Inmunodiagnóstico en Didelphis marsupialis usando un antígeno de Paragonimus de Venezuela / Immunodiagnostic in Didelphis marsupialis using an antigen of Venezuelan Paragonimus
Acta bioquím. clín. latinoam
; 44(4): 681-688, dic. 2010. ilus, graf, tab
Artigo
em Espanhol
| LILACS
| ID: lil-633137
Biblioteca responsável:
AR1.2
RESUMEN
Los Paragonimus son trematodos que habitualmente viven en los pulmones de mamíferos carnívoros y omnívoros, entre ellos el hombre. En el oriente venezolano se encuentra el único foco de Paragonimus sp. donde Didelphis marsupialis es el único reservorio demostrado hasta ahora. Con el fin de tener herramientas de inmunodiagnóstico que detecten la presencia de Paragonimus sp. en esta especie, se elaboraron varios reactivos para realizar un ensayo inmunoenzimático ELISA. Entre ellos se obtuvo un antígeno crudo soluble de vermes adultos de Paragonimus y una inmunoglobulina de gallina anti-IgG de Didelphis marsupialis. Los mismos se capturaron en la localidad de Aguas Blancas, municipio Montes, estado Sucre, Venezuela, y se obtuvieron muestras sanguíneas; en el caso de estar infectados, los vermes adultos se extrajeron del pulmón. Los parásitos se homogenizaron y ultracentrifugaron para obtener la fracción soluble del parásito (FSPA) como antígeno para el ELISA y Western blot y detectar los anticuerpos en los Didelphis marsupialis. El análisis electroforético mostró 22 moléculas entre 6 y 82 kDa; por Western blot se presentó un reconocimiento antigénico de 8 moléculas siendo las de 112 kDa y 268 kDa las más reconocidas por los sueros positivos. Los sueros negativos no reconocieron ninguna proteína. La producción de IgY en gallinas permitió desarrollar las técnicas de inmunodiagnóstico para la búsqueda de anticuerpos específicos anti-Paragonimus sp. en Didelphis, cuya aplicación permitirá establecer la vigilancia epidemiológica de estos reservorios en áreas endémicas sin sacrificio de los mismos.
ABSTRACT
Paragonimus are trematodes that normally live in the lungs of carnivorous and omnivorous mammals such as humans. An outbreak of Paragonimus sp. in which Didelphis marsupialis was the only wild reservoir incriminated was described in eastern Venezuela. In order to have immunological tools to detect the presence of Paragonimus sp. in this reservoir, a whole antigen of the adult worm of this parasite was elaborated. Didelphis marsupialis were captured in the locality of Aguas Blancas, Montes municipality, Sucre state, Venezuela, from which blood samples were obtained and a search for worms was performed in lungs. Worms were homogenized and ultracentrifugated to obtain FSPA to perform immunoassay (ELISA) to detect antibodies in opossums. The electrophoresis analysis showed a pattern of 22 molecules between 6 and 82 kDa; by western blot, the antigenic recognition of 8 antigenic molecules appeared,112 kDa and 268 kDa molecules being the most strongly recognized by positive sera. The negative sera did not recognize any band. The production of IgY in chicken enabled the development of reagents capable of performing a standard immunodiagnosis technique to find specific anti-Paragonimus sp. in Didelphis marsupialis in order to establish epidemiological surveillance of these reservoirs in endemic areas.
Texto completo:
Disponível
Coleções:
Bases de dados internacionais
Contexto em Saúde:
Doenças Negligenciadas
Problema de saúde:
Zoonoses
Base de dados:
LILACS
Assunto principal:
Paragonimus
/
Venezuela
/
Testes Imunológicos
/
Didelphis
/
Antígenos
Tipo de estudo:
Estudo diagnóstico
País/Região como assunto:
América do Sul
/
Venezuela
Idioma:
Espanhol
Revista:
Acta bioquím. clín. latinoam
Assunto da revista:
Bioqu¡mica
/
Qu¡mica Cl¡nica
Ano de publicação:
2010
Tipo de documento:
Artigo
País de afiliação:
Venezuela
Instituição/País de afiliação:
Universidad Central de Venezuela/VE
/
Universidad de Oriente/VE