Incorporación química de la sonda fluorescente FlAsH en la proteína Hha: aplicación al estudio del complejo Hha/H-NS / Chemical incorporation of fluorescent probe flAsH on the Hha protein: application to the study of complex Hha/H-NS
NOVA publ. cient
; 7(11): 12-20, ene.-jun. 2009. ilus, graf
Artigo
em Espanhol
| LILACS
| ID: lil-613055
Biblioteca responsável:
CO242.1
RESUMEN
El objetivo de esta investigación fue realizar estudios de incorporación de la sonda FlAsH como posible herramienta para el estudio in vitro e in vivo de la proteína Hha y de su interacción con H-NS. Se construyó una proteína con la secuencia específica CCPGCC capaz de unir la sonda fluorescente FlAsH; posteriormente se desarrollaron procesos de transformación, expresión y purificación, con los cuales se evidenció que a pesar de introducir una secuencia adicional no nativa a la proteína, se pudo obtener proteína en buena cantidad, estabilidad, rendimiento y con un alto nivel de pureza. La optimización del protocolo de incorporación del FlAsH se hizo teniendo en cuenta el rendimiento y el tiempo de reacción. El complejo FlAsH/HhaCCPGCC se caracterizó mediante fluorescencia y se comprobó mediante MALDI TOF. La incorporación HhaCCPGCC1/ FlAsH no se obtuvo en un alto porcentaje como se esperaba, por esta razón no se pudieron hacer los estudios de interacción entre el complejo de proteínas Hha y H-NS.
Texto completo:
Disponível
Coleções:
Bases de dados internacionais
Base de dados:
LILACS
Assunto principal:
Sondas Moleculares
/
Proteínas
/
Fluorescência
/
Nucleotídeos
Idioma:
Espanhol
Revista:
NOVA publ. cient
Assunto da revista:
Bacteriologia
/
Biologia
Ano de publicação:
2009
Tipo de documento:
Artigo
País de afiliação:
Colômbia
/
Espanha
Instituição/País de afiliação:
Universidad CES/CO
/
Universidad de Barcelona/ES