Radioinmunoanálisis de progesterona en plasma bovino: comparación del uso de I125 y H3 como trazadores / Radioimmunoassay of progesterone in bovine plasma: comparation of the use of I125 y H3 as tracers

RESUMEN

En este trabajo se describe una técnica de radioinmunoanálisis (RIA) destinada a la determinación de progesterona en plasma de sangre periférica bovina y se compara la utilización de dos trazadores. Los trazadores empleados fueron el 125I (isótopo radioactivo del iodo) y el 3H (tritio, isótopo radiactivo del hidrógeno). Se utilizó un anticuerpo (Ac) obtenido de conejos inmunizados con 11 alfa-progesterona-hemisuccinato unido a sero-albúmina bovina. La sensibilidad de la técnica fue de 250 pg/ml de plasma, tanto para el RIA con 125I (empleando una curva estándar con dilución de Ac 1/100.000), como para el RIA con 3H (empleando una curva estándar con dilución de Ac 1/6.000). El límite de detección práctica (x ñ 2 S de los valores correspondientes a 0,2 ml de plasma de novillo), se encontró a una concentración de 0,200 ng/ml (RIA con 125I) y de 0,173 ng/ml (RIA con 3H). El coeficiente de correlación entre la progesterona añadida y la determinada (exactitud) fue de 0,99 (RIA con 125I) y de 0,99 (RIA con 3H). El porcentaje de recuperación fue de 89,4% (RIA con 125I) y de 92% (RIA con 3H). Los coeficientes de variación intra (IE) e interensayos (EE) fueron IE + 11%, EE + 12,9% (RIA cn 125I), IE + 8,97%, EE + 12,14% (RIA con 3H). Al utilizar el método de RIA con 125I o con 3H para la medición de la misma muestra de plasma (valores EE), no se observaron diferencias significativas (p < 0,01). Se concluye que no existen evidencias para suponer que los resultados obtenidos de las dos variantes utilizadas sean diferentes