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Síntese química e oxidaçäo das pontes de dissulfeto doinibidor de tripsina da família Squash SETI-IIa e alguns análagos / Chemical synthesis and oxidation of disulfide bonds the squash trypsin inibitor SETI-IIa and analogs
Säo Paulo; s.n; 2002. [159] p. ilus, tab.
Tese em Português | LILACS | ID: lil-330777
Biblioteca responsável: BR1.2
Localização: BR1.2; 7423
RESUMO
0 inibidor de tripsina da família "squash" SETI-Ila (Sechium edule trypsin inhibitor lia) um dos menores inibidores fortes descritos na literatura (Ki 10-9M). Ele contém 31 resíduos aminoácidos por molécula dos quais 6 são cisteínas. Sua seqüência de aminoácidos EDRKCPKILMRCKR SDCLKCTCQESGYCG, e forma uma compacta estrutura tridímensior mantida por 3 pontes dissulfeto. 0 inibidor foi extraído das sementes de chuchu (Sechium edul e purificado utilizando-se precipitação corra acetona, cromatografia de gel-filtração cromatografia de fase reversa por HPLC, servindo como material de referencia no presen estudo. 0 padrão das pontes dissulfeto do inibidor SETI-Ila foi determinado por digesf enzimática com a enzima termolisina e caracterização dos fragmentos por análise c aminoácidos e seqüencíamento por degradação automática de Edman. 0 padrão de pontE dissulfeto determinado foi Cys1-Cys4, Cys2-Cys5 e Cys3-Cys6, correspondente ao parir( relatado para outro inibidor da mesma família (MCTI). 0 peptídeo SETI-lia e dois análogo [desl-4]SETI-lia e [des1-4, P11, G20]SETI-Ila também foram obtidos por síntese automática c peptídeos utilizando-se a química Fmoc. 0 enovelamento e oxidação das pontes dissulfeto f realizado com mistura de GSH e GSSG em solução do peptídeo díluída (<50pglmL) ou ei coluna de gel-filtração, minimizando as interações intercadeia. Devido ao baixo rendimento dc peptídeos sintetizados automaticamente, utilizou-se a cromatografia de afinidade por tripsir antes da etapa de fase reversa em HPLC para purificar-los. Tanto o peptídeo sintético SETI-IIa quanto os análogos [des1-4]SETI-lia e [des1-4, P11, G20]SETI-IIa apresentaram atividade inibitória de tripsina após oxidação dos resíduos de cisteínas. A seqüência [des1-4, P11 G20]SETI-IIa foi sintetizada para viabilizar a síntese por condensação de fragmentos. 0 padrão das...(au)
Assuntos
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Coleções: Bases de dados internacionais Base de dados: LILACS Assunto principal: Biossíntese Peptídica / Inibidores da Tripsina / Edificação em Ponte / Dissulfetos Idioma: Português Ano de publicação: 2002 Tipo de documento: Tese
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Coleções: Bases de dados internacionais Base de dados: LILACS Assunto principal: Biossíntese Peptídica / Inibidores da Tripsina / Edificação em Ponte / Dissulfetos Idioma: Português Ano de publicação: 2002 Tipo de documento: Tese
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