + éxon alfa-tubulina). Entretanto, o tamanho da banda na reaçäo de trans-splicing (acima do pré-mRNA) pode trtar-se do lariat, cuja estrutura molecular näo possibilitaria seu sequenciamento pela metodologia empregada. Interessante salientar que a banda somente aparece na reaçäo de trans-splicing contendo ATP, o que sugere tratar-se de uma reaçäo de transesterificaçäo.
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Coleções:
Bases de dados internacionais
Base de dados:
LILACS
Assunto principal:
Trypanosoma cruzi
/
Técnicas In Vitro
/
Splicing de RNA
/
Trans-Splicing
Limite:
Animais
Idioma:
Português
Revista:
Rev. ciênc. farm
Assunto da revista:
Farmacologia
Ano de publicação:
2001
Tipo de documento:
Artigo
País de afiliação:
Brasil
Instituição/País de afiliação:
UNESP/BR