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Cyclodextrin glycosyltransferase from Bacillus licheniformis: optimization of production and its properties
Bonilha, Paulo Roberto Martins; Menocci, Vivian; Goulart, Antonio José; Polizeli, Maria de Lourdes Teixeira de Moraes; Monti, Rubens.
Afiliação
  • Bonilha, Paulo Roberto Martins; Universidade Estadual Paulista 'Júlio de Mesquita Filho'. Instituto de Química. Departamento de Bioquímica e Química Tecnológica. Araraquara. BR
  • Menocci, Vivian; Universidade Estadual Paulista 'Júlio de Mesquita Filho'. Faculdade de Ciências Farmacêuticas. Departamento de Alimentos e Nutrição. Araraquara. BR
  • Goulart, Antonio José; Universidade Estadual Paulista 'Júlio de Mesquita Filho'. Instituto de Química. Departamento de Bioquímica e Química Tecnológica. Araraquara. BR
  • Polizeli, Maria de Lourdes Teixeira de Moraes; Universidade Estadual Paulista 'Júlio de Mesquita Filho'. Instituto de Química. Departamento de Bioquímica e Química Tecnológica. Araraquara. BR
  • Monti, Rubens; Universidade Estadual Paulista 'Júlio de Mesquita Filho'. Instituto de Química. Departamento de Bioquímica e Química Tecnológica. Araraquara. BR
Braz. j. microbiol ; 37(3): 317-323, July-Sept. 2006. ilus, graf, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-442152
Biblioteca responsável: BR32.1
ABSTRACT
Cyclodextrin glycosyltransferase (EC 2.4.1.19) is an enzyme that produces cyclodextrins from starch via an intramolecular transglycosylation reaction. An alkalophilic Bacillus strain, isolated from cassava peels, was identified as Bacillus licheniformis. CGTase production by this strain was better when potato starch was used as carbon source, followed by cassava starch and amylopectin. Glucose and amylose, on the other hand, acted as synthesis repressors. When the cultivation was supplemented with sodium ions and had the pH adjusted between 6.0 and 9.0, the microorganism maintained the growth and enzyme production capacity. This data is interesting because it contradicts the concept that alkalophilic microorganisms do not grow in this pH range. After ultrafiltration-centrifugation, one protein of 85.2 kDa with CGTase activity was isolated. This protein was identified in plates with starch and phenolphthalein. Determination of the optimum temperature showed higher activities at 25°C and 55°C, indicating the possible presence of more than one CGTase in the culture filtrate. Km and Vmax values were 1.77 mg/mL and 0.0263 U/mg protein, respectively, using potato starch as substrate.
RESUMO
Ciclodextrina glicosiltransferase (EC 2.4.1.19) é uma enzima que produz ciclodextrinas a partir de amido via transglicosilação intramolecular. Uma cepa de Bacillus alcalofílico, isolada de cascas de mandioca, foi identificada como Bacillus licheniformis. A produção de CGTase por esta cepa foi melhor quando amido de batata foi utilizado como fonte de carbono, seguido por amido de mandioca e amilopectina. Glicose e amilose, por outro lado, atuaram como repressor de síntese desta enzima. Quando o cultivo foi suplementado com íons sódio e teve o pH ajustado entre 6,0 e 9,0, o microrganismo manteve a capacidade de crescimento e de produção da enzima. Este dado é interessante pois contraria o conceito de que microrganismos alcalofílicos não apresentam crescimento nesta faixa de pH. Após ultrafiltração-centrifugação, uma proteína de 85,2 kDa com atividade de CGTase foi isolada. Esta proteína foi identificada em placas contendo amido e fenolftaleína. A determinação da temperatura ótima mostrou atividades mais elevadas em 25°C e 55°C, indicando a possível presença de mais de uma CGTase no filtrado de cultura. Valores de Km e Vmax foram 1,77 mg/mL e 0,0263 U/mg proteína, respectivamente, usando amido de batata como substrato.
Assuntos
Texto completo: Disponível Coleções: Bases de dados internacionais Base de dados: LILACS Assunto principal: Bacillus / Técnicas In Vitro / Solanum tuberosum / Manihot / Glicosiltransferases / Ciclodextrinas / Cimicifuga Idioma: Inglês Revista: Braz. j. microbiol Assunto da revista: Microbiologia Ano de publicação: 2006 Tipo de documento: Artigo / Documento de projeto País de afiliação: Brasil Instituição/País de afiliação: Universidade Estadual Paulista 'Júlio de Mesquita Filho'/BR
Texto completo: Disponível Coleções: Bases de dados internacionais Base de dados: LILACS Assunto principal: Bacillus / Técnicas In Vitro / Solanum tuberosum / Manihot / Glicosiltransferases / Ciclodextrinas / Cimicifuga Idioma: Inglês Revista: Braz. j. microbiol Assunto da revista: Microbiologia Ano de publicação: 2006 Tipo de documento: Artigo / Documento de projeto País de afiliação: Brasil Instituição/País de afiliação: Universidade Estadual Paulista 'Júlio de Mesquita Filho'/BR
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