Analise in vitro da proliferação e diferenciação de células de medula óssea humana, cultivadas sobre discos de titânio e irradiada com laser terapêutico / Analysis in vitro of the proliferation and diferentiation of cells of ossea marrow human being, cultivated on titanium records and radiated with therapeutical laser

RESUMO

Recentemente, a laserterapia tem sido utilizada na Odontologia visando seus efeitos terapêuticos e biomodulares sobre o aumento da velocidade e qualidade de integração entre os implantes dentais e os tecidos ósseo e periodontal. Entretanto, permanece incerto se é possível haver biomodulação do crescimento celular pelo laser na presença de implantes de titânio. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o crescimento, proliferação e diferenciação de células derivadas de medula óssea humana, cultivadas sobre discos de titânio altamente polidos, e submetidos à irradiação com laser diodo vermelho A=685 nm, através da análise quantitativa do número de células comprometidas com o fenótipo osteogênico e da detecção de proteinas específicas para osteonectina, osteopontina e osteocalcina. Para isso, células da medula óssea foram obtidas da crista ilíaca de um doador humano adulto e rotineiramente processadas até as condições experimentais. As células foram cultivadas sobre discos de titânio altamente polidos previamente colocadosem uma placa de 24 poços. Após o cultivo, um grupo de 14 culturas foi submetido localmente a quatro aplicações de laser (laser diodo 7 mW, A=685 nm, O,60 mm) com uma dose de 1,2J/cmquadrado por tratamento e ou outro foi mantido sem qualquer tratamento. Os períodos de observação das culturas foram estabelecidos em quatro, sete, 15,21,27 e 32 dias. Grupos controles de células cultivadas diretamente sobre a placa também foram conduzidos. Os resultados mostraram um aumento significativo no número médio de células no grupo irradiado nos períodos de sete (p=0,000) e 21 (p=0,011) dias de cultura quando comparados com os grupos que não receberam irradiação laser. Em todos os períodos, os níveis de expressão da osteopontina e osteocalcina estavam marcadamente aumentados nos grupos irradiados quando comparados com os grupos não irradiados. A melhor média de proliferação foi obtida no período de sete dias após a cultura. Os dados aqui obtidos permitem concluir que o laser, utilizado nesta dosagem e comprimento de onda, pode afetar positivamente a proliferação celular in vitro, principalmente nos períodos iniciais, e que pode ser usado durante o processo de osteointegração de implantes dentais