Avaliação eletroforética, cromatográfica e molecular da Hb D Los Angeles no Brasil / Electrophoretical, chromatographic and molecular valuations of Hb D Los Angeles in Brazil

RESUMO

A variante de hemoglobina (Hb) D mais comum, Hb D Los Angeles ou D Punjab, é originada de uma transversão GAA->CAA no códon 121 da globina beta; essa mutação resulta na substituição do ácido glutâmico por glutamina na proteína. É a terceira variante de hemoglobina mais freqüente da população brasileira. Como as hemoglobinas D apresentam migração similar à hemoglobina S em pH alcalino, e com a hemoglobina A em pH ácido, são necessários vários testes para o correto diagnóstico. No presente estudo objetivou-se relacionar os diferentes procedimentos laboratoriais de rotina diagnóstica, além da análise molecular, para estabelecer o perfil de Hb D Los Angeles no Brasil. Foram analisados 47 indivíduos da população brasileira com provável Hb D Los Angeles, por vários procedimentos eletroforéticos em diferentes condições de pH, além da cromatografia líquida de alta pressão, e testes moleculares para confirmação da mutação. Foram encontrados quatro tipos de combinações de hemoglobinas 42 indivíduos portadores de hemoglobina AD Los Angeles, dois indivíduos com doença de Hb S/D Los Angeles, dois indivíduos com Hb D Los Angeles e talassemia beta e um indivíduo com Hb D Los Angeles e Hb Lepore. Os indivíduos heterozigotos para D Los Angeles são assintomáticos, entretanto, em associação com outras variantes e talassemias podem apresentar graus variáveis de manifestações clínicas. Os resultados apresentados enfatizaram a necessidade da associação de várias metodologias para a identificação da Hb D Los Angeles, além de auxiliar na elucidação de combinações raras

ABSTRACT

The most common Hb D variant, the Hb D-Los Angeles,also know as Hb D-Punjab, originates through aGAA¨CAA change at the 121 codon of the ƒÀ globingene; this mutation results in the replacement ofglutamic acid for glutamine in the protein. It is thethird most common hemoglobin variant in theBrazilian population. This variant has electrophoreticmigration in alkaline pHs similar to Hb S and identicalmigration to hemoglobin A in acidic pHs. Thus, severaltechniques are necessary for its correct diagnosis. Thepurpose of this work was to relate the differentlaboratorial techniques and molecular analyses to determinethe profile of Hb D Los Angeles in Brazil. Fortysevenindividuals from the Brazilian population withHb D Los Angeles were studied. Multiple electrophoresisin several experimental conditions were carried out,in addition to high performance liquid chromatography (HPLC) and molecular analysis to confirm thismutation. Four compound heterozygotes were observed42 individuals heterozygous Hb AD Los Angeles, twowith Hb S/D Los Angeles disease, two individuals withHb D Los Angeles and beta-thalassemia and one withHb D Los Angeles and Hb Lepore. The heterozygoushemoglobin D Los Angeles is asymptomatic, even thoughits association with other variants and thalassemias maypresent varying degrees of clinical manifestations. Theresults presented emphasize the significance of theassociation of different laboratorial techniques for DLos Angeles diagnosis, and help to elucidate rarecombinations.