Papel regulatório da anexina-1 e de seu derivado Ac2-26 no modelo murino de silicose aguda / Regulatory role of annexin-1 and its derivative Ac2-26 in a murine model of acute silicosis

RESUMO

A silicose, uma doença ocupacional causada por inalação de partículas de sílica cristalina, é caracterizada por intensa resposta inflamatória seguida de fibrose e formação de granulomas, e até o momento permanece sem tratamento efetivo. O processo inflamatório é regulado fisiologicamente por agentes antiinflamatórios endógenos que são capazes impedir a sua exarcebação. Glicocorticóides endógenos, cuja parte de suas ações antiinflamatórias são mediadas pela proteína anexina-1 (ANX1), fazem parte desse contexto. No presente estudo, investigamos o papel da proteína ANX1, e de seu derivado peptídico Ac2-26 (50 - 200µg), na fase aguda da silicose. O esteróide clássico, dexametasona (25µg; Dexa), foi utilizado como controla. A instilação intranasal de sílica (10 mg) em [camundognos] Swiss-Webster desencadeou a ocorrência de aumento no nivel basal de resistência e elastância pulmonar, e hiperreatividade das vias aéreas ao agente colinérgico metacolina. Este quadrou mostrou-se associado um intenso infiltrado inflamatório e deposição de colágeno, com formação de granulomas. O tratamento com Ac226 inibiu acentuadamente o infiltrado leucocitário, a deposição de colágeno e a formação de granulomnas nos animais silicóticos, condições que foram apenas parcialmente afetadas pela Dexa. A geração de citocinas (TNF alfa e TGFbeta) e quimiocinas (KC e MCP1) foi reduzida pelo peptídeo, porém não pela Dexa. O aumento da resistência e da elastância pulmonar, assim como a hiperreatividadeà metacolina, foram inibidos tanto pelo peptídeo como pela Dexa. In vitro, os fibroblastos pulmonares estimulados com IL13 e TGF beta tiveram a produção de colágeno e MCP1 inibida pelo peptídeo Ac 2-26, resposta dependente de sua ação em receptores FPR1 e FPR2. A proliferação celular não foi afetada pelo peptídeo. De forma paralela, vimos que os animais nocautes para a proteína ANX1 e silicóticos apresentaram intensificação do infiltrado inflamatório, deposição de colágeno e produção de citocinas (KC, MIP2 e TNF) no parênquima pulmonar. A deficiência da ANX1 não alterou a resistência pulmonar de animais silicóticos, porém a elastância mostrou-se exarcebada. Verficamos, ainda, que os animais nocautes para ANX1 controles mostraram-se mais responsivos à estimulação com metacolina, porém não à serotonina, fenômeno verificado também quando da avaliação da resposta contrátil de anéis de traquéia ex-vivo. Em conjunto, nossos resultados mostram, de forma original, que o peptídeo Ac 2-26 foi capaz de inibir o componente inflamatório e fibrótico da fase aguda da silicose, indicando ser este um composto promissor para utilização no tratamento de doenças inflamatórias fibróticas como a silicose. Além disso, demonstramos que a ausência da ANX1 exacerbou a fase aguda da silicose, reforçando achados prévios que apontam para a atividade antiinflamatória desta proteína também ao nível de fisiopatologias pulmonares.